加味丹栀逍遥散联合脐带间充质干细胞治疗中风后抑郁症的临床观察

目的:观测加味丹栀逍遥散联合人脐带间充质干细胞(HUC-MSCs)对中风后抑郁症的临床疗效,以及对血清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)、IL-6、去甲肾上腺素(NE)、5-羟色胺(5-HT)和脑源性神经营养因子(BDNF)水平的影响。方法:中风后抑郁症患者60例,随机分为观察组和对照组,每组30例。观察组给予加味丹栀逍遥散联合人脐带间充质干细胞治疗,对照组给予加味丹栀逍遥散联合氟西汀治疗,2组疗程均为8周。分别在治疗前后用汉密尔顿抑郁量表(HAMD)对2组患者进行评定,ELISA法测定血清中IL-1β、IL-6、TNF-α、5-HT、NE和BDNF水平。结果:治疗8周后,观察组总有效率显著高于对照组(P<0.05),HAMD评分显著低于对照组(P<0.05),血清TNF-α、IL-1β和IL-6均显著低于对照组(P<0.05),而5-HT、NE和BDNF均显著高于对照组(P<0.05)。与同组治疗前比较,治疗后2组的HAMD评分均显著下降(P<0.05),血清TNF-α、IL-1β和IL-6均显著降低(P<0.05),而5-HT、NE和BDNF均显著增高(P<0.05)。结论:加味丹栀逍遥散联合人脐带间充质干细胞治疗中风后抑郁症疗效较好,其机制可能与加味丹桅逍遥散联合脐带间充质干细胞抗炎、增加单胺类神经递质释放、刺激脑内神经营养因子的分泌有关。

二陈汤加味对慢性阻塞性肺疾病大鼠TLR4/MyD88/NF-κB信号通路的影响

目的:观察二陈汤加味对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠肺Toll样受体4(TLR4)/髓样分化因子88(MyD88)/核转录因子-κB(NF-κB)通路及相关分子的影响,探讨二陈汤加味对COPD抗炎作用的分子机制。方法:将40只SD大鼠随机平均分为正常组、模型组、二陈汤加味组和EVP4593(NF-κB抑制剂)组。以香烟烟雾联合气管滴注脂多糖(LPS)方法制备COPD大鼠模型。二陈汤加味组以10 g·kg-1灌胃(ig),EVP4593组皮下注射1 mg·kg-1,正常组、模型组ig等量生理盐水,连续干预14 d。酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清高迁移率族蛋白B1(HMGB1),趋化因子(CXCL)-2,CXCL-3和单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)水平,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR),蛋白免疫印迹法(Western blot)分别检测肺匀浆中TLR4,MyD88,NF-κB p65 mRNA及蛋白表达水平,免疫组化(IHC)检测TLR4,MyD88,磷酸化NF-κB p65(p-NF-κB p65)在大鼠肺组织中的定位表达。结果:与正常组比较,模型组肺匀浆中TLR4,MyD88,NF-κB p65 mRNA及蛋白表达均显著增加(P<0.01),HMGB1,CXCL-2,CXCL-3和MCP-1含量显著升高(P<0.01)。与模型组比较,二陈汤加味组TLR4,MyD88,NF-κB p65mRNA及其蛋白表达均显著减弱(P<0.05,P<0.01),HMGB1,CXCL-2,CXCL-3和MCP-1含量显著降低(P<0.05,P<0.01)。结论:二陈汤加味对COPD有抗炎作用,其机制可能与抑制TLR4/MyD88/NF-κB通路相关信号分子基因的表达,以及减少HMGB1,CXCL-2,CXCL-3和MCP-1的释放有关。

二陈汤加味通过抑制NLRP3通路对慢性阻塞性肺疾病的防治作用

目的:观测二陈汤加味对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠外周血单个核细胞(PBMCs)中Nod样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)炎症小体相关基因表达的影响,探讨二陈汤加味对COPD抗炎的分子机制。方法:采用脂多糖(LPS)联合香烟烟雾方法制备COPD大鼠模型。40只大鼠随机平均分为正常组,模型组,二陈汤加味组,MCC950(NLRP3抑制剂)组。造模期间(从实验第1~30天),MCC950组于实验第1天单次腹腔注射60 mg·kg-1;二陈汤加味组以10 g·kg-1剂量灌胃,1次/2 d。造模成功后,从实验第31~45天,MCC950组腹腔注射3 mg·kg-1,1次/2 d;二陈汤加味组以10 g·kg-1剂量灌胃,2次/d;正常组、模型组灌胃生理盐水10 g·kg-1。酶联免疫吸附测定法(ELISA)测定大鼠肺组织匀浆中白细胞介素-1β(IL-1β),白细胞介素-18(IL-18)和趋化因子8(CXCL8)含量;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测大鼠外周血PBMCs中NLRP3,凋亡相关斑点样蛋白(ASC)和半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-1(Caspase-1)mRNA表达;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测PBMCs中NLRP3,ASC,Caspase-1蛋白表达;光镜观察肺组织结构变化,免疫组化检测NLRP3,ASC和Caspase-1在肺组织中的定位表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠肺组织匀浆中IL-1β,IL-18和CXCL8含量均明显升高(P<0.05,P<0.01);PBMCs中NLRP3,ASC,Caspase-1 mRNA及蛋白表达水平均明显增高(P<0.01);与模型组比较,二陈汤加味组PBMCs中NLRP3,ASC,Caspase-1 mRNA和蛋白表达水平均明显降低(P<0.05,P<0.01),肺匀浆中IL-1β,IL-18和CXCL8含量均明显下降(P<0.05,P<0.01),肺组织结构明显改善。结论:二陈汤加味对COPD有抗炎作用。其机制可能与抑制PBMCs中NLRP3,ASC,Caspase-1 mRNA表达,减少IL-1β,IL-18和CXCL8的释放有关。

基于CXCL8-CXCR1/2轴探讨二陈汤加味对COPD大鼠的抗炎机制

目的:观察二陈汤加味对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠肺组织CXC趋化因子配体(CXCL)8-CXC趋化因子受体(CXCR)1/2表达的影响,探讨二陈汤加味对COPD抗炎作用的分子机制。方法:40只SD大鼠随机分为正常组、模型组、二陈汤加味组和急支糖浆组,每组10只。以香烟烟雾联合脂多糖(LPS)制备COPD大鼠模型。二陈汤加味组以10 g·kg^-1灌胃(ig)给药,急支糖浆组以10 g·kg^-1剂量ig,正常组、模型组ig等量生理盐水,连续干预14 d。酶联免疫吸附测定(ELISA)检测大鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)中趋化因子(Chemokines)CXCL1,CXCL8含量,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR),蛋白免疫印迹法(Western blot)分别检测肺组织匀浆中CXCL8,CXCR1,CXCR2 mRNA及蛋白表达,苏木素-伊红(HE)染色观察肺组织的病例变化,免疫组织化学(IHC)检测肺组织中CXCL8,CXCR1和CXCR2的蛋白定位表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠BALF中CXCL1,CXCL8含量显著升高(P<0.01),肺组织CXCL8,CXCR1,CXCR2 mRNA及蛋白表达均明显升高(P<0.05,P<0.01)。与模型组比较,二陈汤加味组显著降低CXCL1,CXCL8含量(P<0.01),明显降低CXCL8,CXCR1,CXCR2 mRNA及蛋白表达(P<0.05),且明显改善肺组织病理学损伤。结论:二陈汤加味对COPD有抗炎作用,其机制可能与抑制CXCL8,CXCR1,CXCR2 mRNA及其蛋白的表达,减少趋化因子CXCL1,CXCL8的释放有关。

二陈汤加味对急性加重期COPD患者CXCL8及CXCR1/2蛋白表达的影响

目的:观察二陈汤加味对急性加重期慢性阻塞性肺疾病(AECOPD)患者CXC趋化因子配体8(CXCL8)及其受体CXCR1/2,巨噬细胞炎性蛋白2(MIP-2)蛋白表达的影响,评价二陈汤加味对AECOPD患者抗炎的作用与机制。方法:选取符合纳入标准的AECOPD患者200例,随机分成观察组和对照组各100例。2组均在西药治疗的基础上,对照组给予急支糖浆,观察组给予二陈汤加味,疗程14 d。酶联免疫吸附测定(ELISA)检测患者血浆中巨噬细胞炎性蛋白2(MIP-2),CXCL8含量;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测外周血单个核细胞(PBMCs)中CXCL8,CXCR1和CXCR2蛋白表达;免疫细胞化学染色检测PBMCs中CXCL8,CXCR1,CXCR2定位表达及阳性率。结果:治疗后观察组较同组治疗前血浆中CXCL8,MIP-2含量均显著减少(P<0.05),PBMCs中CXCL8,CXCR1,CXCR2蛋白表达均降低(P<0.05,P<0.01)。治疗后与对照组比较,观察组总有效率、肺FEV1均显著高于对照组(P<0.05),血浆MIP-2,CXCL8含量,CXCL8,CXCR1蛋白表达均显著低于对照组(P<0.05)。结论:二陈汤加味对COPD有抗炎作用。其机制可能与下调CXCL8,CXCR1,CXCR2表达,减少CXCL8,MIP-2的合成与释放,抑制炎细胞的过多渗出与趋化,从而减轻炎症反应有关。

二陈汤加味对慢阻肺大鼠Th1/2/9细胞相关淋巴因子及IL-4R1/IL-13RA1的调节作用

目的:探究二陈汤加味对慢性阻塞性肺病(COPD)大鼠血浆、支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞介素-12(IL-12),γ-干扰素(IFN-γ),IL-9,IL-4和IL-13水平以及对细支气管组织中IL-4受体1(IL-4R1),IL-13受体A1(IL-13RA1)定位表达的影响。方法:将大鼠随机分为正常组,模型组,二陈汤加味低、中、高剂量组,共5组,每组10只。采用香烟烟雾联合脂多糖(LPS)方法制备COPD大鼠模型,二陈汤加味低、中、高剂量组分别以5,10,20 g·kg^-1灌胃(ig),正常组与模型组ig等量生理盐水,连续干预14 d。采用酶联免疫吸附测定(ELISA)检测大鼠血浆,BALF中IL-12,IFN-γ,IL-9,IL-4和IL-13水平,免疫组化(IHC)检测大鼠细支气管组织中IL-4R1,IL-13RA1的定位表达。结果:与正常组比较,模型组血浆BALF中IL-12,IFN-γ水平均显著降低(P<0.01),而IL-9,IL-4和IL-13的水平均显著升高(P<0.01),IL-4R1,IL-13RA1在模型组细支气管组织中的的表达均显著增强(P<0.01);与模型组比较,二陈汤加味中、高剂量血浆和BALF中的IL-12,IFN-γ水平均显著升高(P<0.01),而IL-9,IL-4和IL-13的水平均显著降低(P<0.01),IL-4R1,IL-13RA1在细支气管组织中的的表达均显著减弱(P<0.01)。结论:二陈汤加味可能通过增加IL-12,IFN-γ的释放,减少IL-9,IL-4和IL-13分泌,并抑制IL-4R1和IL-13RA1的表达,起到抗炎和保护细支气管结构的作用。