抵抗素在非酒精性脂肪肝病中对胰岛素抵抗和肝纤维化的作用

目的:探讨抵抗素(resistin)在非酒精性脂肪肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)中对胰岛素抵抗(insulin resistin,IR)及肝纤维化的作用.方法:应用高脂饮食喂养Wistar大鼠建立NAFLD肝纤维化模型.健康♂,Wistar大鼠30只,随机分成正常对照组和模型组,各15只,分别给予普通饲料和高脂饲料喂养.分别于第15、18、21周末将对照组和模型组随机各处理5只.检测空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINS)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、透明质酸(HA)、Ⅳ型胶原(CⅣ)、层粘蛋白(LN)水平,采用稳态模型评估法(HOMA)评估IR(HOMA-IR);HE、VG染色及电镜观察肝组织纤维化情况.RT-PCR法检测大鼠肝组织中resistin基因mRNA表达.结果:随着高脂喂养时间的延长,HE、VG染色及电镜观察肝组织病理学显示大鼠肝脏脂肪变性及肝纤维化程度逐渐加重,NAFLD模型组HOMA-IR、PCⅢ、LN、CⅣ、HA、resistin逐渐增加,且以21wk时升高最为明显,分别为33.74g/L±10.41g/L、2.96g/L±0.76g/L、4.14g/L±1.07g/L、19.07g/L±2.78g/L、848.87g/L±204.04g/L、0.99g/L±0.10g/L,与相应时相对照组比较差异具有统计学意义(P<0.05或P<0.01).Spearman相关性分析抵抗素与HOMA-IR、PCⅢ、LN、CⅣ、HA呈显著正相关,相关系数r分别为0.77、0.80、0.68、0.67、0.76(P<0.05或P<0.01).结论:在NAFLD纤维化形成过程中,抵抗素表达升高诱导IR并促使肝纤维化的形成与进展.

抵抗素对NAFLD肝纤维化的影响及可能的体内外机制

应用高脂饮食饲养Wistar大鼠建立非酒精性脂肪肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)肝纤维化体内模型,选用重组抵抗素作用于肝星状细胞(hepatic stellate cell-t6,HSC-T6)建立体外模型。观察肝组织纤维化的情况;检测体内体外Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、透明质酸(HA)、Ⅳ型胶原(CIV)、层黏蛋白(LN)水平;检测肝组织抵抗素mRNA和蛋白的表达水平;检测HSC-T6中转化生长因子β-1(TGF-β1)mRNA及肿瘤坏死因子α(TNF-α)mRNA表达水平。结果显示,随着高脂喂养时间的延长,大鼠肝组织抵抗表达逐渐增加且纤维化程度逐渐加重;随着抵抗素浓度的增加,HSC-T6上清中纤维化指标升高,细胞中TGF-β1mRNA及TNF-αmRNA表达增加。与对照组比较,各指标差异均有显著性(P<0.05或0.01)。上述结果显示抵抗素通过TNF-α、TGF-β1诱导NAFLD肝纤维的发生和发展。

Ki-67、p63、bcl-2蛋白在葡萄胎妊娠与水肿性流产中的诊断价值

目的:研究Bcl-2、p63和Ki-67蛋白在鉴别完全性葡萄胎(CHM)、部分性葡萄胎(PHM)、水肿性流产(HA)中的应用价值。方法:收集山东大学齐鲁医院病理科2012年1月至2018年6月的妊娠早期葡萄胎(HM)与水肿性流产样本共139例。对以上病例样本重新阅片,同时结合p57免疫组化染色,筛选出CHM 55例,PHM 29例,HA 40例。对筛选出的样本行Bcl-2、p63、Ki-67免疫组化染色。结果:Ki-67用于鉴别HA与PHM的敏感度、特异性、阳性预测值(PPV)、阴性预测值(NPV)分别为82.5%、72.4%、80.5%和75.0%;p63用于鉴别HA与PHM的敏感度、特异性、PPV、NPV分别为95.0%、79.3%、86.4%和92.0%;p63联合Ki-67用于鉴别HA与PHM的敏感度、特异性、PPV、NPV分别为95.0%、79.3%、86.4%和92.0%。p63联合Ki-67用于鉴别HA与PHM的受试者工作特征(ROC)曲线下面积(0.934)显著高于p63(0.898),差异有统计学意义(P<0.05)。结论:Ki-67与p63用于鉴别PHM与HA具有一定的应用价值,联合使用Ki-67与p63鉴别PHM与HA比单独使用两者的准确性更高。

抵抗素对脂肪变性肝细胞核因子κB和肿瘤坏死因子α表达的影响

目的探讨抵抗素（resistin）对脂肪变陛肝细胞脂质代谢及核因子κB（NF—κB）、肿瘤坏死因子（TNF）α表达的影响。方法选用软脂酸诱导L02细胞脂肪变性模拟非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）体外模型。分C组（正常对照组），P组（模型组：软脂酸20μg／ml）及分别加入重组人抵抗素50μg／L的CR组和PR组。各组给予相应处理72h后，观察细胞的脂肪变并测定细胞培养上清液中甘油三酯（TG）、ALT、AST及γ谷氨酰转移酶（GGT）的浓度；采用半定量RT-PCR及Westem blot法检测细胞胰岛素受体底物2（IRS-2）、NF—κB、TNF-α的基因及蛋白表达水平。根据资料不同应用方差分析或t检验进行统计学分析，P〈0．05为差异具有统计学意义。结果P组、CR组及PR组细胞培养上清液中TG、ALT、AST、GGT的浓度明显高于C组。分别与C组比较，P组、CR组及PR组NF—κBmRNA相对表达量0．54±0．04、0．604-0．04及1．00±0．06，与C组的0．10±0．01比较，f值分别为17．64，22．03，26．06，TNF-αmRNA相对表达量0．58±0．04、0．61±0．06及1．05±0．09，与C组的0．33±0．06比较，t值分别为5．67，5．38，11．64，相对表达量明显升高，而IRS-2mRNA（t值分别为8．19，9．23，20．93）明显降低，且P值均〈0．05，差异有统计学意义。P组与CR组间比较，t值分别为1．75，0．58，2．14，P值均〉0．05，差异无统计学意义。蛋白质表达变化趋势与mRNA变化趋势相一致。结论抵抗素可能通过NF-κB依赖途径对肝细胞脂肪变性胰岛素抵抗发挥促炎作用，从而促进NAFLD的发生与发展。

抵抗素在非酒精性脂肪肝大鼠胰岛素抵抗中的作用

目的探讨抵抗素(Resistin)在非酒精性脂肪肝(Nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD)大鼠胰岛素抵抗(Insulinresistance,IR)中的作用。方法采用改良高脂饲料喂养大鼠建立NAFLD IR大鼠模型,以基础饲料喂养的大鼠作为对照组。分别于开始造模后6、8、10周分别采集2组大鼠血清及肝脏组织,测定血清中甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、空腹血糖(Fasting plasma glucose,FPG)和空腹胰岛素(Fasting insulin,FINS)含量,并计算胰岛素敏感性指数(Insulin sensitivity index,ISI);HE染色观察肝脏病理学改变;RT-PCR和Western blot检测肝组织中胰岛素受体底物-2(Insulin receptor substrate-2,IRS-2)、抵抗素(Resistin)和核因子(NF-κB)基因的mRNA转录水平和蛋白的表达水平,并进行相关性分析。结果改良高脂饲料喂养的大鼠一般状况发生改变,显示模型复制成功;TG、TC、ALT和AST值的测定及肝组织学检查证实模型组大鼠存在高血脂和肝功损害,且有IR的现象存在;与对照组比较,模型组Resistin和NF-κB的mRNA转录水平和蛋白表达水平均明显增高,且呈时间依赖性(P<0.05),Resistin与NF-κB的表达呈正相关;IRS-2的mRNA转录水平和蛋白表达水平逐渐下降,且呈时间依赖性(P<0.05),与Resistin的表达呈负相关。结论 NAFLD中IR的发生可能与胰岛素信号通路有关,涉及其始动因素IRS-2的减少和Resistin的增加。Resistin不仅能抑制IRS的磷酸化而影响胰岛素上游信号的正常传导,还可能通过激活NF-κB抑制其下游通路的传导,而加重IR反应。