中国鼠疫菌某些生化特征及地理分布

目的探讨中国鼠疫菌株生化性状及地理分布特征。方法采用常规方法,研究我国现有11种类型的鼠疫自然疫源地2 370株鼠疫菌酵解麦芽糖、鼠李糖、蜜二糖、阿胶糖、甘油及脱氮反应的变化。结果根据测定结果,与地理分布生物群落联系起来,可将中国鼠疫自然疫源地鼠疫菌分为新的17个生化型:青藏高原青海田鼠鼠疫自然疫源地分离的鼠疫菌定名为川青高原型,新疆准噶尔盆地大沙鼠鼠疫疫源地鼠疫菌定名为准噶尔型,云南省玉龙县大绒鼠、齐氏姬鼠分离暂定名为玉龙型。青藏高原喜马拉雅旱獭鼠疫自然疫源地生化性状较为复杂,含5种类型生化型,其中藏南地区1983年后新增加了27个疫源县,本研究发现青藏高原型菌株不仅只分部在藏北高原,在藏南地区已有分布,且岗底斯山型菌株原来只分布在西南地区的仲巴、普兰,现已延伸到藏南地区。还发现一些鼠疫自然疫源地鼠疫菌生化特性有交串现象,如云南省家、野鼠鼠疫自然疫源地鼠疫菌,内蒙古高原长爪沙鼠、达乌尔黄鼠鼠疫自然疫源地。结论中国鼠疫菌对糖酵解特性较稳定,鼠疫菌生化型在各疫源地呈明显的地区性分布,与主要宿主、地理气候条件、植被等密切相关,分为17个生化型。

青海省2008-2012年鼠疫菌生物学特性及流行病学意义

目的探讨青海省鼠疫菌株生物学特点及流行病学意义,为鼠疫防治提供科学依据。方法对2008-2012年青海省分离的鼠疫菌株进行生物学研究。结果所有被试菌株其生物型为古典型,生态型均为青藏高原型,菌株基因型为5型、8型。菌株的4个毒力因子俱全,毒力测定结果显示,MLD均在10 000个菌以下,为强毒菌株。表明这些菌株均具备青海高原喜马拉雅旱獭鼠疫自然疫源地鼠疫病原体特性。结论青海省分离的鼠疫菌株属青藏高原型,鼠疫菌的毒力强,对人类健康威胁严重。

金标免疫层析法与间接血凝法在鼠疫诊断中的比较

目的了解胶体金快速检测试剂盒检测鼠疫Fl抗体的应用。方法按鼠疫胶体金快速检测试剂盒的使用说明进行,并用间接血凝法(IHA)进行比较。结果检测了采集于青海鼠疫疫源地内及非疫源地血清共3 079份,检出阳性血清268份,对照组血清14份,结果均为阴性,与IHA结果基本一致。结论胶体金快速检测试剂盒诊断鼠疫简便、快速、特异、敏感,最适宜现场鼠疫检测。

用SPSS软件计算鼠疫菌半数致死量(LD_(50))

目的应用SPSS 21.0软件进行鼠疫菌半数致死量(LD50)的计算。方法将鼠疫菌测毒数据输入SPSS 21.0软件进行分析计算。结果用SPSS 21.0进行秩和检验得出SPSS 21.0计算鼠疫菌LD50与改良寇氏法计算鼠疫菌LD50结果差异无统计学意义,用SPSS 21.0计算鼠疫菌LD50的方法,可同时计算出LD50的95%置信区间(CI)和接种菌量的95%置信区间(CI)。结论 SPSS 21.0软件可用于鼠疫菌半数致死量(LD50)的计算,该方法具有简单、快速、直观和方便的特点。

青海高原鼠疫菌DFR分型及空间分布特征的研究

目的青海高原鼠疫菌DFR分型及空间分布特征的研究。方法对分离到的青海省839株鼠疫菌,根据鼠疫菌差异区段(Different Region,DFR)分型,使用23个DFR和PMT1(质粒验证引物)的扩增引物,对被试菌株DNA进行PCR扩增。并运用青海省地方病预防控制所地理信息系统(GIS)进行鼠疫菌基因型的空间分布特征的分析。结果 839株青海省鼠疫菌共包括11个基因型,即1b、5、7、8、10、14、21、30、32、44、36,其中32、44、36型为新基因型,青海高原以5型和8型为主,祁连山南麓和青海湖环湖地区的菌株绝大多数属于基因型8型,占56.14%(471/839);位于青南高原的菌株,其基因型主要为5型,占23.12%(194/839)。青藏高原青海田鼠鼠疫疫源地鼠疫菌基因组型全部为14型,占1.19%(10/839)。结论在青海省分离的鼠疫菌中,喜马拉雅旱獭鼠疫疫源地鼠疫菌的基因型以5型和8型为主,青海田鼠疫源地鼠疫菌以基因型14型为主。

青海省鼠疫疫源地鼠疫耶尔森菌的基因型分布

目的研究青海省鼠疫耶尔森菌(鼠疫菌)基因型分布特征。方法对分离到的青海省148株鼠疫菌,根据已经证实的22个差异区段设计引物,每株鼠疫菌的每个基因差异区段都采用PCR技术进行验证。结果148株青海省鼠疫菌共包括8个基因型,即1、5、7、8、14型、新基因组型和Ype-ancestor型,其中以5型和8型为主。祁连山南麓和青海湖环湖地区的祁连、门源、刚察、海晏、共和、天峻等的菌株绝大多数属于基因型8型,占40．5％(60／148);位于青南高原的格尔木、玉树、扎多、治多、称多、囊谦和曲麻莱等的菌株,其基因型主要为5型,占31．8％(47／148)。青藏高原青海田鼠鼠疫疫源地鼠疫菌基因型全部为14型,占8．1％(12／148)。结论在青海省分离的鼠疫菌中,喜马托雅旱獭鼠疫疫源地鼠疫菌的基因型以5型和8型为主,青海田鼠疫源地鼠疫菌以基因型14型为主。

我国鼠疫菌抗链霉素基因的监测

目的了解全国鼠疫菌分离株是否存在抗链霉素基因。方法根据Guiyoule等人在EMBL公布的抗链霉素相关基因,设计2对引物,对271株代表性鼠疫菌进行PCR扩增。结果实验用271株代表性菌株中尚未发现有鼠疫菌抗链霉素基因。结论目前在所实验的271株菌株还未发现鼠疫菌耐链霉素菌株。

青海省海西州藏系绵羊鼠疫调查分析

目的对青海省海西州开展藏系绵羊鼠疫病原学和血清流行病学调查,了解当地藏系绵羊鼠疫流行情况。方法应用鼠疫间接血凝试验(IHA)、胶体金纸上色谱(GICA)两种方法,对该地区1 813份藏系绵羊血清进行了检测;对分离自当地藏系绵羊的1株鼠疫菌进行生化试验、毒力测定、毒力因子鉴定、质粒分析、差异片段(DFR)分型等研究。结果采用IHA和GICA方法分别对所采集的1 813份藏系绵羊血清进行检测,均检出鼠疫Fl抗体阳性血清15份,阳性率为0.83%。其中,从德令哈市检出阳性血清7份,3份滴度为1∶20,3份滴度为1∶40,1份滴度为1∶80;乌兰县检出阳性血清8份,滴度均为1∶20。同时,证实鼠疫菌株的生态型为青藏高原型,毒力因子及毒力检测结果显示该株鼠疫菌为强毒菌,基因型(DFR)为8型,质粒谱6×106、45×106、52×106。结论该地区存在藏系绵羊鼠疫流行,所分离的鼠疫菌株具备青藏高原鼠疫病原体特性。因此,应加强藏系绵羊鼠疫的监测工作,尤其是旱獭鼠疫流行地区。

青藏铁路沿线藏系绵羊鼠疫流行病学调查

鼠疫是我国法定的甲类传染病，它的发生、流行对国家的经济发展和政治稳定都会产生巨大的影响，随着青藏铁路的实施及贯通运营，鼠疫也越来越威胁着人们的健康及社会稳定。已证实藏羊对鼠疫菌属高感的动物，且能自然感染鼠疫．并可成为人类鼠疫的传染源。1956—1965年．在青海省以染疫藏羊为传染源的人间鼠疫共6起，发病44人，

基于地理信息系统的青海省鼠疫菌毒力研究

目的测定青海省鼠疫自然疫源地鼠疫菌毒力,建立青海省鼠疫自然疫源地毒力基础数据。方法选取392株鼠疫菌进行毒力试验,用SPSS18.0计算各试验菌株的半数致死量(LD50),运用地方病地理信息系统分析其空间构成。结果392株鼠疫菌中鼠疫强毒株有367株,占93.62%;鼠疫中等毒力株有10株,占2.55%;鼠疫低毒株有10株,占2.55%;鼠疫弱毒株有5株,占1.27%;发现青海省鼠疫自然疫源地祁连山型菌株毒力比青藏高原型菌株毒力强。结论青海省鼠疫自然疫源地鼠疫菌以鼠疫强毒株为主。

青海省乌兰县鼠疫病原学分析及流行病学意义

目的分析青海省乌兰县鼠疫菌株生物学特性及流行病学意义,为该地区的鼠疫防治提供科学依据。方法对1966—2011年青海省乌兰县分离的65株鼠疫菌株进行生化试验、毒力测定、毒力因子鉴定、质粒分析、鼠疫菌差异区段(Different Region,DFR)分型等研究。结果 65株被试菌株生物型为古典型、生态型均为青藏高原型。菌株基因组型为8型、5型、1b型、37型、44型,主要基因组型为8型。携带3种质粒谱,83.08%(54/65)菌株携带分子质量为6×106、45×106、52×106的质粒谱。93.85%(61/65)的鼠疫菌具备4个毒力因子,96.97%(32/33)的鼠疫菌为强毒菌。结论青海省乌兰县分离的鼠疫菌具备青藏高原鼠疫病原体特性,鼠疫菌的毒力强,因此该地区的鼠疫防治工作不容松懈。

青海省部分地区人群血清鼠疫抗体调查

青海省地处喜马拉雅旱獭鼠疫自然疫源地的中心地带，动物鼠疫连年不断．染疫的动物种类多，疫源地内的人群因接触旱獭、狐狸、狗、绵羊等动物而感染鼠疫的病例时有发生。同时还有一些进入疫源地从事捕獭等务工活动的人员．

蛋白质芯片在鼠疫患者血清抗体谱检测中的应用

目的检测鼠疫患者血清抗体谱,为鼠疫的疫苗研究奠定基础。方法利用鼠疫耶尔森氏菌毒流力相关蛋白的蛋白质芯片检测鼠疫患者血清抗体谱。结果利用一个包含145个鼠疫菌毒力相关蛋白的蛋白质芯片,在鼠疫患者血清中检测到37种鼠疫菌蛋白相应的抗体。结论通过对鼠疫患者血清抗体谱的分析,寻找到新的能在人体内产生体液免疫的蛋白。

我国各生态型鼠疫菌外膜蛋白的比较研究

目的 研究我国 17个生态型鼠疫菌的外膜蛋白谱型 ,为鼠疫菌分子生物学分型提供科学依据。方法 用终浓度为 10 g/ L 的氯霉素 2 8℃下杀死鼠疫菌后 ,采用 Trion- 2 0 0改进法进行外膜蛋白的提取。以 4 %积层胶、12 %分离胶行十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶 (SDS- PAGE)电泳。根据低分子量标准蛋白和被试菌株的泳距作相关分析 ,得出各条蛋白带的相对分子量。结果 SDS- PAGE上各生态型鼠疫菌 2 8℃培养物表达的外膜蛋白带在相对分子量大于 4 0 k D小于 30 k D的区域谱型基本一致 ,而在 30～ 4 0 k D之间稍有差异 ,岗底斯山型的部分菌株较 14 1株多一条 31.6 k D带 ,锡林郭勒型菌株缺失 32 k D条带。结论 鼠疫菌的外膜蛋白 。

鼠疫菌质粒变异菌株外膜蛋白谱的比较

目的 研究鼠疫菌外膜蛋白与其所携带的质粒之间是否存在相关性。方法 用终浓度为 10mg/ml的氯霉素2 8℃下杀死鼠疫菌后 ,采用Trion - 2 0 0改进法进行外膜蛋白的提取。以 4 %积层胶、12 %分离胶行十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶 (SDS -PAGE)电泳。根据低分子量标准蛋白和被试菌株的泳距作相关分析 ,得出各 6条蛋白带的相对分子量。结果 缺失 6MD质粒且PstI的菌株 ,在 32kD和 39k这两条外膜蛋白带处含量较少 ,其它质粒变异株未发现特殊。结论 6MD质粒缺失且PstI的鼠疫菌株外膜蛋白谱与标准 14 1株相比有明显不同。

金免疫层析法对两例鼠疫患者血清抗体的跟踪检测分析

目的评价胶体金免疫层析法(GICA)对鼠疫患者血清F1抗体检测效果。方法GICA和间接血凝(IHA)两种方法平行跟踪检测。结果GICA检测两例鼠疫患者在发病后4～450 d血清中鼠疫F1抗体结果与IHA结果一致。结论GICA与IHA跟踪检测鼠疫患者F1抗体结果相同,GICA也适用于鼠疫现场血清学诊断。