TNF受体(P55)胞外区和IgGFc嵌合蛋白高效原核表达载体的构建

目的 构建TNF受体 (P5 5 )胞外区和IgGFc嵌合蛋白的高效原核表达载体。方法 以人心肌cDNA文库为模板 ,PCR扩增TNF受体 (P5 5 )胞外区全基因 (sTNFR ED) ,亚克隆入pGEM T/IgGFc中构建 pGEM T/sTNFR ED∶Ig GFc重组子 ,然后以其为模板 ,在上游引物中引入原核细胞高频密码子 ,再次PCR扩增去信号肽TNF受体 (P5 5 )胞外区和IgGFc嵌合基因 (TNFR ED∶IgGFc) ,亚克隆入 pUC19载体 ,经序列测定正确后克隆入原核表达载体 pBV2 2 0中。结果 成功构建了TNF受体 (P5 5 )胞外区和IgGFc嵌合蛋白高效原核表达载体 ,命名为 pBV2 2 0 /TNFR ED∶IgGFc。结论 pBV2 2 0 /TNFR ED∶IgGFc表达载体的构建 ,为进一步表达TNF受体 (P5 5 )胞外区和IgGFc嵌合蛋白及其在中和TNF毒副作用。

趋化因子及其受体对造血细胞的调节

近年趋化因子的研究进展很快,已经发现了50多种趋化因子和17种趋化因子受体。现已证实,它参与了体内众多生理和病理功能。本文介绍趋化因子及其受体对造血细胞的调节和一些对造血干细胞/祖细胞增殖具有抑制作用的趋化因子,并详细讨论SDF-1/PBSF和其受体CXCR4对造血细胞的调控。

嵌合蛋白sTNFR II-IgG Fc的克隆、表达与活性分析

肿瘤坏死因子是一种重要的炎性细胞因子 ,目前已知许多免疫疾病与之相关 ,为了抑制TNF的生物学活性 ,将可溶性TNFRII(sTNFRII)和人IgGFc分子通过柔性短肽相连 ,构建成一个嵌合蛋白 ,在大肠杆菌中进行表达 ,并获得了纯化蛋白。实验证明该嵌合蛋白能够自发形成聚合体 ,识别并结合TNF蛋白 ,同单体sTNFRII相比 ,对TNF的中和活性得到了较大的提高。

重组人肿瘤坏死因子可溶性受体Ⅱ(sTNFRⅡ)的纯化

目的 从大肠杆菌破碎液中纯化可溶性肿瘤坏死因子受体Ⅱ,获得能够中和TNF活性的受体蛋白。方法 菌体破碎液经热沉淀处理后,用金属鳌合层析柱纯化重组蛋白。并对蛋白的理化特性和生物学活性进行分析。结果 纯化的重组蛋白纯度大于95％,并且能中和TNF的生物学活性,抑制其对细胞的杀伤作用。结论该工艺能简便有效地纯化出TNF受体蛋白,为进一步深入研究奠定了基础。

两类记忆性T细胞的表型、迁移途径及功能的关系

幼稚T细胞由胸腺迁出后 ,进入二级淋巴器官的T细胞区 ,一旦接触抗原后即可发生增殖反应。其中一部分T细胞分化成记忆性T细胞 ,它针对已接触过的抗原 ,为机体提供快速而强烈的免疫反应。目前认为记忆性T细胞包括CCR7- 记忆性T细胞 (TEM,效应性T细胞 )和CCR7+记忆性T细胞 (TCM,中央型T细胞 )。CCR7+记忆性T细胞表面受体有助于细胞进入炎症部位 ,并能迅速产生免疫效应 ,而CCR7+记忆性T细胞表达淋巴结归巢受体 ,并缺乏迅速产生免疫效应的功能 ,但它能有效地刺激树突状细胞 ,辅助B细胞 ,并在再次接触相同抗原时分化成CCR7-

高层建筑地下室深基坑围护的施工技术

在高层建筑地下室的施工过程中，深基坑维护是施工中的重点，直接影响工程建设的质量。基于此，本文对高层建筑地下室深基坑围护的施工技术进行了探讨。