健脾解毒汤对脾虚湿盛证银屑病大鼠皮肤组织AQP3蛋白表达的影响

目的研究健脾解毒汤对脾虚湿盛证银屑病大鼠皮肤组织水通道蛋白3(AQP3)表达的影响,探讨健脾解毒汤修复皮肤屏障功能的作用机制。方法按照随机数字表将72只雄性SD大鼠随机分为空白组、模型组、甲氨蝶呤组、健脾解毒汤低剂量组、健脾解毒汤中剂量组、健脾解毒汤高剂量组,每组12只。除空白组大鼠外,其余组大鼠采用咪喹莫特乳膏涂抹及大黄配方颗粒剂灌胃方法诱导建立脾虚湿盛证银屑病模型。造模结束后,甲氨蝶呤组给予甲氨蝶呤片0.97 mg/kg灌胃,健脾解毒汤低、中、高剂量组给予健脾解毒汤2.32 g/kg、4.64 g/kg、9.26 g/kg灌胃,均1次/d,连续14 d。观察各组大鼠表征特点,HE染色观察皮肤组织病理形态,Western blot法检测皮肤组织中AQP3蛋白表达情况。结果灌胃结束后,模型组大鼠进食量减少,排便次数增加,粪便稀;健脾解毒汤各组大鼠进食量明显改善,排便次数明显减少,粪便质地适中。HE染色显示模型组大鼠表皮增生肥厚,显著角化不全伴角化过度,表皮突延长,部分表皮细胞间水肿,表皮内及角质层内较多中性粒细胞浸润,真皮浅层内血管扩张,慢性炎细胞散在或灶状浸润;健脾解毒汤各组大鼠皮肤组织结构较模型组明显改善。模型组大鼠皮肤组织中AQP3蛋白表达量明显低于空白组(P<0.05),甲氨蝶呤组和健脾解毒汤各组大鼠AQP3表达量均明显高于模型组(P均<0.05),甲氨蝶呤组和健脾解毒汤各组间比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。结论健脾解毒汤可能通过促进脾主运化水液功能的恢复来调节脾虚湿盛证银屑病大鼠皮肤AQP3蛋白的表达,恢复皮肤屏障功能。

健脾解毒汤对脾虚湿盛证银屑病样大鼠皮肤屏障功能调控机制研究

目的 探讨细胞外信号调节激酶/p38丝裂原活化蛋白激酶(ERK/p38MAPK)信号通路在健脾解毒汤调控脾虚湿盛证银屑病大鼠皮肤组织水通道蛋白(AQP3)表达中的作用。方法按照随机数字表法,将144只SPF级雄性SD大鼠分为空白组、模型组、甲氨蝶呤组、健脾解毒汤低剂量组、健脾解毒汤中剂量组、健脾解毒汤高剂量组、健脾解毒汤低剂量+ERK抑制剂组、健脾解毒汤中剂量+ERK抑制剂组、健脾解毒汤高剂量+ERK抑制剂组、健脾解毒汤低剂量+MAPK抑制剂组、健脾解毒汤中剂量+MAPK抑制剂组、健脾解毒汤高剂量+MAPK抑制剂组,每组12只。除空白组外,其余组大鼠采用咪喹莫特外涂和大黄配方颗粒剂灌胃方法构建脾虚湿盛证银屑病样皮损复合模型。造模成功后,甲氨蝶呤组给予甲氨碟呤片0.97 mg/kg灌胃,健脾解毒汤低、中、高剂量组分别给予2.32 g/kg、4.64 g/kg、9.26 g/kg健脾解毒汤灌胃,健脾解毒汤低、中、高剂量+ERK抑制剂各组均给予ERK抑制剂U0126腹腔注射和相应剂量的健脾解毒汤灌胃,健脾解毒汤低、中、高剂量+MAPK抑制剂各组均给予MAPK抑制剂SB203580腹腔注射和相应剂量的健脾解毒汤灌胃,空白组和模型组给予等量的生理盐水灌胃和腹腔注射,均1次/d,连续14 d。灌胃结束后,观察大鼠皮肤组织病理学形态,Western blot法检测皮肤组织中AQP3、ERK1/2、p-ERK1/2、p38 MAPK、p-p38 MAPK蛋白表达情况。结果 模型组皮损部位表皮增生肥厚,表皮内及角质层内较多中性粒细胞浸润,真皮浅层内血管扩张,慢性炎细胞散在或灶状浸润;各药物组皮肤组织病变程度均较模型组轻,健脾解毒汤高剂量组、健脾解毒汤高剂量+ERK抑制剂组、健脾解毒汤高剂量+MAPK抑制剂组病变程度更轻。与空白组比较,模型组大鼠皮肤组织中AQP3蛋白相对表达量明显降低(P<0.05),p-ERK1/2、p-p38 MAPK蛋白相对表达量均明显升高(P均<0.05);与模型组比较,甲氨蝶呤组、健脾解毒汤各剂量组、健脾解毒汤高剂量+ERK抑制剂组、健脾解毒汤高剂量+MAPK抑制剂组AQP3蛋白相对表达量均明显升高(P均<0.05),p-ERK1/2、p-p38 MAPK蛋白相对表达量均明显降低(P均<0.05);且健脾解毒汤高剂量+ERK抑制剂组、健脾解毒汤高剂量+MAPK抑制剂组AQP3蛋白相对表达量较其他药物组升高更明显(P均<0.05),p-p38 MAPK蛋白相对表达量较其他药物组降低更明显(P均<0.05),p-ERK1/2蛋白相对表达量较甲氨蝶呤组和健脾解毒汤低、中剂量组降低更明显(P均<0.05)。结论 健脾解毒汤可能是通过抑制ERK/p38 MAPK信号通路的激活,上调AQP3蛋白表达,从而使体内水液分布均衡,恢复皮肤屏障功能而发挥治疗银屑病的作用。

银屑病的中医证候概述

在中医理论中,银屑病称为白疕,这是慢性炎症性疾病的一种。此种疾病的中医证候和它的皮疹特征、地域分布、体质及起病规律等关系的研究也都获得了一定的进展。对银屑病的中医证候加以丰富,以此为未来银屑病中医证候相关研究提供必要的科学依据,同时借助流行病学同循证医学的结合,以统计学方法对大范围、大数据样本加以分析,并且也和实验室相关检验指标相结合,对疾病的病因、病机、治疗及预防等方面综合分析,以提高临床疗效并指导临床疾病的预防。