蜂胶黄酮PB3A对人大肠癌SW480细胞株CXCL1和FOS基因表达的影响

目的探讨蜂胶黄酮短叶松素-3-乙酸酯(pinobanksin-3-acetate,PB3A)处理SW480细胞后CXCL1和FOS基因表达的改变及其与PB3A抑制人大肠癌细胞增殖的关系。方法采用实时荧光定量RT-PCR和Western blot法检测PB3A(100 mg/L)处理24小时后SW480细胞的CXCL1和FOS基因转录和蛋白质表达水平。结果药物干预诱导CXCL1基因的mRNA转录水平下调,差异倍数为0.03(ΔCT比较,P<0.01),蛋白质表达强度也降低(0.24±0.03)与非干预的对照组(0.52±0.04)比较表达水平差异有统计学意义(P<0.01);药物干预诱导FOS基因的mRNA转录水平上调,差异倍数为13.64(ΔCT比较,P<0.01),蛋白质表达水平也升高(1.43±0.16),与非干预的对照组(0.58±0.07)比较表达水平差异有统计学意义(P<0.01)。结论蜂胶黄酮PB3A抗人大肠癌细胞的作用可能与其下调CXCL1基因和上调FOS基因的表达有关。

蜂胶黄酮PB3A对大肠癌细胞SW480中RGS2和GEM基因表达水平的影响

目的研究蜂胶黄酮(pinobanksin-3-acetate,PB3A)对体外培养的大肠癌SW480细胞中G蛋白信号转导调节因子2(regulator of G-protein signaling 2,RGS2)和GTP结合丝裂原诱导蛋白(GTP binding protein overexpressed in skeletal muscle,GEM)基因转录和蛋白质表达水平的影响,探讨PB3A的抗肿瘤作用机制及其相关信号通路。方法通过实时荧光定量RT-PCR和蛋白印迹法检测100 mg/L PB3A作用下人大肠癌细胞SW480中RGS2和GEM基因的转录和表达情况。结果 100 mg/L PB3A药物的干预诱导SW480细胞出现悬浮的细胞碎片、细胞体缩小、变圆、皱缩。药物干预之后,SW480细胞中RGS2和GEM基因在mRNA和蛋白水平上调表达。实验组与对照组比较,RGS2和GEM基因的mRNA转录水平差异有统计学意义(P<0.01),蛋白质表达水平差异有统计学意义(P<0.05)。根据RT-PCR检测结果,利用Spearman相关性分析检测出RGS2和GEM高度正相关(r=0.929,P<0.01)。结论 PB3A干预大肠癌SW480细胞后使RGS2和GEM基因在转录和翻译水平上上调表达。PB3A的抗大肠癌作用机制可能与RGS2和GEM基因的上调表达有关。

新疆不同地区产蜂胶抗氧化活性研究

测定新疆不同地区产蜂胶总黄酮含量,并通过DPPH-体系、羟基自由基体系、超氧阴离子自由基体系对蜂胶醇提物抗氧化活性进行研究,与槲皮素进行比较。结果表明:新疆伊犁那拉提、尼勒克县产蜂胶总黄酮含量分别为9.015±0.203%、7.710±0.259%无显著差异(P>0.05)。那拉提、尼勒克县产蜂胶醇提物浓度100μg/mL时对超氧阴离子清除活性与槲皮素比较没有显著差异(P>0.05),那拉提、尼勒克县产蜂胶醇提物IC50为46.48、47.19μg/mL,槲皮素IC50为21.26μg/mL;当那拉提、尼勒克县产蜂胶醇提物浓度为100、80μg/mL时对羟基自由基的清除活性与槲皮素比较没有显著差异(P>0.05),那拉提、尼勒克县产蜂胶醇提物IC50为37.54、36.24μg/mL,槲皮素IC50为28.18μg/mL;浓度为40μg/mL时那拉提蜂胶醇提物对DPPH自由基清除活性与槲皮素进行比较,没有显著差异(P>0.05),那拉提、尼勒克县产蜂胶醇提物IC50为18.37、20.12μg/mL,槲皮素IC50为9.95μg/mL,表明蜂胶是一种天然有效的自由基清除剂。

蜂胶黄酮对人结肠癌细胞PDE4D及Gadd45G基因表达的影响

目的探讨蜂胶黄酮(PB3A)对人结肠癌SW480细胞生长的抑制作用及机制。方法将培养的人结肠癌SW480细胞分为PB3A组及对照组。PB3A组予100μg/mL PB3A干预,对照组不干预。干预后两组均培养24 h,倒置显微镜观察细胞形态学变化;采用实时荧光定量PCR法和蛋白免疫印迹法检测细胞磷酸二酯酶4D(PDE4D)、生长阻滞和DNA损伤诱导基因G(Gadd45G)mRNA和蛋白表达。结果干预后倒置显微镜下可见PB3A组细胞缩小、皱缩、折光性减弱,细胞内出现颗粒状物质;对照组无明显变化。PB3A组PDE4D mRNA及蛋白表达水平均低于对照组,Gadd45G mRNA及蛋白水平表达均高于对照组(P均<0.01)。结论 PB3A能抑制SW480细胞生长,诱导其凋亡;其作用机制可能为下调PDE4D mRNA和蛋白表达,上调Gadd45G mRNA和蛋白表达。

胸苷酸合成酶和二氢嘧啶脱氢酶的表达与乳腺癌临床病理特征及预后的相关性

目的:探讨胸苷酸合成酶(thymidylate synthase,TS)和二氢嘧啶脱氢酶(dihydropyrimidine dehydrogenase,DPD)在南疆地区乳腺癌患者肿瘤组织中的表达及其临床意义。方法:免疫组织化学染色法检测60例乳腺癌患者癌组织及其配对的癌旁组织中TS和DPD的蛋白表达;分析TS和DPD表达与临床病理特征的关系;Kaplan-Meier法分析TS和DPD蛋白表达与患者生存时间的关系。结果:乳腺癌组织中TS和DPD阳性表达率分别为56.67%(34/60)、46.67%(28/60),均显著高于癌旁组织[36.67%(33/60)、26.67%(16/60),均P<0.05];癌组织TS的表达与临床分期、组织分化程度和淋巴结转移显著相关(P<0.01或P<0.05),而DPD表达仅与淋巴结转移显著相关(P<0.05)。TS阳性表达患者生存时间显著低于阴性患者(P<0.05),而DPD表达与生存期无明显相关(P>0.05)。结论:乳腺癌组织中TS和DPD异常高表达,TS表达与部分临床病理特征以及患者生存时间相关。

5种化疗药物对维吾尔族直肠癌患者的敏感性及疗效评价

目的:评估氟尿嘧啶、吉西他滨、顺铂、奥沙利铂和伊立替康直肠癌化疗药物对维吾尔族直肠癌患者癌细胞的敏感性及疗效。方法:选取维吾尔族直肠癌患者组织标本,MTT法行药敏试验,倒置荧光显微镜观察化疗药物对直肠癌细胞形态的影响。60例直肠癌患者随机分为5-Fu组(5-氟尿嘧啶+亚叶酸钙)、FOLFOX组(5-氟尿嘧啶+亚叶酸钙+奥沙利铂)、FOLFIRI组(5-氟尿嘧啶+亚叶酸钙+伊立替康),每组各20例;疗程结束后,采用MRI检查盆腔,得到扩散加权成像图像上肿瘤的表观扩散系数(ADC)值,用全自动电化学免疫测定系统检测血清中癌胚抗原和CA19-9水平。结果:5-氟尿嘧啶、奥沙利铂和伊立替康对维吾尔族直肠癌细胞抑制率显著高于吉西他滨和顺铂(P <0. 05);直肠癌细胞可见凋亡细胞核及胞质中有致密浓染颗粒状荧光,核染色质凝聚且边缘化,或玻珠化,5-氟尿嘧啶、奥沙利铂和伊立替康组凋亡细胞核及胞质中荧光颗粒较顺铂组和吉西他滨组明显增多。治疗后各组ADC值均高于治疗前(P <0. 05)。治疗前3组ADC值差异无统计学意义,而治疗后FOLFIRI组和FOLFOX组ADC值明显高于5-Fu组(P <0. 05); FOLFIRI组癌胚抗原和CA19-9表达水平与FOLFOX组差异无统计学意义(P> 0. 05),但两组二者表达明显低于5-Fu组(P <0. 05)。结论:5-氟尿嘧啶、奥沙利铂和伊立替康对维吾尔族直肠癌患者癌细胞具有较高的敏感性,含奥沙利铂的FOLFOX方案和含伊立替康的FOLFIRI方案可有效改善患者预后。

蜂胶黄酮Pinobanksin-3-acetate对结肠癌HCT-116细胞增殖及凋亡的影响

为探讨蜂胶黄酮(Pinobanksin-3-acetate,PB3A)对结肠癌HCT-116细胞增殖及细胞凋亡的影响,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法,检测不同浓度、不同时间PB3A、5-氟尿嘧啶(5-FU)及两种药物联合作用对HCT-116细胞生长所产生的影响,倒置显微镜观察细胞的形态学变化特点,Annexin V-FITC/PI双染色、流式细胞仪检测药物作用24 h后的细胞凋亡率。结果显示,PB3A对HCT-116细胞增殖有明显的抑制作用,并呈浓度和时间依赖性。其抑制活性与5-FU几乎没有显著性差异,联合用药具有协同效应;在一定剂量范围内,可见凋亡细胞明显增多。流式细胞仪分析结果表明,细胞凋亡率明显上升,呈剂量依赖性。PB3A对HCT-116细胞具有明显的增殖抑制和诱导细胞凋亡作用。