阿里红多糖组分对RAW264.7巨噬细胞免疫功能的影响

目的研究阿里红多糖(Fomes Officinals polysaccharide,FOPS)及其组分FOPS-a、FOPS-b对RAW264.7巨噬细胞的免疫调节作用。方法以小鼠RAW264.7巨噬细胞为研究对象,不同浓度(50~1600μg/m L)FOPS、FOPS-a、FOPS-b干预后,用cck-8试剂盒测定细胞活力,中性红法测定其吞噬活性,NO试剂盒测定NO的含量,ELISA试剂盒测定TNF-α和IL-1β释放能力。结果 FOPS、FOPS-a、FOPS-b在一定的浓度范围内可以提高RAW264.7巨噬细胞的增殖活性、吞噬活性、一氧化氮以及TNF-α、IL-1β的释放量。结论 FOPS、FOPS-a、FOPS-b一定浓度范围内具有良好的增强RAW264.7巨噬细胞免疫功能的作用。

阿里红中多糖的分离纯化及其组分分析

目的对阿里红中的多糖进行分离纯化,并对得到的两种多糖组分进行基础结构分析。方法阿里红经水提醇沉法除蛋白后,再经DEAE纤维素-52、Sepharose CL-6B和葡聚糖凝胶Sephadex G-100柱层析分离纯化得到两种多糖组分FOPS-a和FOPS-b。采用凝胶过滤法分析其纯度和相对分子量,经气相色谱法分析其单糖组成,并对多糖组分进行部分酸水解,高碘酸氧化和Smith降解分析。结果分离纯化得到的阿里红多糖组分FOPS-a、FOPS-b的相对分子质量为199 kDa和87 kDa。单糖组成均为甘露糖、阿拉伯糖、半乳糖。FOPS-a主链单糖残基为甘露糖,末端残基和分支单糖残基为阿拉伯糖、半乳糖、甘露糖和鼠李糖;FOPS-b主链单糖残基为甘露糖,末端残基和分支单糖残基为阿拉伯糖、半乳糖、甘露糖和葡萄糖。结论该研究可为阿里红多糖的开发与利用提供技术参考。

阿里红多糖组分对小鼠脾淋巴细胞免疫功能的影响

目的研究阿里红多糖组分FOPS-a、FOPS-b对小鼠脾脏淋巴细胞免疫调节功能的影响。方法实验方法选用CCK-8(Cell Counting Kit-8)试剂检测不同质量浓度阿里红多糖组分对小鼠脾脏淋巴细胞增殖率的影响;Griess法测定阿里红多糖组分对NO的释放量的影响;ELISA试剂盒测定阿里红多糖组分对IL-2、IL-4、INF-γ和IGg释放能力的影响。结果一定质量浓度的阿里红多糖组分能促进淋巴细胞的增殖活性,刺激淋巴细胞释放NO,并促进淋巴细胞分泌IL-2、IL-4、INF-γ和IGg。结论阿里红多糖组分在体外具有一定的免疫活性,能增强小鼠脾脏淋巴细胞免疫功能。

过表达miR-18a-5p对结肠癌细胞增殖和凋亡的影响及其作用机制

目的探讨过表达miR-18a-5p对结肠癌SW480细胞增殖和凋亡的影响及其可能的作用机制。方法将结肠癌SW480细胞随机分为miR-18a-5p-e GFP组、NC-e GFP组、空白对照组,miR-18a-5p-e GFP组、NC-e GFP组分别转染含miR-18a-5p-e GFP、NC-e GFP的质粒DNA,空白对照组不予转染。转染48 h,采用MTT法检测各组细胞增殖抑制率,采用流式细胞术检测各组早期凋亡率和晚期凋亡率,采用qRT-PCR法检测各组miR-18a-5p靶基因DUSP5、FZD3、CCND2表达。结果 miR-18a-5p-e GFP组、NC-e GFP组细胞增殖抑制率分别为(66.02±0.51)%、(23.81±0.64)%,两组比较P<0.05。miR-18a-5p-e GFP组、NC-e GFP组早期凋亡率和晚期凋亡率均高于空白对照组,且miR-18a-5p-e GFP组高于NC-e GFP组(P均<0.05)。miR-18a-5p-e GFP组miR-18a-5p靶基因DUSP5、FZD3表达明显高于NC-e GFP组,CCND2表达明显低于NC-e GFP组(P均<0.05)。结论过表达miR-18a-5p能够抑制结肠癌SW480细胞增殖并促进其凋亡,其机制可能与调控靶基因DUSP5、FZD3、CCND2表达有关。