超声引导行DSN阻滞对单侧肩胛间区疼痛患者疗效的有效性及安全性研究

目的探讨超声引导下肩胛背神经(dorsal scapular nerve,DSN)阻滞治疗单侧肩胛间区疼痛的疗效以及安全性。方法选择我院收治的单侧肩胛间区疼痛患者156例,随机数字表法将患者分为两组,各78例。对照组采用颈肩部手法推拿治疗,观察组在对照组基础上联合超声引导下DSN阻滞治疗。比较2组患者疼痛程度、肩关节活动度、上肢功能、生活质量差异。结果2组治疗4周、12周视觉模拟(visual analog scale,VAS)评分均较治疗前降低(P<0.05),肩关节前屈被动关节活动度(passive range of motion,PROM)、后伸PROM、内旋PROM、外旋PROM、Fugl-Meyer运动功能量表上肢部分(Fugl-Meyer motor Function Scale upper limb,FMA-UE)评分、改良Barthel指数(modified Barthel index,MBI)评分均较治疗前增加(P<0.05)。观察组治疗4周、12周VAS评分低于对照组(P<0.05),肩关节前屈PROM、后伸PROM、内旋PROM、外旋PROM、FMA-UE评分、MBI评分高于对照组(P<0.05)。2组并发症发生率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论超声引导下DSN阻滞可有效降低单侧肩胛间区疼痛患者疼痛程度,改善颈肩活动功能,提高生活质量。

肝肺综合征大鼠肺组织膜联蛋白A2表达的变化

目的评价肝肺综合征（HPS）大鼠肺组织膜联蛋白A2（ANXA2）表达的变化。方法健康sD大鼠40只，雌雄不拘，3～4月龄，体重220～250g。采用随机数字表法，将其分为3组：对照组（c组，n=10）、假手术组（s组，n=10）和肝肺综合征组（HPS组，n=20）。HPS组采用胆总管结扎法建立肝肺综合征模型；c组不做任何处理；S组仅开腹暴露胆总管，但不结扎。术后5周时，处死大鼠，取肺组织，采用RT—PCR法检测ANXA2和平滑肌肌动蛋白α（SM-α-actin）的mRNA表达，采用Westernblot法检测ANXA2和SM—α—actin的蛋白表达。结果与C组比较，S组肺组织ANXA2和SM—α—actin的mRNA及其蛋白表达差异无统计学意义（P〉0．05）；与s组比较，HPS组肺组织ANXA2和SM—α-ctin的mRNA及其蛋白表达上调（P〈0．05）。结论大鼠肝肺综合征时肺组织ANXA2表达上调。

胆红素对大鼠肺微血管内皮细胞增殖的影响

目的 评价胆红素对大鼠肺微血管内皮细胞（PMVECs）增殖的影响.方法 健康雄性SD大鼠10只,体重120 ～ 150 g,2～3月龄,原代培养、纯化及鉴定PMVECs.PMVECs接种于低糖DMEM培养基或96孔培养板,采用随机数字表法将其分为5组：对照组（C组）和不同浓度胆红素组（B1-4组）,每组30孔或48瓶.C组加入低糖DMEM培养基1ml,B11-4组分别加入5、10、20和50 μmol/L胆红素1ml.于孵育24、48和72 h时采用CCK-8法和3 H-TdR掺入法检测PMVECs增殖水平,采用RT-PCR法测定Akt1 mRNA和Smad3 mRNA的表达水平,采用Westen blot法测定磷酸化Akt1 （p-Akt1）蛋白和Smad3蛋白的表达水平.结果 与C组比较,B1组和B2组孵育各时点PMVECs增殖水平、Akt1mRNA和p-Akt1蛋白表达、Smad3 mRNA及其蛋白表达差异无统计学意义（P＞0.05）,B3组孵育48 h时PMVECs增殖减弱,Akt1 mRNA和p-Akt1蛋白表达、Smad3 mRNA及其蛋白表达下调,B4组孵育48和72 h时PMVECs增殖减弱,Akt1 mRNA和p-Akt1蛋白表达、Smad3 mRNA及其蛋白表达下调（P＜0.05）;与B3组比较,B4组孵育72 h时PMVECs增殖减弱,Akt1 mRNA和p-Akt1蛋白表达、Smad3 mRNA及其蛋白表达下调（P＜0.05）.结论 高浓度胆红素可抑制PMVECs的增殖,其机制与下调Akt1和Smad3蛋白的表达有关.

梗阻性黄疸患者血清对人PASMCs增殖、迁移及表型转换的影响

目的 探讨梗阻性黄疸患者血清对人肺动脉平滑肌细胞（PASMCs）迁移、增殖及表型转换的影响.方法 分离人PASMCs,并传代培养,将培养的人PASMCs分别用梗阻性黄疸患者血清和健康志愿者血清孵育,于孵育24、48和72 h时采用CCK-8法和细胞划痕实验分别检测细胞增殖能力和迁移能力,采用Western blot法检测平滑肌-α-肌动蛋白（SM-α-actin）和钙调蛋白表达水平.结果 与健康志愿者血清孵育的人PASMCs比较,经梗阻性黄疸患者血清孵育的PASMCs增殖能力和迁移能力增强,孵育24h时钙调蛋白表达上调,孵育48、72 h时SM-α-actin和钙调蛋白表达下调（P＜0.05）;与孵育24 h时比较,经梗阻性黄疸患者血清孵育48 h时人PASMCs增殖能力和迁移能力增强,SM-α-actin表达上调,钙调蛋白表达下调（P＜0.05）;与孵育48 h时比较,经梗阻性黄疸患者血清孵育72 h时人PASMCs迁移能力增强（P＜0.05）,增殖能力、SM-α-actin和钙调蛋白表达差异无统计学意义（P＞0.05）.结论 梗阻性黄疸患者血清可增强人PASMCs增殖和迁移能力,并促进其向合成表型的转换.

大鼠肺毛细血管周细胞的培养

目的 建立可靠、简便的肺毛细血管周细胞的培养方法.方法 选择健康雄性SD大鼠6只,6～7周龄,体重200 ～ 220 g,采用Ⅰ型胶原酶消化法和微孔过滤法分离肺毛细血管片段,用含10％胎牛血清和0.5％青霉素链霉素混合液的高糖DMEM/F12 1∶1培养基选择性培养肺毛细血管周细胞.倒置相差显微镜下观察细胞形态和生长状态,采用免疫荧光法计数α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、结蛋白、神经元-胶质抗原2（NG2）、分化抗原31（CD31）的阳性细胞,计算阳性细胞百分比.结果 镜下细胞呈梭型或星芒状,单核,偶见双核,核卵圆形,细胞浆丰富,漩涡或栅栏状生长,无接触性抑制.免疫荧光测定α-SMA阳性细胞百分比为（99.0±1.2）％,结蛋白阳性细胞百分比为（96.0±2.1）％,NG2阳性细胞百分比为（99.0±0.7）％,CD31阳性细胞百分比为0.结论 成功建立了一种可靠、简便的大鼠肺毛细血管周细胞的培养方法.

梗阻性黄疸患者血清对人肺微血管内皮细胞肌样分化的影响

目的评价梗阻性黄疸患者血清对人肺微血管内皮细胞（PMVECs）肌样分化的影响。 方法分离人PMVECs，并传代培养，将培养的人PMVECs分别采用梗阻性黄疸患者血清和健康志愿者血清孵育，于孵育24、48和72 h（T1～3）时在倒置显微镜下观察原代PMVECs形态，采用Western blot法检测PMVECs肌性蛋白（α-SMA、SM-MHC、capolnin）的表达。 结果健康志愿者血清孵育PMVECs calponin、α-SMA蛋白表达阴性，出现少量SM-MHC表达，梗阻性黄疸患者血清孵育PMVECs calponin、α-SMA和SM-MHC表达阳性。与健康志愿者血清比较，梗阻性患者黄疸血清孵育PMVECs SM-MHC表达上调（P〈0.05）；与T1时比较，T2，3时梗阻性黄疸血清孵育PMVECs calponin、α-SMA和SM-MHC表达上调（P〈0.05）；与T2时比较，T3时梗阻性黄疸患者血清孵育PMVECs calponin、α-SMA和SM-MHC表达上调（P〈0.05）。 结论梗阻性黄疸患者血清促进PMVECs肌样分化，可能是肺微血管扩张机制之一。

肺组织Akt1和Smad3在大鼠肝肺综合征形成中的作用

目的 探讨肺组织丝氨酸苏氨酸蛋白激酶-1（Akt1）、Smad3在大鼠肝肺综合征形成中的作用.方法 健康雄性SD大鼠72只,3～4月龄,体重200～ 250 g,采用随机数字表法,将其分为3组（n=24）：正常对照组（C组）、假手术组（S组）、胆总管结扎组（CBDL组）.S组打开腹腔暴露胆总管后关腹,CBDL组结扎并剪断胆总管后关腹.于术后第1、3和5周（T13）时,随机取8只大鼠,抽取腹主动脉血样后处死取肺脏.腹主动脉血样行血气分析,用RT-PCR法和Western blot法检测肺组织Akt1、Smad3的mRNA及蛋白表达水平；肺组织切片HE染色后观察肺组织微血管的病理学结果.结果 与C组和S组比较,CBDL组T2.3时肺组织Akt1、Smad3的mRNA及其蛋白表达上调,T3时肺泡-动脉血氧分压差增大（P＜0.05）.CBDL组T3时肺组织微血管明显扩张.结论 大鼠肺组织Akt1、Smad3表达上调参与了肝肺综合征的形成.