柯萨奇病毒B1型病毒培养及滴度检测方法建立

筛选出COXB1的最适培养基及病毒保护剂,并用微量细胞病变法建立COXB1滴度检测方法。方法 通过对比HepG2、Vero 和293T三种细胞接种COXB1后细胞的病变程度(CPE)及速度确定了COXB1的适宜培养基质,并通过比较六种保护液对COXB1反复冻融7次的稳定性影响,确定最适病毒保护液,最后通过微量细胞病变法建立了COXB1滴度检测方法。结果 三种细胞中Vero 细胞为COXB1最适培养基质,六种病毒保护液,其中配方以20mM Tris-HCl+1%牛血清白蛋白+0.5mM氨基比林+2%硫酸庆大霉素 pH7.4为最佳保护液。通过微量细胞病变法标定病毒滴度为TCID50/mL为1.62×108,接毒后76h细胞CPE为100%,同时用ELISA检测病毒效价结果显示76h时不同稀释比例组抗原效价均达到峰值,即76h为病毒的最佳收获时间。结论 建立了稳定可靠的COXB1培养及滴度检测方法。

JAK2/STAT3信号通路在柴胡皂苷D调控非小细胞肺癌H460细胞增殖、凋亡过程中的作用研究

目的观察柴胡皂苷D对非小细胞肺癌(NSCLC)H460细胞增殖、凋亡的影响,并探讨可能机制。方法取对数期H460细胞,随机分为对照组,实验A、B、C组,对照组常规培养,实验A组加入柴胡皂苷D(20μmol/L),实验B组加入colivelin[Janus蛋白酪氨酸激酶2(JAK2)/信号转导及转录激活子3(STAT3)通路激活剂](0.5μmol/L),实验C组加入柴胡皂苷D(20μmol/L)与colivelin(0.5μmol/L)。MTT法检测细胞增殖能力;双染法检测细胞凋亡率;实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测细胞白介素-2(IL-2)、白介素-10(IL-10)mRNA表达量;Western blotting法检测细胞p-JAK2、JAK2、p-STAT3、STAT3蛋白表达量。结果与对照组比较,实验A组24、48、72 h MTT实验吸光度值、细胞IL-10 mRNA表达量、p-JAK2/JAK2、p-STAT3/STAT3降低,细胞凋亡率、IL-2 mRNA表达量升高(P<0.05),实验B组24、48、72 h MTT实验吸光度值、细胞IL-10 mRNA表达量、p-JAK2/JAK2、p-STAT3/STAT3升高,细胞凋亡率、IL-2 mRNA表达量降低(P<0.05);与实验A组比较,实验C组24、48、72 h MTT实验吸光度值、细胞IL-10 mRNA表达量、p-JAK2/JAK2、p-STAT3/STAT3升高,细胞凋亡率、IL-2 mRNA表达量降低(P<0.05);与实验B组比较,联合组24、48、72 h MTT实验吸光度值、细胞IL-10 mRNA表达量、p-JAK2/JAK2、p-STAT3/STAT3降低,细胞凋亡率、IL-2 mRNA表达量升高(P<0.05)。结论柴胡皂苷D可抑制NSCLC细胞增殖,促进其凋亡,其作用机制可能与抑制JAK2/STAT3信号通路有关。

综合护理服务在建立人工气道的重症患者中应用观察

目的研究综合护理服务在建立人工气道的气管插管重症患者中的应用效果。方法选取我院收治的50例建立人工气道的重症患者进行研究。随机分为对照组25例，采取常规护理；实验组25例，采取综合护理服务，比较两组患者护理效果。结果实验组患者治疗总时间、人工气道留置时间均明显低于对照组，且并发症发生率（8.0%）低于对照组（32.0%），差异有统计学意义（P＜0.05）。结论在建立人工气道的气管插管重症患者中采用综合护理服务，效果显著，可提高患者生活质量。

长期使用羧甲司坦对支气管扩张患者急性发作频率和持续时间的影响

目的:评估长期使用羧甲司坦对支气管扩张患者急性发作频率和持续时间的影响。方法:回顾性分析2018年8月1日至2020年8月30日入院的200例支气管扩张患者:一组100例接受羧甲司坦治疗超过3个月的支气管扩张患者(观察组EG)和另一组100例在同一时期未接受羧甲司坦治疗的支气管扩张患者(对照组CG)之间的恶化频率和持续时间。比较两组患者培养出流感嗜血杆菌、卡他性白菌、肺炎链球菌、铜绿假单胞菌及其他细菌的人数,比较两组患者支气管扩张3个月内平均发作次数、平均恶化持续时间、上腹痛、恶心呕吐、腹泻、头痛等发病情况。结果:观察组培养出流感嗜血杆菌10例、卡他性白菌11例、肺炎链球菌9例显著低于对照组培养出流感嗜血杆菌20例、卡他性白菌22例、肺炎链球菌19例,差异具有统计学意义(P<0.05)。观察组培养出铜绿假单胞菌17例、其他细菌13例与对照组培养出气绿假单胞菌25例、其他细菌10例对比无统计学差异(P>0.05)。观察组未分离出细菌40例显著高于对照组未分离出细菌4例,差异具有统计学意义(P<0.05)。观察组3个月内平均发作(7.41±0.87)次、平均恶化持续(4.45±0.86)天显著低于对照组3个月内平均发作(17.44±1.35)次、平均恶化持续(18.01±0.56)天,差异具有统计学意义(P<0.05)。观察组不良反应发生率上腹痛4%、恶心呕吐6%、腹泻4%、头痛5%显著低于对照组不良反应发生率上腹痛15%、恶心呕吐18%、腹泻19%、头痛17%,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:羧甲司坦对支气管扩张患者的急性发作频率和持续时间具有积极作用,并且具有良好的耐受性。

MUC5B启动子rs35705950、rs868903基因多态性与特发性肺纤维化的相关性研究

目的探讨MUC5B启动子rs35705950、rs868903基因多态性与特发性肺纤维化(IPF)患病风险及预后的关系。方法选取2014年1月至2018年12月于我院确诊的IPF患者114例作为病例组,另随机选择同期健康体检者100例作为对照组。采用PCR法检测所有研究对象MUC5B启动子rs35705950、rs868903基因多态性,评估其与IPF患病风险及预后的相关性。结果病例组MUC5B rs35705950表达为GT+TT基因型和T等位基因的频率,显著高于对照组,携带T等位基因者较G等位基因者患IPF的OR为2.603,95%CI为(1.268-5.343)。病例组MUC5B rs868903表达为CT+CC基因型和C等位基因的频率,显著高于对照组,携带C等位基因者较T等位基因者患IPF的OR为1.477,95%CI为(1.008-2.165)。随访的106例患者中死亡32例(30.19%),平均总生存期(OS)为26.08个月。MUC5B rs3570595的GT和TT基因型患者的OS显著低于GG患者;而MUC5B rs868903的CT和CC基因型患者与TT患者的OS之间差异无统计学意义。结论MUC5B rs3570595和rs868903基因多态性可能是我国IPF患者的易感因素,其中MUC5B rs35705950基因多态性与IPF患者的死亡率减低有一定关系,而MUC5B rs868903基因多态性与IPF预后的关系尚需进一步研究。

白细胞介素7对非小细胞肺癌患者CD8＋ T细胞抗肿瘤活性的影响

目的观察并分析白细胞介素7（IL－7）对非小细胞肺癌（NSCLC）患者CD8＋ T细胞抗肿瘤活性的影响。方法入组2017年1—7月在郑州市中心医院就诊的27例NSCLC患者（肺癌组）和10例健康对照者（对照组）。分离肺癌组血浆、外周血单个核细胞（PBMCs）和肿瘤部位和非肿瘤部位的支气管肺泡灌洗液（BALF）及对照组血清和PBMCs，检测IL－7水平和IL－7受体CD127 mRNA相对表达量。使用重组IL－7刺激纯化的CD8＋ T细胞和原代NSCLC，观察细胞增殖、分泌细胞因子和IL－7信号通路相关蛋白的表达变化。建立CD8＋ T细胞和原代NSCLC细胞的直接/间接接触共培养系统，观察IL－7刺激对CD8＋ T细胞的细胞杀伤和非细胞杀伤功能的变化。结果肺癌组外周血中IL－7水平显著低于对照组[1 731（1 364，2 536）比2 686（1 692，4 786）ng/L，P＝0.023]，肺癌组肿瘤部位分离的BALF中IL－7水平亦显著低于非肿瘤部位[（1 045（562，1 550）比1 599（1 166，2 107）ng/L，P＝0.006 9]。两组间CD127 mRNA相对表达量差异无统计学意义。IL－7刺激原代NSCLC细胞后对细胞增殖及分泌细胞因子无影响，但IL－7刺激可显著增加CD8＋ T细胞的增殖及干扰素γ和肿瘤坏死因子α的分泌，CD8＋ T细胞中信号传导及转录激活因子5的磷酸化和细胞因子信号抑制物3的表达亦明显升高。IL－7刺激还显著提升CD8＋ T细胞对原代NSCLC细胞的杀伤功能和非细胞杀伤功能。结论IL－7可增强NSCLC患者CD8＋ T细胞的抗肿瘤功能。