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枯草芽孢杆菌普鲁兰酶基因的分泌表达及其在粉丝制作中的应用
被引量:
1
1
作者
祝冬君
张锦雯
+7 位作者
姚雁
单逸蓝
杨梦莲
沈微
杨海泉
夏媛媛
陈磊
陈献忠
《食品与生物技术学报》
CAS
CSCD
北大核心
2022年第2期82-93,共12页
作者旨在研究枯草芽孢杆菌普鲁兰酶的分泌表达及表达产物的应用性能。枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)168菌株的普鲁兰酶编码基因BsP分别在大肠杆菌(Escherichia coli)和枯草芽孢杆菌中进行表达,重组酶在两种宿主中均能利用自身结构分...
作者旨在研究枯草芽孢杆菌普鲁兰酶的分泌表达及表达产物的应用性能。枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)168菌株的普鲁兰酶编码基因BsP分别在大肠杆菌(Escherichia coli)和枯草芽孢杆菌中进行表达,重组酶在两种宿主中均能利用自身结构分泌到细胞外。重组酶分泌到枯草芽孢杆菌细胞外的产物的酶学性质与积累在大肠杆菌胞质内的产物有明显的差异,分泌到枯草芽孢杆菌细胞外的重组酶BsBsP的比酶活为153.7 U/mg,是大肠杆菌胞质内产物的5.5倍。重组酶BsBsP最适pH为6.0,最适温度为45℃。重组酶BsBsP对直链淀粉无降解作用,为I型普鲁兰酶。在以土豆淀粉为原料的粉丝制作工艺中,以重组酶BsBsP水解芡糊淀粉可以有效降低粉丝断条率。枯草芽孢杆菌普鲁兰酶可利用自身结构实现高效分泌表达,重组酶适用于以淀粉为原料的粉丝制作。
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关键词
枯草芽孢杆菌
普鲁兰酶
分泌表达
双精氨酸转运途径
下载PDF
职称材料
一种高耐热普鲁兰酶的克隆表达、酶学性质及其在粉丝制作中的应用
被引量:
2
2
作者
孙利鹏
德青美朵
+4 位作者
朱新文
姚雁
王婕
祝冬君
沈微
《食品工业科技》
CAS
北大核心
2020年第5期113-118,123,共7页
为了获得一种适合在粉丝制作中使用的高耐热普鲁兰酶,对Thermus thermophilus的普鲁兰酶基因进行了异源表达及应用性质研究。以T.thermophilus XQ5331基因组DNA为模板,通过PCR方法扩增获得普鲁兰酶编码基因TtP5331,在大肠杆菌中实现高...
为了获得一种适合在粉丝制作中使用的高耐热普鲁兰酶,对Thermus thermophilus的普鲁兰酶基因进行了异源表达及应用性质研究。以T.thermophilus XQ5331基因组DNA为模板,通过PCR方法扩增获得普鲁兰酶编码基因TtP5331,在大肠杆菌中实现高效表达。重组酶TtP通过离子交换层析获得初步纯化。酶学性质研究结果显示,重组酶最适作用温度为75℃,最适pH6.5,在最适条件下比酶活为17 U/mg。重组酶TtP在90℃下保温10 min仍能保留约60%的酶活,沸水浴5 min可以完全灭活。在传统粉丝制作工艺基础上,采用先加酶后制芡糊的方式制作粉丝,按照每克芡糊淀粉1 U的量添加TtP处理芡糊,制作的粉丝的断条率为4.5%,与添加明矾获得的粉丝基本一致。以上结果说明,在酶法粉丝制作工艺中,TtP适合在芡糊制作前在淀粉悬液中添加,是一种用量小、使用简便的明矾替代物。
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关键词
粉丝
明矾替代物
普鲁兰酶
Thermus
thermophilus
异源表达
下载PDF
职称材料
题名
枯草芽孢杆菌普鲁兰酶基因的分泌表达及其在粉丝制作中的应用
被引量:
1
1
作者
祝冬君
张锦雯
姚雁
单逸蓝
杨梦莲
沈微
杨海泉
夏媛媛
陈磊
陈献忠
机构
江南大学工业生物技术教育部重点实验室
无锡先秦生物科技有限公司
江南大学中国高校工业微生物资源数据平台
出处
《食品与生物技术学报》
CAS
CSCD
北大核心
2022年第2期82-93,共12页
基金
国家863计划项目(2013AA102101-5)。
文摘
作者旨在研究枯草芽孢杆菌普鲁兰酶的分泌表达及表达产物的应用性能。枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)168菌株的普鲁兰酶编码基因BsP分别在大肠杆菌(Escherichia coli)和枯草芽孢杆菌中进行表达,重组酶在两种宿主中均能利用自身结构分泌到细胞外。重组酶分泌到枯草芽孢杆菌细胞外的产物的酶学性质与积累在大肠杆菌胞质内的产物有明显的差异,分泌到枯草芽孢杆菌细胞外的重组酶BsBsP的比酶活为153.7 U/mg,是大肠杆菌胞质内产物的5.5倍。重组酶BsBsP最适pH为6.0,最适温度为45℃。重组酶BsBsP对直链淀粉无降解作用,为I型普鲁兰酶。在以土豆淀粉为原料的粉丝制作工艺中,以重组酶BsBsP水解芡糊淀粉可以有效降低粉丝断条率。枯草芽孢杆菌普鲁兰酶可利用自身结构实现高效分泌表达,重组酶适用于以淀粉为原料的粉丝制作。
关键词
枯草芽孢杆菌
普鲁兰酶
分泌表达
双精氨酸转运途径
Keywords
Bacillus subtilis
pullulanase
secretory expression
twin-arginnine translocation system
分类号
S816.53 [农业科学—饲料科学]
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职称材料
题名
一种高耐热普鲁兰酶的克隆表达、酶学性质及其在粉丝制作中的应用
被引量:
2
2
作者
孙利鹏
德青美朵
朱新文
姚雁
王婕
祝冬君
沈微
机构
河南仰韶生化工程有限公司
江南大学
无锡先秦生物科技有限公司
出处
《食品工业科技》
CAS
北大核心
2020年第5期113-118,123,共7页
基金
国家高技术研究发展计划(863计划)(2013AA102101)
文摘
为了获得一种适合在粉丝制作中使用的高耐热普鲁兰酶,对Thermus thermophilus的普鲁兰酶基因进行了异源表达及应用性质研究。以T.thermophilus XQ5331基因组DNA为模板,通过PCR方法扩增获得普鲁兰酶编码基因TtP5331,在大肠杆菌中实现高效表达。重组酶TtP通过离子交换层析获得初步纯化。酶学性质研究结果显示,重组酶最适作用温度为75℃,最适pH6.5,在最适条件下比酶活为17 U/mg。重组酶TtP在90℃下保温10 min仍能保留约60%的酶活,沸水浴5 min可以完全灭活。在传统粉丝制作工艺基础上,采用先加酶后制芡糊的方式制作粉丝,按照每克芡糊淀粉1 U的量添加TtP处理芡糊,制作的粉丝的断条率为4.5%,与添加明矾获得的粉丝基本一致。以上结果说明,在酶法粉丝制作工艺中,TtP适合在芡糊制作前在淀粉悬液中添加,是一种用量小、使用简便的明矾替代物。
关键词
粉丝
明矾替代物
普鲁兰酶
Thermus
thermophilus
异源表达
Keywords
vermicelli
alum substitute
pullulanase
Thermus thermophilus
heterologous expression
分类号
TS236 [轻工技术与工程—粮食、油脂及植物蛋白工程]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
枯草芽孢杆菌普鲁兰酶基因的分泌表达及其在粉丝制作中的应用
祝冬君
张锦雯
姚雁
单逸蓝
杨梦莲
沈微
杨海泉
夏媛媛
陈磊
陈献忠
《食品与生物技术学报》
CAS
CSCD
北大核心
2022
1
下载PDF
职称材料
2
一种高耐热普鲁兰酶的克隆表达、酶学性质及其在粉丝制作中的应用
孙利鹏
德青美朵
朱新文
姚雁
王婕
祝冬君
沈微
《食品工业科技》
CAS
北大核心
2020
2
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职称材料
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