胎鼠肺细胞的分离纯化及原代培养

目的 建立一套可靠的胎鼠肺细胞分离、纯化和培养技术 ,用于体外研究肺发育和早产儿肺部疾病。方法采用胰酶和胶原酶消化 19d胎鼠肺组织块 ,经差速离心和反复贴壁法 ,分离、纯化胎鼠肺泡Ⅱ型细胞 (AECⅡ )和肺成纤维细胞 (LF) ,并进行原代培养。用细胞角蛋白 (cytokeratin)和波形蛋白 (vimentin)免疫细胞化学染色和透射电镜对所分离的细胞进行鉴定。结果 该方法所得细胞产量大、纯度高。免疫细胞化学鉴定 ,AECⅡ细胞cytokeratin染色阳性 ,vimentin染色阴性 ,LF则相反。透射电镜观察AECⅡ ,可见细胞内板层小体。结论 该方法是一种可靠的胎鼠肺细胞的分离纯化培养技术 。

注射用还原型谷胱甘肽治疗新生儿窒息后肝损害的临床疗效观察

目的:观察注射用还原型谷胱甘肽(阿拓莫兰)在治疗新生儿窒息后肝损害中的保肝、降酶的临床疗效及安全性。方法:68例窒息后肝功能损害新生儿用还原型谷胱甘肽治疗1周,观察治疗前后肝功能及临床症状和体征变化。结果:轻度窒息组和重度窒息组治疗前与治疗后比较,谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、总胆汁酸(TBA)、总胆红素(Tbil)及临床症状包括循环不良症状消失时间、腹胀、呕吐、吃奶量、肝脏肿大等差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:注射用还原型谷胱甘肽能显著改善窒息后肝损伤新生儿肝功能和消化道症状,值得临床推广使用。

西南某水电站f_5断层化学复合灌浆试验研究

西南某水电站左岸抗力体发育f5断层对坝基的变形稳定、基础应力传递等极为不利,严重影响大坝稳定性及安全运行,需采用相应的工程方法对其进行加固处理。在对f5断层的工程地质特征进行仔细分析的基础上,选取化学复合灌浆对f5断层进行试验研究。从化学浆材的选择、灌浆施工工艺等方面进行了简要介绍。通过岩体透水率、钻孔声波和孔内变形模量等资料的对比分析对灌浆效果进行了检测评价,表明化学复合灌浆对f5断层的透水性改善明显,岩体声波和孔内变形模量等值有较大提高。

小儿慢性乙型肝炎免疫球蛋白及补体C_3的检测及意义

1 材料和方法 1.1 对象 50例患儿来自1997年5月～1997年12月全国中医肝病医疗中心门诊就诊的患儿,年龄在3～14岁,其中男28例,女22例。50例患儿均符合1995年5月北京第5次全国传染病寄生虫病学术会议讨论修订的慢性乙型病毒性肝炎诊断标准。健康对照组45例,均来自健康体检的儿童,经体检确认健康者,其中男25例,女20例。

维甲酸下调高氧暴露下胎鼠肺成纤维细胞及Ⅱ型肺泡上皮细胞MMP-2表达

目的探讨维甲酸(RA)对高氧暴露下胎鼠肺成纤维细胞(LFs)和肺泡Ⅱ型上皮细胞(AECⅡ)基质金属蛋白酶-2 (MMP -2 )表达的影响及调控。方法原代培养胎鼠肺LFs及AECⅡ,待其生长至亚汇合状态时,随机分为:空气组、空气+RA组、高氧组和高氧+RA组。于培养2、6、12、2 4和4 8(AECⅡ)或72h(LFs)时,采用半定量RT- PCR方法检测MMP 2和TIMP 2mRNA表达,应用Westernblot检测p38和磷酸化p38(p p38)蛋白表达水平。结果(1)与空气组比较,高氧可促进胎鼠LFs、AECⅡMMP 2mRNA和胎鼠LFsp p38表达(P <0 . 0 1或P <0. 0 5 ) ;(2 )RA能部分下调高氧诱导的胎鼠LFs、AECⅡMMP 2mRNA高表达和明显降低胎鼠LFsp p38表达;(3)高氧、RA对胎鼠LFs、AECⅡTIMP -2mRNA和胎鼠LFsp38蛋白表达无明显影响;(4)胎鼠LFsp p38与MMP 2mRNA表达呈显著性正相关(r =0. 76 7,P <0. 0 1,n =18)。结论高氧可促进胎鼠LFs、AECⅡMMP 2mRNA表达;p38通路参与高氧状态下胎鼠LFsMMP -2表达调控;RA可在转录后水平调节p38的活性状态从而实现对MMP-2的表达调控。

高氧、维甲酸对胎鼠肺成纤维细胞c-Jun、c-Fos表达的影响

目的 探讨维甲酸对高氧暴露下胎鼠肺成纤维细胞 c- Jun、c- Fos表达的影响。方法 取第 2代胎鼠肺成纤维细胞作体外培养 ,待生长至接近融合状态时 ,随机分为 :空气组 ,空气 +维甲酸组 ,高氧组 ,高氧 +维甲酸组。于培养30 m in和 1、 2、 6、 12、 2 4、 4 8、 72 h时 ,行细胞固定后 ,应用免疫组化方法检测 c- Jun、c- Fos表达强度并结合计算机图像处理系统进行分析。结果 与空气组相比 ,高氧 1h时 c- Jun表达明显增强 (P<0 .0 1) ,6～ 12 h时达高峰 ,以后开始下降 ,但仍高于正常水平 (P<0 .0 1) ;c- Fos的表达在高氧 30 m in即增强 (P<0 .0 1) ,2～ 6 h达高峰 ,以后开始下降 ,2 4 h后恢复到正常水平。维甲酸能明显下调高氧所诱导的 c- Jun、c- Fos高表达 ,但并不能完全阻止 c- Jun、c- Fos的过度表达。结论 c- Jun、c- Fos可能参与了高氧暴露下胎鼠肺成纤维细胞的信号转导过程 ;维甲酸可部分抑制由高氧所诱导的 c- Jun、 c-

经胃管微创注入肺表面活性物质技术治疗新生儿呼吸窘迫综合征的效果

目的探讨经胃管微创注入肺表面活性物质技术在治疗新生儿呼吸窘迫综合征中的效果。方法选择2017年5月~2018年5月湖北省妇幼保健院新生儿重症监护室(NICU)收治的胎龄26~34周诊断为呼吸窘迫综合征(RDS)的早产儿40例。按照随机数字表法进行分组,即经胃管微创注入肺表面活性物质(LISA组,20例)和气管插管-肺表面活性物质-拔管(INSURE组,20例),LISA组在经鼻持续气道正压通气(NCPAP)下经直接喉镜直视下向气管内置入5F胃管并缓慢注入肺表面活性物质(PS),INSURE组采用气管插管注入PS,拔管后行NCPAP,观察两组患儿治疗后的呼吸机参数需求的变化情况以及不良反应和并发症的发生率。结果LISA组患儿的血氧饱和度(SpO2)下降1例、心动过缓1例、呼吸暂停0例、生后72 h内机械通气1例,明显低于INSURE组的SpO2下降9例、心动过缓8例、呼吸暂停8例、生后72 h内机械通气7例;LISA组6 h后氧浓度下降比例为19%,高于INSURE组的13%,差异有统计学意义(P<0.05)。两组的再次使用PS、死亡率、气漏、支气管肺发育不良、坏死性小肠结肠炎、早产儿视网膜病、颅内出血等疾病发生率比较,差异无统计学意义(P> 0.05)。结论LISA是治疗RDS的一种安全有效的给药方法。

锦屏一级水电站f_5断层、煌斑岩脉复合灌浆技术研究

锦屏一级水电站发育的f5断层和煌斑岩脉对坝基的变形稳定、基础应力传递等极为不利,严重影响大坝稳定性及安全运营。针对f5断层、煌斑岩脉水泥灌浆存在的问题,结合f5断层和煌斑岩脉工程地质特征,开展f5断层、煌斑岩脉的水泥-化学复合灌浆加固技术研究。首先,对水泥-化学复合灌浆的作用机理进行分析,从灌浆材料、灌浆方法、现场灌浆试验、灌浆效果评价等方面进行了分析研究。研究结果表明,所采用灌浆材料可灌性较好,施工工艺、灌浆参数基本合理;灌浆后岩体透水性得到了改善,对f5断层、煌斑岩脉声波波速、变形模量等有一定程度提高,但仍然没有达到设计要求。基于水泥-化学复合灌浆存在的问题,分别从灌浆材料、灌浆参数和灌浆质量检查等方面提出了优化建议。

高氧、维甲酸对早产鼠肺组织基质金属蛋白酶-2、-9及特异性组织抑制物-1、-2表达的影响

目的探讨基质金属原蛋白-2(MMP-2)、MMP-9、基质金属蛋白酶特异性组织抑制物-1(TIMP-1)和TIMP-2在高氧肺损伤中的作用及维甲酸(RA)的保护作用机制。方法建立高氧(FiO285%)暴露早产SD大鼠肺损伤模型,应用RT-PCR法检测MMP-2、MMP-9、TIMP-1和TIMP-2mRNA表达,采用明胶酶谱检测MMP-2和MMP-9酶原及活酶表达,采用Western blot技术检测TIMP-1和TIMP-2蛋白表达。结果与空气组比较,高氧暴露4、7、14d,MMP-2、MMP-9和TIMP-1 mRNA的表达均显著升高(P均<0.01),MMP-2活酶、MMP-9酶原及活酶和TIMP-1蛋白的表达明显上调(P<0.05);RA对空气暴露下它们的表达均无明显影响(P均>0.05),但不同程度下调高氧暴露后MMP-2、MMP-9、TIMP-1mRNA的表达和MMP-2活酶、MMP-9酶原及活酶的表达,进一步提高TIMP-1蛋白表达;高氧、RA对TIMP-2 mRNA和蛋白的表达均无明显影响(P均>0.05)。结论高氧暴露明显改变MMPs/TIMPs的表达,在肺泡形成关键时期,MMPs/TIMPs之间平衡关系的破坏是造成肺发育受阻和纤维化的重要因素;通过协调MMPs/TIMPs之间的表达,改善肺泡结构,降低肺纤维化程度,从而逆转高氧所致肺损伤,是RA发挥保护作用的重要机制之一。

血小板源性生长因子对新生大鼠高氧肺损伤的影响

目的 探讨血小板源性生长因子 (PDGF)在新生大鼠高氧肺损伤中时空作用机制。方法 应用免疫组织化学法定位PDGF表达 ,反转录 聚合酶链反应 (RT PCR)检测各时间点 (生后 4、7、10、14d)PDGFmRNA水平。结果 随日龄增加 ,PDGF A、 B含量发生不同的变化。高氧暴露下PDGF BmRNA含量及其表达均显著高于空气组 (P <0 .0 5 ,<0 .0 1)。而PDGF AmRNA水平及其表达却显著低于空气组 (P <0 .0 5 ,P <0 .0 1)。结论 高氧降低PDGF A水平 ,增加PDGF B含量。PDGF A、 B共同参与高氧暴露下肺组织损伤过程 ,是肺发育阻滞的重要因素。

黏土化蚀变岩与断层泥质物的工程性质对比研究——以孟底沟水电站工程为例

通过对黏土化蚀变岩和断层泥质物X射线粉晶衍射、颗分、水理性及抗剪(断)强度等的试验研究,对比分析了黏土化蚀变岩与断层泥质物的工程地质特性。试验结果表明:黏土化蚀变岩中主要含有伊利石、高岭石、蒙脱石等黏土矿物和石英等,其次为碳酸盐和长石等,其矿物组成、成分与断层泥质物具有相似的特征;颗分及水理性试验显示,黏土化蚀变岩与断层泥质物都以黏土质砾为主,少许为黏土质砂,且二者具有相同的抗剪(断)强度;黏土化蚀变岩按结构面性状可划分为岩屑夹泥型。该研究为划分黏土化蚀变岩的工程性状、评价其可利用性等提供了可靠的依据。

Notch信号与大鼠肺发育的关系研究

目的 研究Notch受 /配体在大鼠肺发育过程中的表达特征 ,探讨Notch信号对肺形态发生和肺泡上皮成熟分化的调控作用。方法 利用肺组织病理学检查、免疫组化、RT PCR半定量分析技术 ,检测Notch1～ 3 、Jagged1在大鼠肺发育不同阶段 (胎龄 18、 2 0、 2 1d及生后 1、 4、 7、 10、 14、 2 1d)肺组织内的表达。结果 大鼠肺发育囊泡期即有Notch受 /配体的显著表达 ,主要分布于气道上皮细胞、肺泡上皮细胞、血管内皮细胞和间质细胞 ,Notch1～ 3 及Jagged1蛋白及mRNA表达水平随胎龄增加呈动态改变。结论 Notch信号在肺发育中起重要作用 ,可能参与支气管树及气血屏障的形成 ,且对呼吸道上皮细胞、肺泡上皮细胞的成熟分化有重要调节作用。

孟底沟水电站蚀变岩密集带综合变形模量研究

拟建雅砻江孟底沟水电站坝基花岗闪长岩体中,密集发育有单条宽度为0.5-3m的黏土化热液蚀变岩带。变形试验表明,微新花岗闪长岩的变形模量平均值高达31.50GPa,而强黏土化蚀变岩及弱黏土化蚀变岩变形模量仅分别为6.79GPa、11.10GPa,故蚀变岩密集带的存在必将对坝基岩体的变形特性产生重大影响。目前对于这种变形特性差异显著的复杂组合岩体综合变形模量尚无成熟的评价方法。因此,本文在刚性承压板变形试验及声波测试基础上,采用非线性回归法分析了岩体声波与变形模量的相关性,建立了岩体Vp-E0的相关性公式,进而采用算术平均法计算了典型蚀变岩密集带的综合变形模量,其值为18.03GPa,较微新花岗闪长岩变形模量降低了42.76%;同时,根据带内各种蚀变岩所占比例,采用加权平均法求得蚀变岩密集带综合变形模量值为19.40GPa,较微新花岗闪长岩变形模量降低了38.41%。两种方法所得的综合变形模量值相差仅为7.60%,且对比刚性承压板法所得变形模量值,前者更加安全可靠。故建议采用非线性回归法对孟底沟水电站蚀变岩密集带综合变形模量进行计算。

锦屏一级水电站煌斑岩脉化学复合灌浆试验研究

雅砻江锦屏一级水电站左岸抗力体发育有f2、f5、f8、f42-9断层、煌斑岩脉及深部裂缝等软弱带,需采用相应的工程方法对这些部位进行加固处理。化学复合灌浆是在水泥灌浆基础上发展起来的一种基础处理方法,从化学浆材的选择、灌浆参数的确定、灌浆施工工艺等方面介绍了化学复合灌浆在左岸抗力体煌斑岩脉加固处理中的试验情况。根据试验结果对试验区煌斑岩脉的可灌性进行了分析,并通过岩心观察、岩体透水率、岩体声波和孔内变形模量等资料的对比分析对灌浆效果进行了检测评价,评价表明化学复合灌浆对煌斑岩脉的加固处理效果明显。最后根据本次灌浆的试验结果提出了建议。

胰岛素样生长因子结合蛋白2在新生鼠肺发育中的作用

目的探索胰岛素样生长因子结合蛋白(IGFBP)2在新生鼠肺发育中的作用。方法SD孕鼠80只分为4组,即A:对照组;B:地塞米松(Dex)1组;C:Dex2组;D:维A酸(RA)组。A、B、D组分别于孕18～20d皮下注射生理盐水、Dex,腹腔注射RA;C组于生后1～3d皮下注射Dex。各组分别于孕18、20、21d(C组孕期不取)、生后1、3、5、7、10、14、21d取肺标本作形态学检查、免疫组织化学、Westernblot及RT PCR检测。结果1.肺组织形态学:B、C组早期肺泡发育提前,数目多,壁薄,晚期则明显落后于A、D组。2.IGFBP2肺表达:A组中IGFBP2主要在胎肺组织中表达,孕18d左右表达最强,随后表达渐减弱。B、C组表达趋势同A组,但生后各时间点均较A组增强;D组生后各时间点均较A组减弱。3.Westernblot:IGFBP2多肽表达强度各组孕18d表达最强,随后渐降低;B、C组生后各时间点表达强度明显高于A组(P均<0.01);D组各时间点浓度均明显低于A组(P均<0.01)。4.RT PCR:IGFBP2mRNA表达的强度变化规律与其肽浓度变化相似。结论IGFBP2在肺发育过程起重要作用,其浓度过高则影响肺发育。

血小板衍生生长因子对肺发育的影响

目的探讨血小板衍生生长因子(PDGF)在胚胎和生后新生大鼠肺发育中的作用机制,研究其对肺分支形态形成,肺实质和间质发育调控原理。方法应用免疫组织化学法和RT-PCR法半定量分析和检测各时间点(胚胎18、20、21d和生后1、4、7、14、21d)PDGFmRNA及其表达水平。结果在胚胎晚期,PDGF表达于肺间质细胞和肺实质细胞胞浆。出生后随日龄增加,PDG-FmRNA及其表达呈动态变化,组间比较差异显著(P<0.05,P<0.01)。结论PDGF在肺分支形态发育和肺组织细胞增殖中起着关键作用,它不仅参与肺泡数量调节,而且是肺间质细胞和肺实质细胞分化成熟不可缺少的因子。

C-Chord:一种改进的Chord路由算法

Chord是一种典型的资源查找路由协议,具有负载均衡、可扩展性和灵活性等特点,广泛应用于P2P系统,但查找效率并不高。为了提高查找效率,提出了一种改进的多层次C-Chord路由算法,通过多层的集群结构组织,先优化路由表,然后改进资源查询过程,最后结合有效的维护机制,使查询效率得以提高。仿真实验表明,这种改进的Chord路由算法查询效率明显高于传统的Chord算法。而且C-Chord路由算法可以把传统的P2P系统扩展成适应大规模的分布式系统,网络的稳定性和健壮性更好。

慢性肉芽肿合并侵袭性曲霉菌病1例报告暨文献复习

曲霉菌属成员是环境中分布最广的真菌,存在于土壤、植物、灰尘、食物和空气中,这些曲霉菌会引起肺部、鼻窦和其他部位的局部感染。烟曲霉是最常见的引起患者发病的曲霉属真菌,并且它以如IgE 介导致敏的各种方式引起变异性支气管肺曲霉菌病(allergic bronchopulmonary aspergillosis,ABPA)。表现为慢性支气管哮喘(简称哮喘)和反复出现的肺部阴影,可伴有支气管扩张^[1-2]。并且曲霉菌的敏感性和变异性支气管肺曲霉菌病(ABPA)在囊泡性肺纤维化症中起着重要的作用,现报道本科室收治1 例新生儿侵袭性曲霉病患者。

锦屏一级水电站左岸抗力体基础处理洞室群围岩稳定性分析

通过对锦屏一级水电站左岸抗力体五层洞室岩体结构特征详细调查,采用水电围岩分类的方法对抗力体洞室进行围岩分类。分类结果表明:抗力体洞室围岩以Ⅲ2类围岩居多,占了50%左右,其次为Ⅳ类,占36%左右,Ⅲ1和Ⅴ类围岩所占比例较少。通过对洞室施工开挖失稳破坏现象的调查研究,分析了洞室失稳破坏的机制及破坏形式,认为围岩主要的破坏形式为弱面控制型的块体滑移塌落。对洞室监测资料的分析结果表明,在目前的支护条件下,总体监测未见异常,整体上基础处理洞室监测状态稳定。但F5、F42-9断层及煌斑岩脉等软弱部位应力及变形缓慢增加,需要加强监测。最后根据分析结果提出了建议。

412例早产儿临床分析

目的 探讨如何提高早产儿存活率和生存质量。方法 回顾分析本院新生儿病房收治的 4 12例早产儿临床资料。结果 早产最常见的因素是多胎妊娠、妊娠合并高血压、前置胎盘或胎盘早剥、母妊娠合并其他疾病、胎膜早破、脐带因素等。母亲妊娠年龄以 2 0～ 2 9岁为主 ,分娩方式以剖宫产为主。早产儿常见疾病的顺位为 :新生儿缺氧缺血性脑病、新生儿窒息、血糖紊乱等。早产儿死亡 4 2例 ,病死率 10 .2 % ,体重、胎龄越小、病死率越高 ,死亡率最高的疾病是肺透明膜病(47.1% )。结论 避免多胎妊娠 ;立即进行复苏 ,机械通气治疗十分重要 ,且要严格掌握上呼吸机指征。