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WNT6基因对蛋鸡卵泡颗粒细胞的影响及机制研究
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作者 祝启钊 谢晓磊 +3 位作者 杨海霞 王晋 片慧芳 虞德兵 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期143-149,共7页
[目的]本文旨在研究WNT6基因在蛋鸡卵泡发育过程中的生物学功能及其作用机制。[方法]以300日龄海兰蛋鸡为研究对象,检测WNT6 mRNA在不同组织中表达特征。对体外培养的鸡卵泡颗粒细胞进行敲减和过表达WNT6基因后,用CCK-8试剂盒检测细胞增... [目的]本文旨在研究WNT6基因在蛋鸡卵泡发育过程中的生物学功能及其作用机制。[方法]以300日龄海兰蛋鸡为研究对象,检测WNT6 mRNA在不同组织中表达特征。对体外培养的鸡卵泡颗粒细胞进行敲减和过表达WNT6基因后,用CCK-8试剂盒检测细胞增殖,ELISA检测细胞培养基中的孕酮(P4)含量,荧光定量PCR检测卵泡刺激素受体(FSHR)和StAR、CYP11A1等基因表达水平。设立卵泡刺激素(FSH)浓度梯度处理体外培养的蛋鸡卵泡颗粒细胞,研究FSH对WNT6及WNT通路相关基因表达水平的影响。[结果]WNT6 mRNA在蛋鸡卵泡颗粒细胞内特异表达,在处于卵泡选择关键时期的小黄卵泡颗粒细胞内具有最高表达水平;与对照组相比,过表达WNT6极显著促进颗粒细胞增殖(P<0.01),极显著提高颗粒细胞P4合成量(P<0.01),并显著提高FSHR、CYP11A1、StAR、CYP19A1和HSD3B1基因表达水平(P<0.05);相反,敲减WNT6后颗粒细胞增殖被抑制(P<0.01),P4合成量极显著显著减少(P<0.01),并显著降低FSHR、CYP11A1、StAR、CYP19A1和HSD3B1基因表达水平(P<0.05);FSH呈剂量依赖性促进WNT6基因表达(P<0.05),还可显著提高颗粒细胞LRP1基因表达水平(P<0.05),而极显著降低FOXO1基因表达水平(P<0.01)。[结论]WNT6在蛋鸡卵泡颗粒细胞内特异性表达,其表达水平受FSH调控,WNT6促进颗粒细胞增殖与类固醇激素合成,并提高颗粒细胞FSHR基因表达表达水平。WNT6协同FSH促进蛋鸡卵泡发育并调控蛋鸡卵泡选择。 展开更多
关键词 WNT6 颗粒细胞 卵泡选择 卵泡刺激素
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不同群体鸭生长曲线拟合及肌纤维特性分析 被引量:3
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作者 王晋 匡伟 +5 位作者 何宗亮 高鹏 祝启钊 杨铭宣 杨海霞 虞徳兵 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第4期761-768,共8页
[目的]为了解北京鸭(P)、金陵白鸭(J,品系)及正反交后代(PJ、JP)出生后生长速度和肌纤维特性的差异,测定0~7周龄体重,用非线性回归模型探求4个群体鸭生长规律;采集7周龄公鸭胸肌组织,比较肌纤维特性和相关基因表达水平。[方法]利用Logis... [目的]为了解北京鸭(P)、金陵白鸭(J,品系)及正反交后代(PJ、JP)出生后生长速度和肌纤维特性的差异,测定0~7周龄体重,用非线性回归模型探求4个群体鸭生长规律;采集7周龄公鸭胸肌组织,比较肌纤维特性和相关基因表达水平。[方法]利用Logistic、Gompertz非线性模型拟合生长曲线,通过拟合度(R^(2))和残差平方和(E)选择最适模型,计算相对生长率、绝对生长率及其杂交一代(F_(1))的杂种优势率;利用肌纤维组织切片和Image pro plus软件分析比较肌纤维特性;利用RT-qPCR技术检测肌肉发育相关基因表达水平。[结果]P、PJ和JP组选择Logistic模型,J组选择Gompertz模型为最适模型(R^(2)≥0.986,E≤751.49);4周为拐点周龄,且P组质量最大,J组最小;各组相对生长率接近,绝对生长率差异明显,JP组4周龄的绝对生长率具有明显杂种优势,PJ组在6周后表现出优势。不同品种鸭的7周龄肌纤维直径、横截面积和密度均差异极显著(P<0.01);每个基因在F_(1)的表达水平介于亲本之间且P组最高,P与J组差异极显著(P<0.01)。此外,F_(1)的生肌决定因子(Myf 5)表达与亲本差异极显著(P<0.01),但互相间无显著差异(P>0.05),然而肌增强因子(MEF 2C)具有极显著差异(P<0.01)且与其他指标极显著相关(P<0.01)。[结论]0~4周是鸭生长的关键期,需要更加严格的饲养管理;建议6周后开始选育工作,以降低鸭的应激。肌发育关键基因的表达水平差异是造成肌纤维差异的关键原因。 展开更多
关键词 正反交 生长曲线 肌纤维
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