多西他赛通过作用肿瘤细胞丝状伪足抑制乳腺癌细胞的迁移和侵袭

目的:探讨多西他赛(docetaxel)和多柔比星(doxorubicin,ADM)对乳腺癌细胞迁移、侵袭能力以及丝状伪足形成的影响。方法:以三阴性乳腺癌细胞系MDA-MB-231为研究对象。实验分为3组:空白对照组、多西他赛组和ADM组,利用细胞计数试剂盒-8(cell counting kit-8,CCK-8)检测多西他赛和ADM对肿瘤细胞的IC_(10)值。利用Transwell小室法检测两种化疗药物在IC_(10)值浓度下,对乳腺癌细胞的迁移和侵袭能力的影响;在排除了此浓度对细胞增殖的影响后,用荧光素罗丹明(rhodamine)标记的鬼笔环肽着色细胞骨架,观察两种药物对肿瘤细胞丝状伪足形成的影响。结果:多西他赛和ADM对MDA-MB-231细胞的IC_(10)值分别为1.0 ng/mL和0.5μg/mL;在这两种质量浓度下,对细胞增殖活性并无影响,对细胞周期的分布也无影响(P>0.05);Transwell小室法检测结果显示,1.0 ng/mL的多西他赛较0.5μg/mL的ADM对肿瘤细胞的迁移、侵袭能力有更好的抑制作用(P<0.05);多西他赛对抑制三阴性乳腺癌细胞丝状伪足形成有更加突出的效应,两组细胞存在明显差异。结论:多西他赛较ADM能更好地抑制肿瘤细胞的迁移和侵袭,这与其抑制肿瘤细胞丝状伪足的形成可能存在相关性。

沉默MFG-E8对乳腺癌细胞的功能影响研究

通过沉默乳脂肪球表皮生长因子基因表达,探讨其对MFG-E8高表达乳腺癌细胞的功能影响。采用RT-PCR检测方法筛选MFG-E8高表达乳腺癌细胞;利用实验室已构建的MFG-E8干扰慢病毒干扰高表达乳腺癌细胞,检测细胞增殖、凋亡和迁移变化,利用Western blotting方法检测相关蛋白因子。经筛选,在几种不同乳腺癌细胞中,MCF-7细胞MFG-E8表达量最高;与对照组相比,通过沉默MFG-E8基因,乳腺癌细胞异常增殖减缓,细胞凋亡率上升,细胞迁移受到抑制,MFG-E8、BCL2、MMP2、MMP9、磷酸化STAT3蛋白表达量均下降,Bax和Caspase3蛋白表达上调;研究表明,沉默MFG-E8基因,乳腺癌细胞在癌症的发生发展过程中,功能受到明显改变,提示干扰MFG-E8的表达可能成为乳腺癌治疗的重要手段。

利用TCGA数据库构建男性乳腺癌的lncRNA-miRNA-mRNA ceRNA网络

目的通过构建男性乳腺癌的竞争性内源RNA(ceRNA)调控网络,探讨其发病机制。方法从TCGA数据库(The Cancer Genome Atlas Database)中下载男性乳腺癌的长链非编码RNA(lncRNA)、微小RNA(miRNA)和mRNA的表达谱数据,通过R软件的limma数据包分析男性乳腺癌差异表达的lncRNA、miRNA和mRNA;分析三者之间的靶向调控关系,构建ceRNA网络,并用Cytoscape软件可视化,并将差异表达基因进行GO富集和KEGG通路分析。结果男性乳腺癌中差异表达的lncRNA为275种,差异表达的miRNA为33种,差异表达的mRNA为1675种。本研究成功构建了男性乳腺癌的lncRNA-miRNA-mRNA ceRNA网络后,GO富集分析显示,差异表达mRNA参与细胞增殖的负调控、转录的负调控、细胞蛋白质代谢过程的调控、细胞迁移的调控、转移酶活性的正调控、间充质细胞增殖的正调控等。KEGG通路分析显示,差异表达mRNA参与癌症的途径、白细胞跨内皮迁移、丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)和神经营养蛋白信号通路。结论本研究基于TCGA数据库成功构建了男性乳腺癌的ceRNA网络。