1株鸭疫里默氏杆菌的全基因组测序及耐药性与遗传进化分析

【目的】了解鸭疫里默氏杆菌的耐药性、基因组结构与遗传变异程度,为鸭疫里默氏杆菌耐药性与基因组研究提供参考。【方法】本研究对1株从病死鸭脑组织分离的鸭疫里默氏杆菌疑似菌株进行了PCR鉴定、耐药性检测及全基因组框架图测序,并基于16S rDNA与管家基因对其进行了遗传进化分析。【结果】测序数据经过质控与过滤后成功组装为1个包含38个contigs的基因组框架,使用Abricate软件、CARD在线数据库共检测出6种不同的耐药基因,其中4种与耐药表型符合;将基因序列提交至MLST数据库,发现了一种新ST型,定为ST93。构建的16S rDNA和管家基因进化树结果表明,分离菌株与2株鸭疫里默氏杆菌具有较近的亲缘关系。【结论】分离鉴定得到1株鸭疫里默氏杆菌,该菌株为多药耐药菌株,其基因组中携带多个耐药基因;鸭疫里默氏杆菌的基因变异程度较大,且存在跨区域流行传播风险。在临床用药时应注意合理用药,及时监控抗性基因的水平转移,防止鸭疫里默氏杆菌跨区域流行。

鸡马立克病肺组织肿瘤病变与热休克蛋白表达的相关性分析

为探讨马立克病毒(Marek’s disease virus, MDV)与肿瘤发生、发展的关系,本研究建立了鸡马立克病(Marek’s disease, MD)模型,并利用病理组织学、免疫组织化学、荧光定量PCR、酶联免疫吸附(ELISA)等方法测定了肿瘤相关蛋白热休克蛋白60(heat shock protein 60, HSP60)在鸡肺脏组织内的定位及转录水平和含量的动态变化。结果显示,HSP60在攻毒组鸡肺脏肿瘤细胞的细胞质内强表达,试验周期内攻毒组HSP60 mRNA转录水平极显著高于对照组(P<0.01),总体呈开口向下的抛物线型,即7~28日龄间持续升高,28日龄达到最高值,分别为空白对照组和疫苗对照组的1.39倍和1.44倍,之后降低;HSP60含量7~28日龄攻毒组极显著高于空白对照组(P<0.01),35日龄后两者间差异不显著。该结果为进一步研究HSP60在肿瘤发生过程中的生物学作用奠定了基础。

噬菌体与动物细胞的相互作用

噬菌体是动物体内最丰富的生物群体。噬菌体易获得、宿主特异性强、不易产生耐药性等特点使其在治疗耐药细菌感染方面具有很大优势。随着基因工程和显微镜技术的发展,噬菌体对动物细胞的调节机制逐渐被发现。笔者综述了近年来关于噬菌体进入动物细胞的机制、噬菌体在细胞内的分布及与细胞内受体相互作用的研究进展,强调了噬菌体在协助宿主细胞杀灭细菌过程中的作用,讨论了噬菌体与动物细胞相互作用对噬菌体治疗的意义,旨在为噬菌体治疗耐药细菌的研究提供理论基础。

致病性大肠杆菌携带原噬菌体的预测及耐药性与毒力研究

【目的】研究致病性大肠杆菌携带原噬菌体的比例、原噬菌体携带毒力基因及耐药基因的情况,了解致病性大肠杆菌中原噬菌体对菌株的耐药性与毒力的影响,保证噬菌体生产菌的生物安全性,为大肠杆菌噬菌体的基础研究与应用提供借鉴。【方法】从NCBI中下载大肠杆菌全基因组信息,通过在线网站预测大肠杆菌中携带的原噬菌体数目,并分析原噬菌体的GC含量、基因组大小、占细菌基因组比例等基因组特征及完整型原噬菌体的类型,对原噬菌体做初步分类,统计分析完整型原噬菌体中携带耐药基因数目、耐药表型、耐药机制与毒力基因数目、毒力基因家族分布等。【结果】112株大肠杆菌携带完整型原噬菌体1024个,疑似型原噬菌体287个,缺陷型原噬菌体505个。1024个完整型原噬菌体中,多数与长尾噬菌体相似,占70.21%(719/1024);共有63种噬菌体类型,其中BP4795(登录号:NC_004813.1)类型的占比最高,达到19.24%(197/1024),其次是DE3(登录号:NC_042057.1),占比11.72%(120/1024)。大肠杆菌携带原噬菌体的GC含量在38%~57%之间,基因组大小为3.1~152.6 kb,其中80 kb以内的原噬菌体占97.03%(1762/1816)。1024个完整型原噬菌体中携带耐药基因占比为6.35%(65/1024),共携带耐药基因253个,分别来自11个抗生素耐药基因家族;携带一个或多个毒力基因的完整性原噬菌体占42.78%(438/1024),共携带毒力基因1274个,分别来自9个不同毒力因子家族,平均每个完整型原噬菌体携带毒力基因2.9个。【结论】大肠杆菌普遍携带原噬菌体,原噬菌体中部分携带耐药基因与毒力基因,在实际应用中应充分评估其风险,防止原噬菌体造成的耐药基因与毒力基因在菌株之间的转移。

噬菌体介导基因转移的研究进展

噬菌体是一种侵染细菌的病毒,可特异性裂解细菌。噬菌体可存在于人类和动物肠道内,通过机体排泄而释放至外环境并稳定存在,在细菌之间的基因转移中发挥重要作用。噬菌体介导的基因转移可分为普遍性转导与局限性转导两种方式。噬菌体介导的细菌基因转移需要满足以下3个条件,即噬菌体和细菌的浓度超过一定阈值,细菌生理状态适合噬菌体感染,pH值、温度等环境因素适合噬菌体感染。噬菌体介导的基因转移给公共卫生及畜牧养殖带来很多的问题,因此笔者对噬菌体介导基因转移的转导方式进行了综述,分析了影响噬菌体基因转移的因素,并介绍了噬菌体介导基因转移的应用,提出了噬菌体介导基因转移过程中亟待解决的问题,以期为研究环境中的基因转移现象提供借鉴。

基因工程编辑噬菌体的技术及应用

噬菌体主要用于治疗细菌性感染,将其作为抗菌药物开发具有巨大的优势及应用潜力。但噬菌体疗法受宿主谱狭窄、安全性评价体系不完善等因素影响,作为抗菌药物的研究进展缓慢。近年来,多重耐药菌的增加使人们对以噬菌体作为抗菌药物重新产生了兴趣。基因工程技术的发展给噬菌体的编辑提供了广泛的可能性,使得噬菌体可以精确检测和杀灭细菌。文章综述了噬菌体编辑技术的进展,以期为噬菌体疗法在临床上发挥更大的作用提供参考。

肉桂酸钾对“817”肉鸡生长性能的影响

为了研究饲料添加物肉桂酸钾对“817”肉鸡生长性能的影响,试验采用单变量对比试验方法,选用无病且体质较好的“817”1日龄肉鸡300只,随机分成2组,其中对照组设2个重复,试验组设4个重复,每个重复50只鸡。对照组饲喂基础日粮,试验组饲喂添加0.05%肉桂酸钾的试验饲料。观察记录各组的肉鸡成活率、日采食量、日增重量以及料重比,从而研究肉桂酸钾对于“817”肉鸡生长性能的作用。结果表明:饲喂肉桂酸钾可使肉鸡日增重每只提高1.01g;肉鸡出栏的重量增加了42.46g/只,成活率提高1.50%,料重比减少0.073,说明肉桂酸钾对于改善肉鸡生长性能的效果显著。

新支流法四联新型佐剂灭活疫苗临床应用效果评价

科学评估新型专利佐剂新支流法疫苗在肉鸡养殖中免疫效果,为临床应用奠定基础。将6.24万只雏鸡,随机平均分为A、B、C、D共4栋,A、B两栋为试验组,注射新型专利佐剂新支流法疫苗;C、D两栋为对照组,注射传统油佐剂新支流法疫苗。观察疫苗注射后雏鸡分布、采食、疫苗吸收情况,统计分析各抗体滴度差异。结果显示,疫苗注射后,试验组与对照组相比,鸡群分布、采食、疫苗吸收情况无显著差异,试验组抗体水平在14日龄、21日龄优于对照组;41日龄时,各栋抗体水平均出现不同程度的下降,且离散度增加。新型专利佐剂新支流法疫苗能够提高前期抗体滴度,对缩短肉鸡抗体空白期、降低疾病风险具有一定优势。