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题名橡胶树HbEBP1蛋白亚细胞定位初步研究
被引量:1
- 1
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作者
祝建顺
程汉
肖成江
安泽伟
黄华孙
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机构
中国热带农业科学院橡胶研究所国家橡胶树育种中心
海南大学农学院
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出处
《热带作物学报》
CSCD
北大核心
2013年第5期815-820,共6页
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基金
国家天然橡胶产业体系(No.CARS-34)
中央级公益性科研院所基本科研业务费专项基金项目(No.1630022011002))
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文摘
利用融合PCR法构建HbEBP1基因与绿色荧光蛋白基因的融合表达载体,成功转化拟南芥,借助激光共聚焦显微镜检测HbEBP1-EGFP融合蛋白在转基因植株根细胞中的表达及分布。结果显示:在转基因植株根中观察到强烈荧光信号,并分布于细胞质与细胞核中。结果证实了HbEBP1蛋白同时定位于细胞质与细胞核中。
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关键词
橡胶树
融合PCR
HbEBP1蛋白
亚细胞定位
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Keywords
Rubber tree
Fusion PCR
HbEBP1 protein
Subcellular localization
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分类号
S794.1
[农业科学—林木遗传育种]
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题名利用电激共转化法转化橡胶树悬浮细胞的初步研究
被引量:1
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作者
程汉
肖成江
祝建顺
安泽伟
黄华孙
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机构
中国热带农业科学院橡胶研究所国家橡胶树育种中心
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出处
《热带作物学报》
CSCD
北大核心
2016年第8期1501-1506,共6页
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基金
国家自然科学基金项目(No.31301072)
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文摘
利用电激转化法对橡胶树悬浮细胞系进行转化,初步确定卡那霉素的筛选浓度、共转化的实验条件。通过电激共转化法将NPTII、GUS、EGFP和Hb CBF1基因成功导入到橡胶树悬浮细胞并整合到基因组中。通过卡那霉素抗性筛选、GFP荧光观察和PCR验证等方法,确定外源DNA片段转化成功。共筛选得到95个抗性愈伤组织,其中9个愈伤组织经过PCR验证确定整合有外源DNA片段,1个愈伤组织共转化有NPTII和GUS基因。此结果表明电激共转化法可成功应用于橡胶树悬浮细胞转化操作。
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关键词
橡胶树
电激转化
共转化
HbCBF1
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Keywords
Rubber tree
Electroporation
Co-transform
HbCBF1
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分类号
S794.1
[农业科学—林木遗传育种]
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题名橡胶树细胞悬浮系电激转化体系的初步研究
被引量:3
- 3
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作者
肖成江
程汉
祝建顺
安泽伟
黄华孙
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机构
海南大学农学院
中国热带农业科学院橡胶研究所国家橡胶树育种中心
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出处
《热带作物学报》
CSCD
2011年第2期245-250,共6页
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基金
国家天然橡胶产业技术体系(CARS-34)
中央级公益性科研院所基本科研业务费专项基金项目(No.XJSYWFZX2009-03)
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文摘
以橡胶树属种间杂交系B1(H.brasiliensis×H.nitida)的细胞悬浮系为试材,采用均匀设计结合偏最小二乘(PLS)回归,以瞬时表达率(Y1)、细胞成活率(Y2)为试验指标综合评价,以因变量最大值为优化方向,同时对两个试验指标进行回归建模。实验结果表明,正常接种后培养3 d对数期的悬浮细胞,在10μF、2 kn、1 300 V/cm的电激条件下,蔗糖浓度为0.4 mol/L的电激转化液,加入终浓度为90μg/mL的线性质粒CaMV35S-EGFP-NOS,600 mbar压强下抽真空1 min,可使细胞瞬时表达率达到0.648 1%,成活率达到56.984 7%。通过对电激转移中相关因素的优化,建立了一种适用于橡胶树悬浮细胞系较稳定的电激转移体系,为橡胶树悬浮细胞系转基因的研究提供有效方法。
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关键词
橡胶树
细胞悬浮系
均匀设计
偏最小二乘回归
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Keywords
Hevea brasiliensis; Cell suspension cultures; Uniform design; Partial Least-squares;
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分类号
S794.1
[农业科学—林木遗传育种]
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