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基于颗粒酶B启动子的磁共振报告基因成像监测CAR-T细胞激活状态
1
作者
倪晓英
秦勇
+5 位作者
贺小娅
黄杰
张湘敏
祝慧如
胡倩
蔡金华
《陆军军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第17期1959-1968,共10页
目的利用颗粒酶B(granzyme B,GB)启动子控制铁蛋白(ferritin heavy chain,FTH1)报告基因表达,探讨通过磁共振成像(magnetic resonance imaging,MRI)监测嵌合抗原受体T细胞(chimeric antigen receptor T cells,CAR-T细胞)激活状态的可行...
目的利用颗粒酶B(granzyme B,GB)启动子控制铁蛋白(ferritin heavy chain,FTH1)报告基因表达,探讨通过磁共振成像(magnetic resonance imaging,MRI)监测嵌合抗原受体T细胞(chimeric antigen receptor T cells,CAR-T细胞)激活状态的可行性。方法通过Ficoll密度梯度离心法以及流式分选得到细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic T lymphocytes,CTLs)。将GB启动子和FTH1基因连接,连同二唾液酸神经节苷脂(disialoganglioside 2,GD2)嵌合抗原受体(chimeric antigen receptor,CAR)以慢病毒为载体转入CTLs,构建GD2-CAR-T/pGB-FTH1细胞,以GD2-CAR-T/pCMV-FTH1、GD2-CAR-T和T细胞为对照。CytoTox96@非放射性细胞毒性检测各组细胞与人神经母细胞瘤细胞(SK-N-SH)共培养后的杀伤效果,ELISA检测共孵育因子以及GB分泌量,Western blot、普鲁士蓝染色、细胞MRI检测共培养后FTH1基因的表达。结果成功获得CTLs并构建GD2-CAR-T/pGB-FTH1、GD2-CAR-T/pCMV-FTH1、GD2-CAR-T细胞,3组细胞对肿瘤细胞杀伤效果、共孵育因子以及GB分泌量均显著高于T细胞组,GB表达水平在与SK-N-SH细胞共培养后1 d最高,3 d和7 d依次降低。GD2-CAR-T/pGB-FTH1组FTH1相对表达量以及铁含量变化趋势与GB表达一致,MRI信号呈逐渐升高趋势。GD2-CAR-T/pCMV-FTH1组FTH1相对表达量、铁含量及MRI信号在各时间点均无显著差异。GD2-CAR-T和T细胞组无明显FTH1表达及聚铁效应。结论基于GB启动子的MRI报告基因成像可实时反映CAR-T细胞的GB表达水平和肿瘤杀伤作用,为CAR-T治疗提供了一种监测细胞激活状态的可视化手段。
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关键词
颗粒酶B
铁蛋白
报告基因
磁共振成像
嵌合抗原受体T细胞
二唾液酸神经节苷脂
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职称材料
试论雅俗兼容的刘姥姥形象——兼谈曹雪芹《红楼梦》的雅俗观
被引量:
2
2
作者
祝慧如
《汉字文化》
2018年第18期19-20,共2页
在《红楼梦》中,刘姥姥的人物形象充分体现了小说雅俗兼容的艺术特点。本文一方面从攀亲戚动机、举止言行、迷信思想等方面考察刘姥姥"俗"的人物特点;另一方面由精神本质、立身准则等探讨其"雅"的人物形象特质。刘...
在《红楼梦》中,刘姥姥的人物形象充分体现了小说雅俗兼容的艺术特点。本文一方面从攀亲戚动机、举止言行、迷信思想等方面考察刘姥姥"俗"的人物特点;另一方面由精神本质、立身准则等探讨其"雅"的人物形象特质。刘姥姥人物塑造考索《红楼梦》作者的创作意图,重新审视其"雅俗"观念的小说表达。
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关键词
《红楼梦》
刘姥姥雅俗
兼谈
原文传递
题名
基于颗粒酶B启动子的磁共振报告基因成像监测CAR-T细胞激活状态
1
作者
倪晓英
秦勇
贺小娅
黄杰
张湘敏
祝慧如
胡倩
蔡金华
机构
重庆医科大学附属儿童医院
重庆医科大学附属儿童医院
出处
《陆军军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第17期1959-1968,共10页
基金
中国博士后科学基金第74批面上资助(2023M740456)
重庆市自然科学基金面上项目(cstc2020jcyj-msxmX0235)。
文摘
目的利用颗粒酶B(granzyme B,GB)启动子控制铁蛋白(ferritin heavy chain,FTH1)报告基因表达,探讨通过磁共振成像(magnetic resonance imaging,MRI)监测嵌合抗原受体T细胞(chimeric antigen receptor T cells,CAR-T细胞)激活状态的可行性。方法通过Ficoll密度梯度离心法以及流式分选得到细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic T lymphocytes,CTLs)。将GB启动子和FTH1基因连接,连同二唾液酸神经节苷脂(disialoganglioside 2,GD2)嵌合抗原受体(chimeric antigen receptor,CAR)以慢病毒为载体转入CTLs,构建GD2-CAR-T/pGB-FTH1细胞,以GD2-CAR-T/pCMV-FTH1、GD2-CAR-T和T细胞为对照。CytoTox96@非放射性细胞毒性检测各组细胞与人神经母细胞瘤细胞(SK-N-SH)共培养后的杀伤效果,ELISA检测共孵育因子以及GB分泌量,Western blot、普鲁士蓝染色、细胞MRI检测共培养后FTH1基因的表达。结果成功获得CTLs并构建GD2-CAR-T/pGB-FTH1、GD2-CAR-T/pCMV-FTH1、GD2-CAR-T细胞,3组细胞对肿瘤细胞杀伤效果、共孵育因子以及GB分泌量均显著高于T细胞组,GB表达水平在与SK-N-SH细胞共培养后1 d最高,3 d和7 d依次降低。GD2-CAR-T/pGB-FTH1组FTH1相对表达量以及铁含量变化趋势与GB表达一致,MRI信号呈逐渐升高趋势。GD2-CAR-T/pCMV-FTH1组FTH1相对表达量、铁含量及MRI信号在各时间点均无显著差异。GD2-CAR-T和T细胞组无明显FTH1表达及聚铁效应。结论基于GB启动子的MRI报告基因成像可实时反映CAR-T细胞的GB表达水平和肿瘤杀伤作用,为CAR-T治疗提供了一种监测细胞激活状态的可视化手段。
关键词
颗粒酶B
铁蛋白
报告基因
磁共振成像
嵌合抗原受体T细胞
二唾液酸神经节苷脂
Keywords
granzyme B
ferritin
reporter gene
magnetic resonance imaging
chimeric antigen receptor T cells
disialoganglioside
分类号
R392.12 [医药卫生—免疫学]
R445.2 [医药卫生—影像医学与核医学]
R73-362 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
试论雅俗兼容的刘姥姥形象——兼谈曹雪芹《红楼梦》的雅俗观
被引量:
2
2
作者
祝慧如
机构
济南外国语学校
出处
《汉字文化》
2018年第18期19-20,共2页
文摘
在《红楼梦》中,刘姥姥的人物形象充分体现了小说雅俗兼容的艺术特点。本文一方面从攀亲戚动机、举止言行、迷信思想等方面考察刘姥姥"俗"的人物特点;另一方面由精神本质、立身准则等探讨其"雅"的人物形象特质。刘姥姥人物塑造考索《红楼梦》作者的创作意图,重新审视其"雅俗"观念的小说表达。
关键词
《红楼梦》
刘姥姥雅俗
兼谈
分类号
I207.411 [文学—中国文学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
基于颗粒酶B启动子的磁共振报告基因成像监测CAR-T细胞激活状态
倪晓英
秦勇
贺小娅
黄杰
张湘敏
祝慧如
胡倩
蔡金华
《陆军军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2024
0
下载PDF
职称材料
2
试论雅俗兼容的刘姥姥形象——兼谈曹雪芹《红楼梦》的雅俗观
祝慧如
《汉字文化》
2018
2
原文传递
已选择
0
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参考文献
引证文献
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