RetCamⅡ筛查新生儿眼底病变情况分析

目的应用RetCamⅡ进行新生儿眼底筛查,观察新生儿眼底病变情况,探讨筛查足月儿视网膜疾病的必要性,研究新生儿视网膜出血的相关因素。方法收集2011年3月1日至2012年2月29日在我院眼科门诊及新生儿重症监护病房行RetCamⅡ眼底筛查及定期复查的新生儿,记录其性别、胎龄、分娩方式、窒息史及母孕史等临床资料及病变发展与转归。最后对筛查结果进行统计分析。结果符合条件的404例新生儿中,视网膜出血27例,早产儿视网膜病变(ROP)21例,角膜白斑1例,瞳孔残膜1例,巩膜异色1例,结膜炎1例,家族性渗出性玻璃体视网膜病变1例。经阴产新生儿视网膜出血发病率高于剖宫产新生儿,有统计学差异(P<0.05),视网膜出血发病率高于足月儿大于早产儿,有窒息史的新生儿发病率高于无窒息史的新生儿,母孕期有妊娠高血压综合征的患儿明显高于母孕期无妊娠高血压综合征的患儿,但差异均无统计学意义(P>0.05)。有吸氧史新生儿ROP发病率显著高于无吸氧史,有机械通气史新生儿ROP发病率显著高于无机械通气史,且两组间差异均有统计学意义(P<0.05)。ROP发病率在性别、胎龄、分娩方式、有无窒息史、母孕期有无妊娠高血压综合征、母亲分娩史及出生体重方面差异均无统计学意义(P>0.05)。结论新生儿视网膜病变中,视网膜出血及ROP发病率在早产儿及足月儿中均较高,足月儿眼底病变的筛查应引起高度重视。

Dlkl、Jaggedl基因在大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞增殖及转分化中的作用

目的研究Notch的配体Dlkl和Jaggedl分别激活Notch信号通路后对大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞（AECⅡ）转分化及增殖的影响。方法在细胞培养体系中，分别加入重组蛋白Dlkl和重组人核转录因子-κB（rhNF-κB）（Jaggedl激活剂），正常组加入含120mL／L胎牛血清的DMEM培养基作为对照，光镜和电镜下观察48、72、96h时间点AECⅡ增殖和转分化状况。血细胞计数器计数细胞；四甲基偶氮唑盐（M1Tr）比色法检测细胞增殖能力；免疫荧光双标法检测AECII特异性肺泡表面活性蛋白C（SP-C）及肺泡Ⅰ型上皮细胞（AECI）特异性水通道蛋白5（AQP5）的表达；时实荧光定量PCR检测转分化前后各时间点Notch配体Dlkl和Jaggedl、通路活化标志Notchl、靶基因Hesl及转分化标志物SP-C、AQP5mRNA的表达变化。结果细胞数及增殖能力：与正常组比较，Dlkl组细胞数及增殖能力明显提高[细胞数（×10^9／L）9．05±0．45比7．95±0．65，11．68±0．43比8．68±0．52，11．55±0．17比8．73±0．48，P均〈0．05；MTT结果（A值）0．699±0．050比0．462±0．080，0．912-t-O．080比0．535±0．040，0．726±0．050比0．540±0．020，P均〈0．05]，转分化速度减慢；rhNF-κB组细胞数及增殖能力降低[细胞数（×10^9／L）4．95±0．33比7．95±0．65，4．73±0．71比8．68±0．52，4．04±0．11比8．73±0．48，P均〈0．05；细胞增殖能力0．398±0．030比0．462±0．080，0．402±0．070比0．535±0．040，0．380±0．110比0．540±0．020，P均〈0．05]，转分化速度加快；单因素方差分析3组细胞之间的差别有统计学意义（细胞数：F=486．73，P=0．02；细胞增殖能力：F=37．16，P=0．02）。mRNA表达：与正常组比较，Dlkl组SP-CmRNA表达明显增多（P〈0．05），AQPSmRNA表达延迟且明显减少（P〈0．05），JaggedlmRNA始终呈弱表达或不表达，Dlkl、NotchlmRNA表达增多（P〈0．05），HeslmRNA表达减少（P〈0．05）；rhNF-KB组SP—CmRNA表达明显降低（P〈0．05），AQP5mRNA表达提前，且增多（P〈0．05），DlklmRNA弱表达或不表达，Jag-gedl、Hesl、NotchlmRNA表达增强（P〈0．05）。单因素方差分析3组细胞之间SP-C、AQP5、Dlkl、Jaggedl、Hesl、NotchlmRNA的表达差异统计学意义（F=96．80，P=0．01；F=82．55，P=0．01；F=269．80，P=0．00；F=312．34，P=0．00：F=169．17，P=0．01；F=19．85，P=0．02）。结论不同配体激活Noteh信号通路后，对AECⅡ转分化和增殖有不同影响，Dlkl能促进增殖，抑制转分化，而Jaggedl则抑制增殖，促进转分化。

全反式维A酸对胎鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞增殖和肺表面活性蛋白C及水通道蛋白5表达的影响

目的 探讨全反式维A酸（at-RA）对胎鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞（fAECⅡs）增殖和肺表面活性蛋白C（SPC）、水通道蛋白5（AQP5）表达的影响。方法 分离、纯化孕19 d的胎鼠肺组织，得到fAECⅡs。细胞培养1 d后，以at-RA作为干预方式，在at-RA作用1、2、3 d后，使用噻唑蓝（MTT）法检测细胞增殖情况和活力，应用倒置显微镜观察细胞生长状况，采用实时荧光定量PCR（RT-PCR）法检测 SPC mRNA、AQP5 mRNA 的表达，W estern blot法检测SPC、AQP5蛋白的表达。结果 1.at-RA作用1 d对细胞增殖和活力无影响（P 〉0.05）；而作用2 d后，at-RA明显促进细胞增殖、增强细胞活力（P 〈0.05），且促进作用在第3天最显著（P 〈0.05）。2.与对照组相比，at-RA使得细胞状态更佳，细胞贴壁更紧，折光性更好。3.与对照组相比，at-RA在第1、2、3天均可上调AQP5 mRNA及AQP5蛋白的表达（t= -19.58、-10.44、-16.01、46.25、12.79、-27.96，P均 〈0.05），分别为对照组的281.07% 、766.67% 、1163.33% 和792.65% 、1310.52% 、1561.56% 。4.与对照组相比，at-RA在第1、3天上调 SPC mRNA、SPC 蛋白的表达（蛋白为对照组的615.480% 、369.450% ；mRNA 为对照组的728.33% 、400.83%）（t= -26.34、-25.26、-25.25、-31.71，P均〈0.05），但在第2天，下调 SPC mRNA、SPC蛋白（对照组的66.57% ，11.269%）的表达（t=9.12、13.80，P均〈0.05）。结论 at-RA可促进 fAECⅡs增殖，增强细胞活力；促进SPC和AQP5的表达。