硫化氢活化ERK抵抗内质网应激诱导的心肌细胞凋亡

目的探讨硫化氢(H2S)对心肌的保护作用是否通过激活细胞外信号调节激酶(ERK)通路来抵抗心肌缺血诱导的内质网应激所致的心肌细胞凋亡。方法 60只雄性SD大鼠随机分为对照组、ISO模型组、NaHS+ISO组及PD98059阻断组,每组各15只。对照组大鼠注射等体积生理盐水;ISO模型组大鼠第1、2天腹腔注射生理盐水,第3、4天注射完生理盐水30min后背部皮下分别注射10mg/kg和5mg/kg的ISO;NaHS+ISO组大鼠腹腔注射NaHS 14μmol/kg,1次/d,连续2d后,改为2次/d,连续2d,并在后2d的第1次注射30min后,于背部皮下分别注射10mg/kg和5mg/kg的ISO,1次/d;PD98059阻断组大鼠在上述NaHS+ISO组大鼠处理基础上,于注射ISO之前经尾静脉注射MEK/ERK抑制剂PD98059(4mg/kg),1次/d,连续2d。每组最后一次注射ISO并禁食12h后,检测心电图、心功能指标;测定血浆中H2S浓度变化;TTC染色测定心肌梗死面积;TUNEL法检测心肌细胞凋亡指数(AI);免疫组织化学方法检测心肌中GRP78、CHOP及ERK磷酸化(p-ERK)蛋白的表达。结果 ISO模型组大鼠血浆的H2S含量明显低于对照组(P<0.01);14μmol/kg NaHS可以显著改善心肌缺血引起的心功能改变,而PD98059阻断组可以逆转NaHS的心肌保护作用;与ISO模型组相比,NaHS+ISO组大鼠心肌组织中GRP78、CHOP的表达明显减少(均P<0.05),pERK表达明显增多(P<0.01),AI、心肌梗死面积明显减小(均P<0.05);与NaHS+ISO组相比,PD98059阻断组大鼠心肌组织中GRP78、CHOP的表达、AI、梗死面积均显著增加(均P<0.05),心功能明显降低(P<0.05),而p-ERK无表达。相关分析显示大鼠心肌细胞CHOP表达、AI与p-ERK的表达呈负相关(P<0.01)。结论内源性H2S浓度的降低及内质网应激可能参与急性缺血心肌损伤的发生与发展,H2S对缺血损伤的心肌保护作用机制可能与其激活ERK进而抑制内质网应激诱导的心肌细胞凋亡有关。

硫化氢对大鼠心肌缺血/再灌注损伤的保护作用及其对c-Fos蛋白表达的影响(英文)

为探讨硫化氢(hydrogen sulfide,H2S)对大鼠心肌缺血/再灌注(ischemia/reperfusion,I/R)损伤的保护作用及机制,雄性Sprague-Dawley大鼠被随机分为对照组(假手术组)、I/R组、2.8μmol/kg体重NaHS干预组、14μmol/kg体重NaHS干预组。结扎冠状动脉前降支30min后,松扎再灌注60min,心电图II导联检测和TTC染色测定心肌梗死面积评价制作的心肌I/R模型;测定血浆中H2S浓度变化;监测血流动力学指标(LVSP,LV±dp/dtmax);HE染色和透射电镜观察心肌形态学改变;免疫组织化学方法测定心肌组织中c-Fos蛋白表达。结果显示:心肌I/R后血浆中H2S浓度明显低于对照组[(30.32±5.26)vs(58.28±7.86)μmol/L,P<0.05];2.8和14μmol/kg体重NaHS均可显著改善I/R引起的心功能改变,且14μmol/kg体重NaHS较2.8μmol/kg体重NaHS作用强;14μmol/kg体重NaHS明显减轻心肌形态学及超微结构损伤,同时降低大鼠I/R心肌组织中c-Fos蛋白表达(0.20±0.06vs0.32±0.10,P<0.05)。以上结果提示,H2S对大鼠心肌的I/R损伤有保护作用,这可能与其降低c-Fos蛋白表达有关。

寄生虫学教学中学生学习兴趣的培养

寄生虫学教学中,传统的教学方法以讲授为主,容易忽视学生学习的主动性和积极性。采取以问题为引导的"兴趣教学法",教学过程中灵活应用多媒体技术,能够激发学生的学习兴趣和求知欲望,有助于培养和提高学生在发现问题、分析问题和解决问题等方面的能力,从而提高教学效果。

硫化氢抗大鼠动脉粥样硬化作用研究

目的:探讨硫化氢(H2S)对大鼠动脉粥样硬化(AS)的作用及其机制。方法:体重(210±10)g的健康雄性SD大鼠125只,随机分为:对照组、AS模型组、AS+低剂量NaHS(2.8μmol/(kg.d))组、AS+中剂量NaHS(14μmol/(kg.d))组及AS+高剂量NaHS(28μmol/(kg.d))组。采用高脂饲料加大剂量VitD3注射复制大鼠AS模型。NaHS腹腔注射,连续用药12周。分别在喂养前及喂养后3、6、9、12周各处死动物。用生化分析仪检测血脂,去蛋白法检测血浆硫化氢,HE染色观察血管病理损伤程度及病变评分,免疫组化法检测血管组织中血管内皮生长因子(VEGF)的表达。结果:与相同时期的对照组相比,AS模型组在喂养后3、6、9、12周,血清甘油三脂(TG)和胆固醇(TC)均明显升高;主动脉病变评分从第6周到12周明显增加(P<0.01),并出现明显的动脉粥样硬化病变,表现为阳性区域的脂质斑块;血清H2S浓度明显降低,从喂养前的(44.98±2.06)μmol/L到第3、6、9、12周分别为(38.56±2.26),(32.96±2.38),(28.63±0.92),(23.55±0.92)μmol/L,并分别低于同时期各对照组的(44.72±0.85),(43.71±0.59),(41.96±0.97),(39.87±1.25)μmol/L(P<0.01);血管组织中VEGF的表达明显增强(P<0.01)。与模型组比较,低剂量NaHS组,各指标均无明显变化;中剂量NaHS组大鼠血清H2S含量于第6周开始明显高于模型组(36.13±0.73)vs(32.96±2.38)μmol/L,P<0.05;于9、12周时,分别为(33.07±1.14)vs(28.63±0.92)μmol/L,(30.16±0.62)vs(23.55±0.92)μmol/L,P<0.01;高剂量NaHS组大鼠血中H2S浓度于第3周开始到12周,分别为:(41.25±0.80),(38.71±0.46),(35.31±0.62),(33.38±0.78)μmol/L,均明显高于模型组(P<0.01);中、高剂量NaHS组血清TC均从第3周开始到12周明显降低(P<0.01),TG分别从第3、第6周开始到12周明显降低(P<0.05,P<0.01),血管组织病变评分与VEGF的表达均于第6周开始到12周明显降低(P<0.05)。相关分析显示血清中硫化氢的浓度与动脉粥样硬化的病变评分及血管VEGF的表达呈明显的负相关(r=-0.917,P<0.01,r=-0.885,P<0.01),而与血清甘油三脂和胆固醇之间无显著相关性。结论:动脉粥样硬化病变的形成与发展与内源性硫化氢的降低密切相关,补充外源性H2S可提高动脉粥样硬化大鼠血清中硫化氢浓度,减轻血管损伤程度,抑制VEGF的表达。

男性泌尿生殖道支原体感染标本采集研究

目的:探讨男性泌尿生殖道不同标本(尿道分泌物、前列腺液、精液)支原体检测结果的差异。方法:对初诊疑泌尿生殖道感染者412例,复查患者308例。分别取尿道分泌物、前列腺液、精液为标本进行支原体检测。结果:初诊412例中,尿道分泌物标本支原体阳性194例,占47.0%;前列腺液标本支原体阳性202例,占49.0%;精液标本支原体阳性214例,占51.9%;214例精液支原体阳性标本覆盖前列腺液标本阳性202例,覆盖尿道分泌物标本阳性194例。精液支原体阳性漏诊率为0,前列腺液漏诊率为5.6%,尿道分泌物漏诊率为9.3%。三个标本组两两间比较支原体阳性率及漏诊率无显著性差异。复查患者308例,尿道分泌物标本支原体阳性30例,占9.7%;前列腺液标本支原体阳性61例,占19.8%;精液标本支原体阳性77例,占25.0%。77例精液标本支原体阳性覆盖前列腺标本支原体阳性59例。漏诊2例;覆盖尿道分泌物标本支原体阳性30例;总阳性79例,精液标本支原体漏诊率2.5%(2/79),前列腺液标本支原体漏诊率22.8%(18/79),尿道分泌物标本支原体漏诊率62.0%(49/79)。前列腺液标本支原体阳性率与尿道分泌物标本支原体阳性率比较有显著性差异;精液标本支原体阳性率与前列腺液标本支原体阳性率比较无显著性差异;精液标本支原体阳性率与尿道分泌物标本支原体阳性率比较有显著性差异。标本组间两两比较漏诊率均有显著性差异。结论:精液标本覆盖面广,支原体培养标本应首选精液。

WPBL教学法在医学微生物学课程中的实践研究

以医学微生物课程为例,探讨网络环境下基于问题学习的教学模式WPBL(Web Problem-Based Learning)的实施效果。该方法在提高学生分析问题和协作解决问题能力方面优于传统教学方法。

面部蠕形螨感染与饮食习惯关系的研究

目的了解饮食习惯与蠕形螨感染的关系。方法以本科医学生为研究对象,采用透明胶纸挤粘法采集鼻唇沟及鼻尖部位蠕形螨,显微镜下检测虫体,发现成虫、幼虫或者虫卵均为阳性。结果 254名学生蠕形螨总感染率为18.50%,其中单一毛囊蠕形螨感染率为14.96%,占总感染数的80.85%;单一皮脂蠕形螨感染率为2.36%,占总感染数的12.77%;两种蠕形螨混合感染率为1.18%,占总感染数的6.38%。农村学生感染率为20.70%,城市学生感染率为10.71%,城市与农村学生感染率差异无统计学意义(P>0.05)。喜欢食用咸香辛辣食物者感染率为16.92%,不喜欢食用咸香辛辣食物者感染率为20.16%,两种饮食习惯者感染率差异无统计学意义(P>0.05)。结论人面部蠕形螨感染虫种主要是毛囊蠕形螨,蠕形螨感染与饮食习惯无关。

5种旋毛虫肌肉幼虫囊包玻片标本制作方法的比较

目的寻找快速、简便、有效的旋毛虫肌肉幼虫囊包玻片标本的制作方法。方法采用3种不同浓度醋酸卡红染色法、明矾卡红染色法、不染色共5种方法制作旋毛虫肌肉幼虫囊包玻片标本。结果 10%醋酸卡红染色速度快,囊包轮廓分明,囊内幼虫清晰透明;45%醋酸卡红原液稀释100倍染色,着色较淡,囊包和囊内幼虫清晰可见,且接近不染色。结论旋毛虫肌肉幼虫囊包永久性玻片标本的制作可采用10%醋酸卡红染色法或45%醋酸卡红原液释100倍染色法。

TRPC的激活机制研究现状

TRPC是TRP超家族中的一员,是一类对Ca2+通透的非选择性阳离子通道蛋白。TRPC通道可被各种化学性和物理性刺激(如神经递质、激素、温度和机械刺激等)所激活,激活机制相当复杂,一般认为是通过PKC-PLC-IP3或PKC-PLC-DAG途径激活,参与受体介导的Ca2+内流。也有证据表明,它可直接被钙库排空所激活,参与SOCE(store-operated calcium entry)。本文对TRPC激活机制的研究现状做一综述。

授课前医学生寄生虫病知识态度调查

目的:了解接受正规寄生虫学课程教育前医学生对寄生虫病知识的态度。方法:采取目的抽样法,以班级为单位抽取河南科技大学医学院2011级临床、护理、法医、检验专业的医学生612人,采用匿名问卷调查法对医学生寄生虫知识知晓情况、对待寄生虫病的态度以及授课建议进行调查。结果:共调查612人,有82.03%的学生知晓蛔虫,其次是绦虫;有30.88%的学生表示曾感染过蛔虫;有65.03%的学生知晓经口感染是寄生虫病的常见感染方式;53.10%的学生知晓生吃猪马牛羊肉可感染寄生虫病;74.51%的学生知晓饲养宠物可传播寄生虫病。98.86%的学生认为有必要学习寄生虫病知识。学生建议用多媒体上课、多看些真实的寄生虫图片、多看些视频科教片等。结论:授课前医学生对寄生虫病知识有一定的了解,绝大多数学生希望学习寄生虫病知识,教师可根据调查情况有针对性的对学生进行寄生虫学教学。

TRPC3在海人酸诱导的癫痫发作大鼠大脑皮质中表达上调

目的研究瞬时受体电位通道蛋白3(transient receptor potential canonical 3,TRPC3)在海人酸(kainic acid,KA)致痫大鼠大脑皮质中的表达变化,探讨其与癫痫发病的关系及意义。方法选取54只成年雄性SD大鼠随机分为对照组(NS组)18只和实验组(KA组)36只,实验组给予侧脑室注射KA 2μg/kg(7μL左右)制作KA致痫模型,对照组给予侧脑室注射等量生理盐水,观察记录大鼠癫痫发作的行为学表现。于癫痫发作后不同时间点(48h、72h)各取18只大鼠注射侧皮层脑组织,对照组于注射结束后48h取18只大鼠同侧皮层脑组织,用半定量RT-PCR、Western blot和免疫组织化学技术(均各6只)检测TRPC3的mRNA和蛋白的含量。结果对照组大鼠无癫痫发作,实验组大鼠于注射后5min左右出现典型痫性发作,达Ⅳ~Ⅴ级,持续数小时;实验组TRPC3的mRNA和蛋白表达水平在注射后48h和72h均较对照组显著增高(P<0.05),但实验组两个时间点之间差异无统计学意义。结论 TRPC3在致痫大鼠大脑皮质中的表达增加,其可能参与了癫痫的形成和发展。

农村小学语文课堂交流的有效性探索

当前农村教学设备缺乏、教学观念滞后、教育教学信息和资源总体水平不高的现实，如何提高农村小学语文教学的质量，是当前语文教学的重要课题。一、课堂交流的内涵传统课堂，以教师为主体，强调教师讲、学生听，忽视了学生的兴趣、爱好、需求和学习主动性。

硫化氢后处理对缺氧/复氧损伤心肌的保护及其机制

目的:探讨硫化氢(H2S)后处理对H9C2细胞缺氧/复氧损伤的保护作用及其机制。方法:细胞随机分为:正常对照组(con)、缺氧/复氧组(H/R)、NaHS后处理组(H/R+NaHS)、CSE阻断剂干预组(H/R+PAG)。倒置显微镜、流式细胞仪检测细胞凋亡;实时荧光定量PCR检测胱硫醚-!-裂解酶(CSE)mRNA表达;Western blotting检测p50ATF6、GRP78蛋白表达。结果:H/R组CSE mRNA表达较对照组明显降低(P<0.01);H/R+NaHS组CSE mRNA表达较H/R组明显升高(P<0.01)。H/R组p50ATF6、GRP78表达较对照组明显升高(P<0.01);NaHS后处理后p50ATF6和GRP78表达较H/R组升高(P<0.05);给予PAG后,p50ATF6、GRP78表达较H/R组降低(P<0.01)。结论:H2S后处理对H9C2细胞缺氧/复氧损伤具有保护作用,其机制可能与H2S可活化ATF6,上调GRP78表达,降低内质网应激有关。

生殖道支原体和衣原体感染对生育的影响及对18种抗菌药的耐药性

目的观察生殖道支原体和衣原体感染对生育的影响及耐药性。方法对482对不孕夫妇和164对已生育的健康夫妇进行衣原体检测和支原体培养及药敏试验,并对比2组检测结果的差异性。结果支原体和衣原体感染率,不孕组与对照组分别为52.9%,18.6%,差异有明显统计学意义(P<0.01)。18种常用抗菌药中,克拉霉素和强力霉素耐药率较低(4.1%,4.6%);氧氟沙星和红霉素耐药率较高(25.1%,20.6%)。结论生殖道支原体和衣原体感染与不孕不育存在密切相关性。支原体对常用抗生素存在不同程度的耐药性。

泌尿生殖道支原体感染及耐药性研究

目的了解解脲脲支原体(Uu)和人支原体(Mh)感染状况及耐药性,为临床合理用药提供可靠依据。方法对2042例疑为非淋菌性尿道(宫颈)炎患者的泌尿生殖道标本进行支原体培养及耐药性检测。结果支原体培养阳性881例(43.1%),单纯Uu感染650例(31.8%),单纯Mh感染74例(3.6%),Uu、Mh合并感染157例(7.6%);不同性别及不同年龄段人群支原体阳性率比较,差异有统计学意义(P<0.01),18种常用抗菌药物中,交沙霉素、多西环素和克拉霉素耐药率最低(3.6%、4.1%、4.2%),对氧氟沙星、氟罗沙星和甲砜霉素的耐药率较高(38.2%、18.3%、14.6%)。结论支原体感染呈明显上升趋势,支原体对常用抗菌药物存在不同程度的耐药性,加强对支原体的耐药性监测,对指导临床治疗有重要意义。

解脲脲支原体和沙眼衣原体感染对精液的影响

目的研究男性生殖道解脲脲支原体(Uu)和沙眼衣原体(Ct)感染对精液的影响。方法对228例不育患者和132例生育男性的精液进行Uu培养和Ct抗原检测,按检测结果分不育组和生育组,对两组精液量、精子密度、活率、活力、液化时间、正常形态率、畸形率、死亡率进行比较。结果不育组患者228例中Uu、Ct感染率75.9%明显高于生育组28.0%;不育组的精子密度、活率、活力、正常形态率明显低于生育组,差异有统计学意义(P<0.05);pH值、液化时间、死亡率、畸形率明显高于生育组,差异有统计学意义(P<0.05),而精液量两组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论生殖道Uu和Ct感染,对精液多项参数有影响,精液整体质量下降。

男性泌尿生殖道沙眼衣原体感染标本采集研究

沙眼衣原体是目前国内外最常见的性病病原体之一；其感染以后会产生一些严重的后遗症，在男性中会发生尿道炎、前列腺炎和附睾炎等。为探讨男性泌尿生殖道不同标本（尿道分泌物、前列腺液、精液）沙眼衣原体检测结果的差异，为临床检测标本的采集提供参考，我们于2007年1月-2008年6月对412例男性初诊患者及284例治疗后复查患者的不同标本进行了沙眼衣原体检测。

非淋茵性尿道炎患者家庭儿童支原体与衣原体感染状况及耐药性分析

为探讨非淋菌性尿道炎 （ non-gonococcal urethritis, NGU）患者家庭儿童泌尿生殖道支原体与衣原体感染状况及耐药情况，笔者对732户患者家庭中的812名儿童的泌尿生殖道标本进行了衣原体抗原检测、支原体培养及药敏试验，现将结果报告如下。一。

疑似非淋菌性尿道炎儿童泌尿生殖道支原体与衣原体感染状况及耐药性分析

目的了解疑似非淋菌性尿道炎（NGU）儿童泌尿生殖道支原体、衣原体感染状况及耐药情况，为临床合理用药提供参考。方法对146例疑为非淋菌性尿（阴）道炎患儿的泌尿生殖道标本进行支原体培养和衣原体抗原检测，同时对支原体培养阳性标本进行药敏试验。结果沙眼衣原体（Ct）阳性15例（10．3％）；支原体培养阳性82例（56．2％），其中解脲支原体（Uu）阳性58例（39．7％），人型支原体（Mh）阳性9例（6．2％），Uu＋Mh混合感染阳性15例（10．3％）；Uu＋Ct混合感染阳性4例（2．7％）。10种常用抗生素中，交沙霉素和白霉素耐药率较低（19．5％、22．O％），罗红霉素和阿奇霉素耐药率较高（41．5％、37．8％）。结论疑似NGU儿童支原体、衣原体感染率较高，支原体对常用抗生素存在不同程度的耐药性。体外药敏结果提示交沙霉素敏感性最高。

不孕不育夫妇生殖道支原体、衣原体感染状况及耐药性分析

目的了解不孕不育夫妇生殖道支原体和衣原体感染状况及耐药情况。方法对426对不孕不育夫妇(不孕不育组)和142对已生育的健康夫妇(正常对照组)进行衣原体抗原检测、支原体培养及药敏试验。结果不孕不育组支原体、衣原体感染率为60.1%(512/852)。男性感染率为53.5%(228/426),女性感染率为66.7%(284/426)。其中沙眼衣原体(Ct)阳性138例(16.2%),解脲支原体(Uu)阳性273例(32.1%),人型支原体(Mh)阳性45例(5.3%),Uu+Mh混合感染阳性12例(1.4%),Uu+Ct混合感染阳性16例(1.9%);对照组支原体、衣原体感染率为20.1%(57/284)。男性感染率为17.6%(25/142),女性感染率为22.5%(32/142)。其中沙眼衣原体(Ct)阳性16例(5.6%),解脲支原体(Uu)阳性27例(9.5%),人型支原体(Mh)阳性4例(1.4%),Uu+Mh混合感染阳性2例(0.7%),Uu+Ct混合感染阳性3例(1.1%)。两组间比较差异有显著性意义(P<0.01)。18种常用抗生素中,交沙霉素、强力霉素耐药率最低(3.3%、3.6%),对氧氟沙星、氟罗沙星的耐药率较高(37.5%、18.2%)。结论生殖道支原体和衣原体感染是造成不孕不育的主要原因之一,对于不孕不育夫妇应常规进行支原体和衣原体检查。支原体对常用抗生素的耐药问题比较严重,建议治疗前应先做药敏试验,无条件做药敏试验时,临床经验用药应首选交沙霉素和强力霉素。