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C2株蓝氏贾第鞭毛虫SUMO特异性蛋白酶基因的克隆、生物信息学分析及其催化活性区的原核表达
被引量:
1
1
作者
李少东
周英斌
+4 位作者
刘晓莉
禇晗
李思瑾
田喜凤
王洋
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第3期203-207,共5页
目的克隆C2株蓝氏贾第鞭毛虫(Giardia lamblia,简称贾第虫)的SUMO-Specific Protease(SENP)基因,并对其序列进行生物信息学分析,原核表达贾第虫SENP的催化活性区。方法提取C2株贾第虫基因组DNA,以基因组DNA为模板获得SENP编码区全长片段...
目的克隆C2株蓝氏贾第鞭毛虫(Giardia lamblia,简称贾第虫)的SUMO-Specific Protease(SENP)基因,并对其序列进行生物信息学分析,原核表达贾第虫SENP的催化活性区。方法提取C2株贾第虫基因组DNA,以基因组DNA为模板获得SENP编码区全长片段,连入克隆载体pGM-T,测序后进行生物信息学分析;根据分析结果克隆SENP的催化活性区,构建其原核表达载体pET-28a(+)-SENPc,在E.coli Rosetta(DE3)中诱导表达,SDS-PAGE及Western blot观察表达结果。结果成功克隆了C2株贾第虫SENP编码区全长序列,生物信息学分析显示C2株贾第虫SENP蛋白序列与WB株相同,二级结构以无规则卷曲为主,其催化活性区位于126-497aa,被一段插入序列分割成两个部分;构建了SENP催化活性区原核表达载体并在大肠杆菌中高效表达,在相对分子量约43kD的位置出现目的蛋白条带,与理论值相符。结论成功克隆了贾第虫SENP基因并原核表达了其催化活性区,为贾第虫SENP蛋白功能的研究提供了基础。
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关键词
蓝氏贾第鞭毛虫
SUMO特异性蛋白酶
原核表达
生物信息学
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职称材料
题名
C2株蓝氏贾第鞭毛虫SUMO特异性蛋白酶基因的克隆、生物信息学分析及其催化活性区的原核表达
被引量:
1
1
作者
李少东
周英斌
刘晓莉
禇晗
李思瑾
田喜凤
王洋
机构
河北联合大学生命科学学院
出处
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第3期203-207,共5页
基金
国家自然科学基金(No.31471954)
河北省青年科学基金(No.C2012401039)联合资助~~
文摘
目的克隆C2株蓝氏贾第鞭毛虫(Giardia lamblia,简称贾第虫)的SUMO-Specific Protease(SENP)基因,并对其序列进行生物信息学分析,原核表达贾第虫SENP的催化活性区。方法提取C2株贾第虫基因组DNA,以基因组DNA为模板获得SENP编码区全长片段,连入克隆载体pGM-T,测序后进行生物信息学分析;根据分析结果克隆SENP的催化活性区,构建其原核表达载体pET-28a(+)-SENPc,在E.coli Rosetta(DE3)中诱导表达,SDS-PAGE及Western blot观察表达结果。结果成功克隆了C2株贾第虫SENP编码区全长序列,生物信息学分析显示C2株贾第虫SENP蛋白序列与WB株相同,二级结构以无规则卷曲为主,其催化活性区位于126-497aa,被一段插入序列分割成两个部分;构建了SENP催化活性区原核表达载体并在大肠杆菌中高效表达,在相对分子量约43kD的位置出现目的蛋白条带,与理论值相符。结论成功克隆了贾第虫SENP基因并原核表达了其催化活性区,为贾第虫SENP蛋白功能的研究提供了基础。
关键词
蓝氏贾第鞭毛虫
SUMO特异性蛋白酶
原核表达
生物信息学
Keywords
Giardia lamblia
SUMO-specific protease
prokaryotic expression
bioinformatics
分类号
R382.21 [医药卫生—医学寄生虫学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
C2株蓝氏贾第鞭毛虫SUMO特异性蛋白酶基因的克隆、生物信息学分析及其催化活性区的原核表达
李少东
周英斌
刘晓莉
禇晗
李思瑾
田喜凤
王洋
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2015
1
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