绣球菌多糖的提取与抗氧化活性研究

采用微碱法提取绣球菌多糖,通过单因素分析和L9(34)正交试验探究提取温度、提取时间、pH值、料液比4个因素对多糖提取率的影响;同时利用体外邻苯三酚自氧化法和smirnoff法对多糖进行抗氧化活性的测定。微碱法提取绣球菌多糖的最佳提取工艺条件为提取温度60℃、提取时间2h、提取液pH值9、料液比为1∶30。此条件下的多糖提取率为1.7%。多糖在0.06mg·mL-1时对羟自由基清除率达到最大,为10.5%;在0.08mg·mL-1时对超氧阴离子自由基清除率达到最大,为21.5%。绣球菌有望成为天然的抗氧化药用真菌。

大豆SUMO系统相关基因定位及其与细菌性斑点病抗性关系

类泛素的小蛋白修饰(small ubiquitin-like modifier,SUMO)对植物抗病防御起重要作用。本研究利用生物信息学方法,确定了大豆SUMO系统6个相关基因。对细菌性斑点病抗病品种黑农37及感病品种合丰25接种处理后各基因表达变化进行实时定量分析。结果发现:抗病品种中,Gm SUMO2、Gm SCEa在叶中24h表达量最高,Gm SUMO3、Gm SCEb在叶中48h表达量最高,所以Gm SUMO2/3和Gm SCEa/b在大豆叶部抗病过程中起重要作用。Gm SAE2a在茎中48h的表达量高达6倍多,在茎部抗病过程中起主要作用。Gm ESD4e在抗病品种的根和叶中表达量快速下降,起着主要的去SUMO化作用。Gm ESD4a/e在感病品种接菌前期和后期分别在叶和根部相对表达量较高,主导感病品种叶和根部的去SUMO化作用,初步说明大豆SUMO系统与细菌性斑点病抗性相关。

大豆GmDRR与互作基因GmDIP1的亚细胞定位及原核表达

本实验室通过疫霉菌诱导大豆绥农10号后,获得差异表达蛋白点,通过序列拼接比对和分析,获得一个新的大豆GmDRR基因,并通过酵母双杂筛选文库的方式获得其互作基因GmDIP1。为进一步明确两个基因关系,对两个基因分别进行亚细胞定位和原核表达以及重组蛋白的纯化。GmDRR蛋白为外分泌蛋白,定位于细胞膜与细胞质中,GmDIP1基因定位于线粒体膜上,二者都成功进行了原核表达,从而获得了有表达功能和生物学活性的蛋白。