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一种改进的水稻成熟胚愈伤组织高效基因转化系统 被引量:28
1
作者 陈惠 赵原 种康 《植物学通报》 CSCD 北大核心 2008年第3期322-331,共10页
以成熟胚愈伤组织为材料的农杆菌介导水稻转化法虽已建立,但转化频率仍有待提高。本文以粳稻(Oryzasativa)品种(中花10号和中花11号)的成熟胚诱导的愈伤组织为受体材料,对组织培养体系及影响遗传转化的因素进行优化,建立了一套改进的农... 以成熟胚愈伤组织为材料的农杆菌介导水稻转化法虽已建立,但转化频率仍有待提高。本文以粳稻(Oryzasativa)品种(中花10号和中花11号)的成熟胚诱导的愈伤组织为受体材料,对组织培养体系及影响遗传转化的因素进行优化,建立了一套改进的农杆菌介导的水稻高效遗传转化系统。农杆菌菌株为EHA105,质粒载体是pUN1301/OsRAA1,其中含有标记基因GUS和筛选基因HPT。愈伤组织诱导培养基为NBD2(NB+2mg·L^(-1)2,4-D),继代培养基为NBD0.5,预分化与分化培养基为RE1(MS+1mg·L^(-1)6-BA+0.25mg·L^(-1)NAA+0.5mg·L^(-1)KT+0.2mg·L^(-1)ZT)和RE2(MS+1mg·L^(-1)6-BA+0.5mg·L^(-1)NAA+0.5mg·L^(-1)KT+0.2mg·L^(-1)ZT)。另外,还分析了影响T-DNA转移的多种因素,如外植体种类、愈伤组织预培养基和愈伤组织继代次数等。采用优化的转化程序,水稻愈伤组织转化率和植株转化率可达70%以上。 展开更多
关键词 农杆菌介导的遗传转化 成熟胚诱导的愈伤组织 水稻
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一种改进的构建杂交扣留cDNA文库的方法 被引量:4
2
作者 赵大中 陈民 +1 位作者 种康 谭克辉 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1998年第4期373-376,共4页
介绍了一种改进的利用减法杂交构建λ噬菌体cDNA文库的方法,该方法利用处理的scDNA减去两种对照的mRNA富集目的sscDNA并用磁珠法分离杂交单体,结果表明其增加了杂交单体的产量、简化了实验步骤,而且更有利于富集... 介绍了一种改进的利用减法杂交构建λ噬菌体cDNA文库的方法,该方法利用处理的scDNA减去两种对照的mRNA富集目的sscDNA并用磁珠法分离杂交单体,结果表明其增加了杂交单体的产量、简化了实验步骤,而且更有利于富集所需基因,是构建cDNA文库的一个有效改进. 展开更多
关键词 CDNA文库 磁珠 减法杂交 构建
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分析植物应答环境因子的一种有效平台——DNA微阵列(英文) 被引量:1
3
作者 王珍 种康 许智宏 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2005年第2期210-218,共9页
随着植物基因组测序工程的迅速发展 ,大量的DNA序列不断地快速对外公布。如何把这庞大的核苷酸序列信息与植物的生命活动有机地联系起来 ?高通量的DNA微阵列技术是连接植物基因组序列信息和植物功能基因组的桥梁 ;而且 ,这一技术在分析... 随着植物基因组测序工程的迅速发展 ,大量的DNA序列不断地快速对外公布。如何把这庞大的核苷酸序列信息与植物的生命活动有机地联系起来 ?高通量的DNA微阵列技术是连接植物基因组序列信息和植物功能基因组的桥梁 ;而且 ,这一技术在分析基因表达谱和基因的功能上已经得到了应用。通过简要叙述DNA微阵列技术的几个特点 。 展开更多
关键词 DNA微阵列 基因表达谱 信号网络 胁迫
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中国科学院院士 种康 生物育种锻造农业“芯片”
4
作者 扈永顺 种康 《瞭望》 2022年第3期14-16,共3页
我国在水稻分子模块设计育种技术方面优势明显,引领了国际育种发展方向。通过分子设计的方式改良水稻品种,使其遇到低温也一样能够存活,保持产量不受影响,这样既可以解决现有生产区域水稻稳产问题,又有可能在高纬度地区大面积种植水稻,... 我国在水稻分子模块设计育种技术方面优势明显,引领了国际育种发展方向。通过分子设计的方式改良水稻品种,使其遇到低温也一样能够存活,保持产量不受影响,这样既可以解决现有生产区域水稻稳产问题,又有可能在高纬度地区大面积种植水稻,为解决我国粮食安全问题提供保障。 展开更多
关键词 生物育种 中国科学院院士 高纬度地区 大面积种植 设计育种 区域水稻 分子模块 水稻品种
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2005年中国植物科学若干领域的重要研究进展 被引量:7
5
作者 种康 瞿礼嘉 +6 位作者 杨维才 王台 王小菁 袁明 许亦农 陈之端 蒋高明 《植物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期225-241,共17页
关键词 植物科学 中国 PROTEOMICS PLANT 生命科学领域 学术刊物 植物科研 科学家 科学研究 相关学科
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2004年中国植物科学若干领域研究进展 被引量:6
6
作者 种康 杨维才 +6 位作者 王台 瞿礼嘉 蒋高明 王小菁 许亦农 陈之端 于昕 《植物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期385-395,共11页
关键词 植物科学 2004年 研究进展 水稻基因组 中国 MOC1基因 NATURE 4号染色体 模式植物
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2006年中国植物科学若干领域重要研究进展 被引量:3
7
作者 种康 瞿礼嘉 +6 位作者 袁明 王小菁 杨维才 王台 许亦农 蒋高明 孔宏智 《植物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期253-271,共19页
在我国经济持续稳定发展的背景下,国家通过各种研究计划(如973计划、863项目、NSFC等)和国家知识创新体系等形式大力支持具有国家战略需求的基础研究,使植物科学研究飞速发展并受到国际同行的高度重视。体现在我国不少科学家担任国... 在我国经济持续稳定发展的背景下,国家通过各种研究计划(如973计划、863项目、NSFC等)和国家知识创新体系等形式大力支持具有国家战略需求的基础研究,使植物科学研究飞速发展并受到国际同行的高度重视。体现在我国不少科学家担任国际学术组织负责人或重要国际期刊编委,如许智宏院士担任国际植物组(The International Association for Plant Tissue Culture and Biotechnology,IAPTC & B;) 展开更多
关键词 植物科学 中国 持续稳定发展 知识创新体系 国际期刊 973计划 863项目 PLANT
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高等植物春化作用研究进展 被引量:48
8
作者 种康 雍伟东 谭克辉 《植物学通报》 CSCD 1999年第5期481-487,共7页
环境因子( 低温诱导或称春化作用) 在高等植物的生长发育调控中起着重要作用。本文就近年来春化作用诱导的开花启动研究领域中的进展从春化过程中的多步骤性、成花决定过程控制的多途径性、接受春化刺激的位置与分化启动的关系、以及... 环境因子( 低温诱导或称春化作用) 在高等植物的生长发育调控中起着重要作用。本文就近年来春化作用诱导的开花启动研究领域中的进展从春化过程中的多步骤性、成花决定过程控制的多途径性、接受春化刺激的位置与分化启动的关系、以及春化作用的分子机理等几个方面进行了简要综述。 展开更多
关键词 春化作用 开花 春化相关基因 高等植物
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外源Ca^(2+)对离体菠菜叶片衰老的影响 被引量:4
9
作者 种康 敬兰花 杨成德 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 1993年第3期179-185,共7页
以叶绿素、蛋白质含量为衰老指标,研究了Ca^(2+)在离体菠菜叶片衰老过程的效应。同时,采用同位素示踪技术研究了光照对离体菠菜叶片吸收,累积Ca^(2+)的影响;实验结果表明,0—10mmol/L Ca^(2+)能使菠菜叶片维持较高含量的叶绿素及各种蛋... 以叶绿素、蛋白质含量为衰老指标,研究了Ca^(2+)在离体菠菜叶片衰老过程的效应。同时,采用同位素示踪技术研究了光照对离体菠菜叶片吸收,累积Ca^(2+)的影响;实验结果表明,0—10mmol/L Ca^(2+)能使菠菜叶片维持较高含量的叶绿素及各种蛋白质组分。在光、暗条件下,叶片均能吸收外源Ca^(2+),而光照能促进叶片对Ca^(2+)的吸收,暗处理3天的叶片,尚能在分离的叶绿体组分中发现^(45)Ca^(2+),占叶片总放射强度的0.5%。 展开更多
关键词 菠菜 衰老 钙离子
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冬小麦春化相关基因cDNA(verc203)片段序列的分析 被引量:10
10
作者 种康 谭克辉 +1 位作者 黄华粱 梁厚果 《植物生理学报(0257-4829)》 CSCD 1997年第1期99-102,共4页
A vernalization-related gene cDNA clone (verc 203 ) from winter wheat was subeloned into restrichon enzyme sites of furnH 1 and Mind Ⅲ in PW19 plashed. The sequence of the cDNA insert was deterdrined using the method... A vernalization-related gene cDNA clone (verc 203 ) from winter wheat was subeloned into restrichon enzyme sites of furnH 1 and Mind Ⅲ in PW19 plashed. The sequence of the cDNA insert was deterdrined using the method of T7 sequencing for double strand DNA. The results showed that verc203 consisted of 195 base Pairs,and had 31 sites of restriction enzymes which were covered by 17 enzymes.Homological analysis of verc 203 and each gene sequence involved in EMBL(European Molecular Biology library )data was done in a computer with FASP method. It was found to be not homologous with verc 203 because the highest score in the 20 genes with highest scores is 42 only, far lower than 50 which is the lowest score as the standard of homology between sequences in the FASP method. On the basis of the results of homologlcal analysis for each gene in EMBL, we conclude that verc 203 may be the cDNA clone of a new gene in higher plants, and its function is related to vernalization in winter wheat. 展开更多
关键词 冬小麦 春化作用相关基因 CDNA克隆 序列分析
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聚合酶链反应(PCR)对未知序列DNA的扩增技术 被引量:3
11
作者 种康 谭克辉 +1 位作者 黄桦樑 徐乃正 《植物生理学通讯》 CSCD 1993年第2期116-118,123,共4页
<正> 聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction, PCR)是由引物介导,在体外将特异性DNA序列利用酶促作用进行扩增的方法。双链DNA热变性,然后在低温下与引物退火,再在中等温度下进行延伸,三步为一循环。一般经30~35次循环,很容易... <正> 聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction, PCR)是由引物介导,在体外将特异性DNA序列利用酶促作用进行扩增的方法。双链DNA热变性,然后在低温下与引物退火,再在中等温度下进行延伸,三步为一循环。一般经30~35次循环,很容易将目的基因或DNA片段特异地扩增至少10~6~10~7倍。它已是分子生物学研究中常用的、不可缺少的一项基本技术。但常规PCR需在待扩增的已知序列两端分别设计两个寡核苷酸引物。 展开更多
关键词 聚合酶链反应 DNA 扩增 序列
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增强化学发光基因检测技术 被引量:1
12
作者 种康 黄华棕 +1 位作者 桂进 谭克辉 《植物生理学通讯》 CSCD 1993年第5期368-370,共3页
增强化学发光基因检测技术(enhanced chemiluminescence,简称ECL)是目前最灵敏的非放射性核酸检测方法之一。其灵敏度可以满足多数杂交技术的需要(达pg水平),并且具有快速显示杂交结果(曝光1~5min)和对人无伤害、对环境不会造成污染等... 增强化学发光基因检测技术(enhanced chemiluminescence,简称ECL)是目前最灵敏的非放射性核酸检测方法之一。其灵敏度可以满足多数杂交技术的需要(达pg水平),并且具有快速显示杂交结果(曝光1~5min)和对人无伤害、对环境不会造成污染等独特优点。在分子生物学研究中有广泛的用途。根据我们应用ECL基因检测系统(amersham)情况,将这一技术介绍如下。 ECL检测系统的工作原理是在氧化剂存在时。 展开更多
关键词 增强化学发光 基因检测 植物学技术
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钙延缓黄瓜子叶衰老及其对RNase与活性氧清除有关酶活性的反应
13
作者 种康 孟延发 +1 位作者 敬兰花 杨成德 《兰州大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 1992年第2期151-156,共6页
在黄瓜子叶衰老期间外源 Ca^(2+)延缓内源结合 Ca^(2+)和总 Ca^(2+)含量的降低.Ca^(2+)处理5d的子叶,各亚细胞结构部分 RNase 活力均有明显的抑制效应,但不同亚细胞组分的反应程度不尽相同,线粒体对外源 Ca^(2+)处理最敏感,叶绿体则较迟... 在黄瓜子叶衰老期间外源 Ca^(2+)延缓内源结合 Ca^(2+)和总 Ca^(2+)含量的降低.Ca^(2+)处理5d的子叶,各亚细胞结构部分 RNase 活力均有明显的抑制效应,但不同亚细胞组分的反应程度不尽相同,线粒体对外源 Ca^(2+)处理最敏感,叶绿体则较迟钝,1mMCa^(2+)处理的子叶,SOD 活力高于对照47%.10mMCa^(2+)处理的子叶仅是对照的48%,Ca^(2+)对衰老过程中 SOD 活力作用可能与体内 Ca·CaM 系统有关.子叶衰老过程中过氧化物酶和过氧化氯酶活力均受到 Ca^(2+)的刺激.但 Ca^(2+)对过氧化氢酶活力刺激效应比过氧物酶小得多.上述结果表明,Ca^(2+)的作用可能与体内自由基清除有关的酶有关;外源 Ca^(2+)对暗诱导黄瓜子叶过氧化物酶作用通过释放胞壁以离子键结合的酶来完成. 展开更多
关键词 黄瓜子叶 衰老 核糖核酸酶
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小麦春化相关基因的分子克隆与功能分析
14
作者 种康 许智宏 谭克辉 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期56-56,共1页
Ver203 ,a gene related to vernalization in winter wheat was cloned by the strategy of differential screening and RACE PCR. Its function was investigated by antisense transformation in both wheat and Arabidopsis. A num... Ver203 ,a gene related to vernalization in winter wheat was cloned by the strategy of differential screening and RACE PCR. Its function was investigated by antisense transformation in both wheat and Arabidopsis. A number of transgenic plants were obtained and their response to vernalization treatment was characterized. For the plants in the 6 lines in which the antisense construct was expressed efficiently, flowering stage was significantly delayed. The developmental pattern of inflorescence was also changed in the transgenic plants of wheat and Arabidopsis . The upper spikes of transgenic plants were degenerated in wheat, and the florescence of transgenic plants became terminal flower in Arabidopsis . This suggests that the VER203 type of proteins may play an important role in floral initiation and flower development in winter wheat and Arabidopsis. 展开更多
关键词 小麦 基因 分子克隆
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植物发育调节基因克隆的研究
15
作者 种康 谭克辉 《生命的化学》 CAS CSCD 1993年第5期10-12,共3页
从分子生物学观点看,植物发育是指植物本身的遗传决定因子,在环境条件作用下,以一定的时空顺序不断地改变其表达方式,从而导致细胞分裂类型的改变,最终产生新的组织类型,也就是说,发育基因表达具有显著的发育阶段特异性和组织特异性。
关键词 植物 发育 调节基因 基因克隆
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高效毛细管电泳在DNA序列分析中的应用
16
作者 种康 《植物学通报》 CSCD 1995年第1期60-62,共3页
高效毛细管电泳在DNA序列分析中的应用种康(兰州大学化学系,兰州730000)APPLICATIONOFHIGH-PERFORMANCECAPILLARYELECTCTORHORESISONDNASEQUENCING... 高效毛细管电泳在DNA序列分析中的应用种康(兰州大学化学系,兰州730000)APPLICATIONOFHIGH-PERFORMANCECAPILLARYELECTCTORHORESISONDNASEQUENCING¥ChongKang(Depart... 展开更多
关键词 DNA 序列分析 高效毛细管电泳
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青蒿试管苗开花及用花器官为外植体诱导丛生芽生产青蒿素 被引量:23
17
作者 耿飒 叶和春 +2 位作者 李国凤 麻密 种康 《应用与环境生物学报》 CAS CSCD 2001年第3期201-206,共6页
将培养于MS培养基上 5wk的青蒿试管苗置于光周期 13 ,光强 6 0 0 0lx ,温度为 2 6℃ (昼 )和 2 2℃ (夜 )的条件下 ,成功地诱导其开花 .利用不同发育阶段的花蕾和花器官为外植体诱导丛生芽 ,发现不同浓度 (ρ)的 6 BA对丛生芽的诱导率... 将培养于MS培养基上 5wk的青蒿试管苗置于光周期 13 ,光强 6 0 0 0lx ,温度为 2 6℃ (昼 )和 2 2℃ (夜 )的条件下 ,成功地诱导其开花 .利用不同发育阶段的花蕾和花器官为外植体诱导丛生芽 ,发现不同浓度 (ρ)的 6 BA对丛生芽的诱导率和青蒿素的生物合成有重要影响 .结果表明 :以花蕾为外植体诱导丛生芽的最佳培养基是 :MS附加 4.0mgL-1的 6 BA和 0 .0 5mgL-1的NAA ;但当 ρ(6 BA)在 0~ 0 .5mgL-1之间时 ,有利于青蒿素的合成 ,ρ(6 BA) =0 .5 ~ 4mgL-1时抑制青蒿素的生物合成 .丛生芽中促进青蒿素合成的最佳 ρ(6 BA)为 0 .5mgL-1.用HPLC法测定发现用此法得到的丛生芽青蒿素的含量比直接利用叶片诱导的丛生芽青蒿素含量高 1倍 .图 5表 3参 2 展开更多
关键词 青蒿 外植体 丛生芽 青蒿素 试管苗 花器官 诱导
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特殊生境植物资源的开发和利用
18
作者 种康 邓馨 《生物产业技术》 2008年第6期39-43,共5页
植物资源是大自然赋予人类的宝贵财富。植物通过光合作用形成了自然界中95%以上的生物量,直接或间接地为人类提供了粮食、医药、能源、建筑材料和工业原料等生产生活资料;通过参与土壤形成和生态系统演化过程而对维护生态平衡和净化... 植物资源是大自然赋予人类的宝贵财富。植物通过光合作用形成了自然界中95%以上的生物量,直接或间接地为人类提供了粮食、医药、能源、建筑材料和工业原料等生产生活资料;通过参与土壤形成和生态系统演化过程而对维护生态平衡和净化环境起到至关重要的作用,因此对人类生存和发展具有重大意义。由于植物基本上是固定生长的,不能像动物和微生物那样在较大范围内移动, 展开更多
关键词 特殊生境 植物资源 基因资源 抗逆育种
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低温诱导的黄瓜ccr18基因的cDNA克隆及其表达特性分析 被引量:24
19
作者 国斌 许勇 +5 位作者 雍伟东 葛磊 王丽萍 张海英 王永健 种康 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 2001年第9期955-959,共5页
采用mRNA差异显示银染技术克隆得到在黄瓜 (CucumissativusL .)冷敏型品种“津研 4号”低温锻炼中特异表达基因的cDNA克隆 (ccr18) ,其大小为 6 39bp。在基因组中以单拷贝或低拷贝形式存在。Northernblot分析显示ccr18基因在 12、2 4、4... 采用mRNA差异显示银染技术克隆得到在黄瓜 (CucumissativusL .)冷敏型品种“津研 4号”低温锻炼中特异表达基因的cDNA克隆 (ccr18) ,其大小为 6 39bp。在基因组中以单拷贝或低拷贝形式存在。Northernblot分析显示ccr18基因在 12、2 4、48和 72h低温处理的黄瓜中表达 ,在 6h低温处理及对照中没有表达。这表明ccr18基因与黄瓜低温锻炼相关。序列同源性比较表明 ,它与拟南芥 (Arabidopsisthaliana)染色体ⅢBAC库中的F14P3基因组序列具有 88%的同源性。 展开更多
关键词 黄瓜 低温驯化 CDNA克隆 MRNA差异显示 ccr18 基因表达 抗寒性
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拟南芥室内培养技术 被引量:25
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作者 李俊华 张艳春 +2 位作者 徐云远 种康 王辉 《植物学通报》 CSCD 北大核心 2004年第2期201-204,共4页
本文报道了室内培养拟南芥的一些简便易行的改进技术。采用我们改进的营养土、蛭石、素沙混合培养介质和直播方式培养拟南芥, 并根据其生物学特性在温度、空气湿度、土壤水分和光照等方面给予适当管理,能培养出生长更健壮、更好地满足... 本文报道了室内培养拟南芥的一些简便易行的改进技术。采用我们改进的营养土、蛭石、素沙混合培养介质和直播方式培养拟南芥, 并根据其生物学特性在温度、空气湿度、土壤水分和光照等方面给予适当管理,能培养出生长更健壮、更好地满足实验要求的拟南芥植株。此外还介绍了播种、浇水、生育期调节、种子保存、病虫害防治和防混杂等环节的一些技巧措施。与其他培养方法相比,此法不仅简便、效果好,而且适合较简易的培养条件。 展开更多
关键词 拟南芥 室内培养 生物学特性 温度 空气湿度 土壤水分 光照 鼠耳芥
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