细菌性条斑病稻种带菌快速检测方法研究

建立15株分泌抗水稻细菌性条斑病(RBLS)特异性单克隆抗体(McAb)的杂交瘤细胞。对RBLS病菌呈阳性反应,与植物病原细菌5个属的其它检测菌株均无交叉反应。以酶联免疫吸附试验(ELISA)间接法对30份人工接种稻种进行检测,28份呈阳性反应,检出阳性率达93.3%;对46份病田稻种进行检测,36份呈阳性反应,10份呈阴性反应。取检测为阳性反应中的11份病田稻种的浸出液接种稻苗,有7份发病;而10份检测阴性反应的病田稻种浸出液的接种稻苗均无发病。该检测法灵敏度为0.0125—0.00125mg/ml(蛋白浓度)。

应用单克隆抗体检测稻种带水稻细菌性条斑病菌研究(简报)

水稻细菌性条斑病(Xanthomonas campestris PV. Oryzicola)是国内检疫病害。当前普遍推测此病通过带菌稻种传播蔓延。迄今尚无检测稻种带菌的有效方法。1986年以来,我们应用单克隆抗体特异性强、灵敏度高的特点,研究检测稻种携带细菌性条斑病原的方法。主要方法是:从新鲜病叶上分离、纯化水稻细菌性条斑病菌,然后用它免疫BAIA/C小白鼠,取其脾细胞和骨髓瘤细胞融合。然后对杂交瘤细胞进行筛选。

利用甘薯青枯病菌及其粗毒素测定甘薯品种抗瘟性的相关性研究

用甘薯青枯菌液及其粗毒素在温室内测定甘薯幼苗的抗病性 ,结果表明青枯菌菌株侵染甘薯幼苗的病情指数与其粗毒素的致萎度之间呈正相关 ,相关系数为 0 .945 8(n=88) ,达极显著水平 ;用 5个不同致病力 (强、中、弱 )甘薯青枯菌株及其粗毒素分别接种抗、中、感甘薯品种华北 48、广薯 15、惠红早 ,结果表明甘薯品种对不同致病力青枯病菌菌株及其粗毒素的抗性呈极显著正相关 ,相关系数在 0 .9992～ 1.0 0 0 0之间 ;以不同致病力甘薯青枯菌混合菌株及其粗毒素接种抗、中、感甘薯品种 97- 10、广薯 15、惠红早 ,结果表明不同抗性甘薯品种病情指数与致萎度之间也存在极显著正相关 ,相关系数为 0 .92 5 7～ 0 .96 5 1。说明在室内用粗毒素检测甘薯幼苗的致萎度 ,能够反映甘薯对甘薯瘟病的抗病或感病水平。

国外抗黄曲霉花生品种资源的引进鉴定研究

为筛选出籽粒和荚果表面均抗黄曲霉感染的花生品种资源， 采用福建省花生主产区分离得到的高毒、致病性强的 Ａ Ｆ０４１２２ （ Ａｆｌａｖｕｓ） 菌株， 分别对国外引进的 Ｉ Ｃ Ｇ Ｖ９１２８７ 等１１ 个抗黄曲霉花生品种进行籽粒和荚果表面接菌鉴定。试验结果： Ｉ Ｃ Ｇ Ｖ９１２８７、 Ｉ Ｃ Ｇ Ｖ９４４４９ Ａ 和 Ｉ Ｃ Ｇ Ｖ９４３７７ 等３ 个品种籽粒与荚果表面均抗黄曲霉感染； Ｉ Ｃ Ｇ Ｖ９４４４９ Ｂ、 Ｊ１１ 和坦３ 等３ 个品种籽粒表面抗黄曲霉感染； Ｉ Ｃ Ｇ Ｖ９３３６６ 和 Ｉ Ｃ Ｇ Ｖ９４４５５ 等２ 个品种荚果表面抗黄曲霉感染； Ｉ Ｃ Ｇ Ｖ９１２８４果、籽均为中抗； 其他均不抗。

甘薯青枯菌粗毒素测定甘薯品种抗瘟性的方法研究

用不同致病力的 372个甘薯青枯病菌株接种惠红早、惠仙薯、广薯 15、湘农黄皮、华北4 8、湘薯 75- 55等 6个鉴别品种 ,所得 2 2 32个病情指数数据经系统聚类分析结果 ,当 D为 0 .31时可将 6个鉴别品种分为抗、中、感 3类 ,即惠红早、惠仙薯为 S;广薯 15、湘农黄皮为 M;华北 4 8、湘薯 75- 55为 R。以不同致病力 (强、中、弱 )甘薯青枯菌混合菌株制备成粗毒素 ,用剪叶、针刺、喷雾、灌根等 4种接种方法测定 6个鉴别品种的抗瘟性 ,采用 L otusl- 2 - 3电脑软件 t测验法综合分析 4种接种方法对 6个鉴别品种致萎性的影响程度 ,检验结果表明 。

柑桔黄龙病亚洲种病原的PCR-SSCP分析

应用PCR-SSCP技术对采自我国柑桔主产区、泰国和法国留尼湾等8个不同地方的柑桔黄龙病亚洲种的病原(Candidatus Liberibacter astiaticus)进行研究。对引物P1、P2扩增的PCR产物进行SSCP分析,得到两条清晰且泳动速率一致的条带,表明不同地方柑桔黄龙病亚洲种病原扩增的DNA片段之间没有差异。

甘薯青枯菌的生理小种研究

从闽、粤、赣、江、浙５省甘薯青枯病区采集分离到的甘薯青枯菌株（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓｓｏｌａｎａｃｅａｒｕｍ）通过对寄主范围、浸润反应和黑色素形成的测定，结果表明，参试的６３个甘薯青枯菌株均能侵染烟草和多种茄科植物，但侵染力的大小因菌株间致病力的差异而不同，６３个菌株均不能侵染香蕉。参试的２６个菌株浸润烟叶２４～６０ｈ均能产生淡褐色至深褐色的坏死枯斑反应，浸润烟叶能力的大小各菌株间略有差异。参试的２６个菌株接种在含Ｌ一酪氨酸培养基上４８ｈ后就能产生黑色素，但不同菌株间产生黑色素能力有一定的差异。结果表明甘薯青枯菌应属于青枯菌生理小种１。

五个抗黄曲霉花生品种的生产力及田间抗性测定

1999年春季在福建省惠安、福清两花生主产区 ,对国外引进的 5个抗黄曲霉花生品种进行生产力及收获前籽粒田间 A.f lavus自然感染研究。结果表明 ,5个抗病品种的田间抗性表现与室内鉴定结果相一致 ,均表现为抗黄曲霉侵入。但产量均比我省当家品种泉花 1 0号显著减产 ,减产幅度为 2 9.8%～4 2 .7%。其中 ICGV91 2 87稳定性比对照种好 ,ICGV94 449A、 J1 1稳定性与对照种差异不显著 ,ICGV 94 449B、 ICGV94 3 77稳定性比对照种差。这 5个抗病品种不适宜在我省生产上直接利用 。

三种病原细菌产生细菌素的研究

测定来自不同地区的水稻细菌性条斑病、白叶枯病和柑桔溃疡病共92个菌株的细菌素产生能力,结果有34个菌株产生细菌素,占37％。其中有4个不同种的菌株间产生交叉抑制反应,抑菌晕圈直径为2-6mm。试验表明,产细菌素的菌株对其同种病原菌的抑制能力强于不同种病原菌。

水稻品种抗细菌性条斑病鉴定初报

近年来,随着南繁杂交种的调运,水稻细菌性条斑病(Xanthomonas Campestris PV·oryicola.下称细条病)在我国南方稻区迅速蔓延。据初步统计1987年我省水稻细条病发生面积已突破30万亩,而且继续蔓延,造成减产,一般在10～15％。为此,从1986年开始进行品种抗病性测定工作。旨在筛选出具有突出的抗细条病并兼抗稻瘟病、白叶枯病的品种,为育种部门提供抗源,做好优良品种的推广工作。

水稻细条病和白叶枯病的化学防治试验

鉴于水稻细条病和白叶枯病的病原菌属不同致病变种，为减少用药的盲目性，收集国内外５种农药，分别对其进行防治试验。平皿抑菌试验结果，４０％多丰农和９０％乙霜青对水稻细条病和白叶枯病病原菌产生抑菌作用，抑菌环宽度分别为１０ｍｍ和３ｍｍ。３ａ室内盆栽测定结果，多丰农对细条病和白叶枯病平均药效分别为６６．１９％和６６．２９％；乙霜青防治细条病效果为５７．７２％～６３．８５％，高于叶青双防效（４１．１４％～５４．３４％），差异显著；叶青双对白叶枯病的防效为６３．９０％～７４．５４％，高于乙霜青防效（４７．７０％～５７．４８％），差异显著；加瑞农和可杀得对水稻细条病和白叶枯病效果均差。１９９３～１９９４年田间小区试验结果，乙霜青防治细条病的防效比叶青双高出１７．４～３８．４个百分点。小区及示范结果表明，乙霜青是一种防治细条病的有效药剂，始病期（病指在５以下）施药，防效可达８０％以上。

福建产巴西蘑菇的营养成分

巴西蘑菇子实体干菇和鲜菇的水分、粗蛋白、粗脂肪、总醣、粗纤维和灰分含量分别为13.7％,36.8%,2.4％,40.2％,6.5％、7.4％和87.2％,5.78％,0.41％,3.34％,1.02％,0.81％。其干菇含水溶性多糖2.32％;含硫胺素0.32mg/100g,核黄素3.16mg/100g,烟酸18.9mg/100g,麦角甾醇117mg/100g;含钙、镁、磷、锌、铁、锰、铜等矿质元素146μg/g,1160μg/g,10mg/g,143μg/g,238μg/g,20.5μg/g和1.9μg/g。其全氨基酸总量为30.87％～32.03％,其中必需氨基酸占42.8％,脂肪酸构成以亚油酸(78.5％)和棕橺酸(13.1％)为主。

甘薯青枯菌粗毒素的制备及热、紫外线、酶对粗毒素生物活性的影响

将有致病力的甘薯青枯菌在液体肉汁胨培养基中２８～３０℃培养４８～７２ｈ，在无菌条件下经２０００ｒ／ｍｉｎ离心；取上清液再经过０．４５μｍ的细菌过滤膜过滤，获得甘薯青枯菌粗毒素（代谢产物）。粗毒素对热效应较为敏感，在５０℃下水浴１ｈ，生物活性不变；７０℃下水浴１ｈ，生物活性降低２８．７％；１００℃下水浴１ｈ，生物活性几乎完全丧失。粗毒素对紫外线不敏感，在２５Ｗ紫外光下照射３０ｍｉｎ、６０ｍｉｎ、１２０ｍｉｎ均不影响生物活性。粗毒素对蛋白酶和溶菌酶敏感，加入木瓜蛋白酶４～１６ｕ／ｍｌ或加入胰蛋白酶１０～４０ｕ／ｍｌ时生物活性均受破坏，丧失毒力；加入溶菌酶１５０００～６００００ｕ／ｍｌ时生物活性降低了９１．６％～９２．０％，几乎丧失了毒力。

水稻细菌性条斑病菌单克隆抗体的制备及特性

用7株水稻细菌性条斑病菌（Xanthomonas campestris pv.oryzicola）分别免疫BALB/C小白鼠。建立了15株分泌抗水稻细菌性条斑病菌特异性抗体的杂交瘤细胞株。杂交瘤细胞株的细胞染色体数范围为98—104。酶联免疫吸附试验（ELISA）培养液中的抗体滴度为102—103,腹水中抗体滴度105—106。这些单克隆抗体（McAb）的免疫球蛋白亚类分别属于IgG2a、IgG2b、IgG3和IgM。McAb与水稻细菌性条斑病菌发生特异性反应;与水稻白叶枯病菌（X.c.pv.oryzea）等黄单胞杆菌属的其它变种菌株无交叉反应;与植物病原细菌其它4个属的测定菌株无交叉反应;与稻叶、稻种上分离的杂菌也无交叉反应。

甘薯青枯病潜症苗的快速检测

建立6株分泌抗甘薯青枯病菌特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞。该单抗对甘薯青枯病菌以及可侵染甘薯的7个参试青枯病菌呈阳性反应;与参试的其它假单胞杆菌、其它属的检测菌株及著苗上的各种杂菌无交叉反应。ELISA法测定培养液抗体滴度为10~2—10~3;腹水抗体滴度为10~5—10~6。检出抗原灵敏度为每ml11.5μl蛋白。杂交瘤细胞及其培养液抗体保存3年以上均保持原有特性。6株单抗对我省分离的3个致病型的甘薯青枯病菌全部产生阳性反应,覆盖面广。ELISA间接法检测人工接种的潜症薯苗,可准确地检出带菌,检出率达100％。对119份病田无症苗进行检测,其中51份阳性反应,68份阴性反应。通过单抗检测与接种检测的比较试验,说明单抗检测的敏感性和特异性都高于接种法,同时快速简便。

福建省水稻白叶枯病和细条病比较研究

系统总结福建省水稻白叶枯病和细菌性条斑病的发生流行、分布为害、病区划分及防治对策，并比较其异同。白叶枯病主要发生在６０～７０年代；细条病则以８０～９０年代为主。品种抗性、菌源多寡、气候是否适宜，是决定病害流行的重要条件。病原菌蛋白质图谱测定，其相似系数越大的菌株致病性越相近。菌源除稻种、稻草、稻桩外，还存在于杂草寄主，白叶枯病菌的杂草寄主种类比细条病菌的多。常规稻抗白叶枯病的品种，一般也抗细条病；杂交稻抗白叶枯病的组合，一般不抗细条病。在药剂防治上，新农药乙霜青，对细条病药效较好，对白叶枯病效果较差。两病防治均以推广抗病品种为中心，杜绝菌源为基础，结合健稻栽培和及时药剂保护的综防控病为上策。

福建省水稻细菌性条斑病菌致病性分化研究

自1984年起,水稻细菌性条斑病（简称水稻细条病）在我省稻区迅速扩展蔓延,发生面积大,为害严重,成为我省晚稻主要病害之一.推广抗病良种是防治水稻细条病的经济有效措施;而水稻细条病菌系研究又是抗原亲本筛选、抗病品种选育和合理布局的重要基础工作。为此,我们开展了这项研究。材料和方法1.鉴别品种1985～1986年,对400多个水稻品种进行抗性测定,从中筛选出具有鉴别能力的水稻品种V64、010、龙广4号作为水稻细条病菌致病力强弱的鉴别品种。

水稻细菌性条斑病监测和防治对策

水稻细菌性条斑病是国内水稻重要检疫对象,发病后轻则影响产量1～2成,最严重的可引起塌圈枯死。该病1962年在龙海县首先发生,接着福清、长乐、闽侯、仙游等县相继发病。随着耕作制度的改革,品种的更换,病情发生逐年减轻,至70年代、几至匿迹。进入80年代,由于杂交稻的大面积推广、品种频繁南制,内检工作不严等原因,该病在龙海县重新抬头,1983年晚季大暴发,发病面积达13000多亩。1987年晚季仅仙游县发病面积达55000余亩。据统计,至1990年全省已有50余县发病,面积达55万亩。

水稻细菌性条斑病和白叶枯病杂草寄主比较研究

１９９１～１９９６年，采自福州、仙游、福清、闽清、长乐、莆田、闽侯、安溪、松溪等市县，不同病区的２１种杂草标样，经浓缩接种和单克隆抗体酶联免疫吸附试验测定结果：李氏禾、稗草、竹根草、看麦娘、茭白带细条病菌；李氏禾、双穗雀稗、看麦娘、茭白、稗草、千金子、马唐、狗牙根、芦苇带白叶枯病菌。带白叶枯病菌的杂草种类比细条病广。