miR-29b调节TET蛋白对脂肪来源的间充质干细胞成骨分化的影响

目的探讨在干细胞定向分化以及胚胎早期发育中,miRNA-29b对DNA去甲基化酶TET蛋白功能的调控机制。方法采用生物信息学的方法结合双荧光素酶报告基因检测进行体外验证获得靶miRNAs;通过受精卵显微注射进行体内验证;对脂肪来源的间充质干细胞(adipose-derived stromal cells,ASCs)定向分化,确认靶miRNAs对Tets基因的影响。结果小鼠Tet1、Tet2、Tet3基因都是miR-29abc的靶基因,且miR-29b抑制效率最高(P<0.05);通过CRISPR/Cas9技术突变,miR-29b能增强Tets的表达(P<0.05),并能显著促进ASCs向成骨细胞分化的效率(P<0.05)。结论 miR-29b可以下调Tets表达,并且下调miR-29b能显著促进间充质干细胞向成骨细胞分化的效率。