基于“治未病”理论探讨电针对DOR大鼠Th1/Th2免疫平衡的影响

目的基于“治未病”理论,探讨电针对雷公藤多苷诱导的卵巢储备功能减退(Diminished ovarian reserve,DOR)模型大鼠卵巢功能和Th1/Th2免疫平衡的影响。方法将27只动情周期正常的雌性SPF级SD大鼠随机分为空白组、模型组和电针组,每组9只。模型组和电针组采用雷公藤多苷片混悬液按50 mg·kg^(-1)·d^(-1)连续灌胃14 d,每日1次,空白组每日给予1次等体积的生理盐水灌胃,连续14 d。电针组大鼠在灌胃1 h后,进行电针干预,选取“中脘”“关元”或双侧“肾俞”穴,2组穴位隔日交替,每日1次,每次10 min,连续14 d。电针参数设置为2/100 Hz疏密波(疏波与密波交替持续的时间各约1.5 s),电流强度为1.0 mA。每日采用阴道脱落细胞涂片观察大鼠动情周期;干预结束后,采用HE染色观察卵巢组织学形态;ELISA检测大鼠血清FSH、E 2、IL-4、IFN-γ含量;免疫组化、Western blot和qPCR分别检测大鼠卵巢组织中T-bet、GATA3蛋白及mRNA的表达情况;流式细胞术检测大鼠脾脏Th1、Th2细胞比例并计算Th1/Th2比值。结果与空白组相比,模型组大鼠原始卵泡减少(P<0.05)、闭锁卵泡增加(P<0.01),卵巢指数、脾脏指数降低(P<0.01),血清FSH、IFN-γ水平升高(P<0.05),E 2、IL-4水平降低(P<0.05),卵巢组织中T-bet蛋白及mRNA表达增多(P<0.05),GATA3蛋白及mRNA表达减少(P<0.05,P<0.01),T-bet/GATA3比值升高(P<0.05),Th1细胞比例及Th1/Th2比值升高(P<0.01),Th2细胞比例降低(P<0.05);与模型组相比,电针组大鼠原始卵泡增多,闭锁卵泡减少(P<0.01),卵巢指数、脾脏指数升高(P<0.01),血清FSH、IFN-γ水平降低(P<0.01),E 2、IL-4水平升高(P<0.05,P<0.01),卵巢组织中T-bet蛋白及mRNA表达减少(P<0.05,P<0.01),GATA3蛋白及mRNA表达增多(P<0.05,P<0.01),T-bet/GATA3比值降低(P<0.01),Th1细胞比例及Th1/Th2比值降低(P<0.05,P<0.01),Th2细胞比例升高(P<0.05)。结论电针对DOR大鼠卵巢储备功能具有保护作用,能阻抑雷公藤多苷所致的卵巢功能损伤,其机制可能与调节Th1/Th2免疫平衡有关。