青光安Ⅱ号方有效组分对慢性高眼压DBA/2J小鼠视网膜神经节细胞的保护作用及机制

目的观察青光安Ⅱ号方及其低、中、高浓度有效组分对青光眼模型小鼠视网膜神经节细胞的保护作用机制。方法将8只雌性C57BL/6小鼠设为正常对照组(A组)并灌胃蒸馏水,48只38周龄雌性DBA/2J小鼠随机分成6组:模型组(B组)、益脉康分散片组(C组)、青光安Ⅱ号汤剂组(D组)、青光安Ⅱ号有效组分低浓度组(E组)、青光安Ⅱ号有效组分中浓度组(F组)、青光安Ⅱ号有效组分高浓度组(G组),分别灌胃蒸馏水、益脉康分散片混悬液、青光安Ⅱ号方汤剂、青光安Ⅱ号方有效组分低/中/高浓度汤剂。干预4周后,HE染色观察小鼠视网膜组织结构,TUNEL染色观察视网膜神经节细胞凋亡,免疫组化染色观察视网膜组织神经节细胞层糖原合酶激酶-3β(glycogen synthase kinase-3β,GSK-3β)、β-连环蛋白(β-Catenin)及同源盒基因-6(paired box gene-6,Pax6)表达情况,Western blot法测定视网膜组织GSK-3β、β-Catenin及Pax6蛋白相对表达量。结果眼压测量发现,DBA/2J小鼠眼压在26周及以后明显上升,从第14周开始DBA/2J小鼠眼压明显高于C57BL/6J组(P<0.05或P<0.01);A组小鼠视网膜各层组织结构清晰、完整、染色均匀、清晰可见3个核层,神经节细胞呈单层排列,比较连续无间断,细胞呈圆形或椭圆形;B组小鼠视网膜以神经节细胞层(ganglion cell layer,GCL)损伤最为明显,神经节细胞明显减少,连续性中断,胞内空泡样变性,核固缩;C组、D组、E组、F组、G组神经节细胞数目增多,胞内空泡样变性改变均有所改善。与A组比较,B组凋亡指数明显升高(P<0.01);与B组比较,C组、D组、E组、F组、G组凋亡指数均明显降低(P<0.01);与C组、D组比较,E组凋亡指数升高(P<0.05)。与A组比较,B组视网膜GSK-3β表达量明显升高(P<0.01),β-Catenin和Pax6表达量明显降低(P<0.01);与B组比较,C组、D组、E组、F组、G组GSK-3β表达量均明显降低(P<0.01),C组、D组、G组β-Catenin表达量均有升高(P<0.05或P<0.01),C组、D组、F组、G组Pax6表达量均有升高(P<0.05或P<0.01);与C组和D组比较,G组GSK-3β表达量降低(P<0.05),β-Catenin和Pax6表达量升高(P<0.01)。Western blot检测发现B组视网膜GSK-3β蛋白表达量明显升高(P<0.01),β-Catenin和Pax6蛋白表达量明显降低(P<0.01);与B组比较,C组、D组、E组、F组、G组GSK-3β蛋白表达量均明显降低(P<0.01),C组、D组、G组β-Catenin和Pax6蛋白表达量均有升高(P<0.05);与C组、D组比较,G组GSK-3β表达量降低(P<0.05),β-Catenin和Pax6表达量升高(P<0.01)。结论高浓度青光安Ⅱ号方有效组分能明显改善青光眼视网膜结构,抑制RGCs凋亡,抑制GSK-3β蛋白和促进β-Catenin、Pax6蛋白在视网膜中的表达,其作用可能与激活Wnt/β-Catenin/Pax6信号通路有关。

青光眼术后应用神经生长因子的疗效分析

目的:运用Meta分析方法对青光眼术后采用神经生长因子(NGF)治疗的疗效进行系统性评价。方法:按Cochrane系统评价方法,全面检索数据库,纳入2015-01/2019-02关于青光眼术后采用NGF治疗的随机对照研究,使用Revman 5.3统计软件进行资料提取与Meta分析。结果:共纳入6项随机对照研究,均为中文文献,共计患者513例。疗程结束后,其中5项研究进行了视力检测,6项研究进行了眼压检测,差异均无统计学意义[MD=0.10,95%CI(-0.05,0.25),P=0.19;MD=-0.90,95%CI(-1.92,0.11),P=0.08];5项研究进行了视野检测,3项研究进行了图像视觉诱发电位(VEP)检测(P100波潜伏期、P100波振幅),差异均有统计学意义[MD=-2.49,95%CI(-4.02,-0.96),P=0.001;MD=-12.13,95%CI(-17.30,-6.97),P<0.001;MD=1.34,95%CI(0.93,1.74),P<0.001]。结论:NGF对青光眼患者术后视力改善,眼压降低的效果不明显,但对改善视野、VEP P100波潜伏期、P100波振幅的作用明显,具有一定的治疗优势。

针灸治疗干眼的机制研究

从促进泪液蛋白分泌、调节激素水平、调节泪腺代谢、增加泪腺中乙酰胆碱(Ach)含量、调节血管活性肠肽5个方面对针灸在干眼患者及干眼兔模型的治疗机制研究方面进行综述,通过分析针灸治疗干眼的机制可以发现,无论是促进泪液蛋白分泌、调节泪液代谢及激素水平,还是调节血管活性肠肽(VIP)、增加泪腺中Ach的含量,最终都是达到促进泪腺分泌泪液从而缓解干眼症状的效果。目前针灸治疗干眼的机制研究仍有很多问题尚不明确,仍需借助现代科学方法行相关临床观察及动物实验进一步研究。

青光安Ⅱ号方及其有效组分对DBA/2J小鼠视网膜Ras、MEK及ERK蛋白表达的影响

目的观察青光安Ⅱ号方及其有效组分对DBA/2J小鼠视网膜细胞中Ras、MEK与ERK蛋白表达的影响,探讨其对视神经保护的作用机制。方法将8只雌性C57BL/6J小鼠作为正常对照组(A组),采用随机数字表法将48只雌性DBA/2J小鼠分为6组:模型组(B组)、阳性对照组(C组)、青光安Ⅱ号方汤剂组(D组)、青光安Ⅱ号方有效组分低剂量组(E组)、青光安Ⅱ号方有效组分中剂量组(F组)、青光安Ⅱ号方有效组分高剂量组(G组),每组8只。A、B组给予12.91 mL/(kg·d)蒸馏水;C组给予0.31 g/(kg·d)益脉康分散片;D组给予9.67 g/(kg·d)青光安Ⅱ号方汤剂;E、F、G组分别给予0.85、1.70、3.40 g/(kg·d)青光安Ⅱ号方有效组分。每4周进行眼压测量以及裂隙灯检查;灌胃4周后取视网膜组织行Western blot检测各组小鼠视网膜Ras、MEK与ERK蛋白的表达水平。结果C57BL/6J小鼠不同时相点的眼压不随年龄增长而变化(P>0.05);DBA/2J小鼠眼压在第18~38周高于C57BL/6J小鼠(P<0.05)。裂隙灯检查C57BL/6J小鼠眼前段均未见明显异常;DBA/2J小鼠随周龄增长逐渐出现角膜钙化、虹膜基质萎缩、瞳孔后粘连等眼前节病变。与A组比较,B组Ras、MEK、ERK蛋白表达水平均降低(P<0.05);与B组比较,C、D、E、F、G组Ras蛋白表达水平均升高(P<0.05),G组MEK、ERK蛋白表达水平均升高(P<0.05);与C组比较,G组Ras蛋白表达水平升高(P<0.05);与D组比较,G组MEK蛋白表达水平升高(P<0.05);与E、F组比较,G组Ras蛋白表达水平升高(P<0.05)。结论青光安Ⅱ号方及其有效组分低、中、高剂量对DBA/2J小鼠视网膜Ras、MEK、ERK蛋白可起到不同程度的上调作用,以青光安Ⅱ号方有效组分高剂量组效果最佳。

中医药治疗糖尿病视网膜病变光凝术后疗效的Meta分析

目的运用Meta分析方法系统评价中医药治疗糖尿病视网膜病变(diabetic retinopathy, DR)光凝术后疗效。方法检索Pubmed、Medline、Cochrane Library、维普期刊数据库、中国知网和万方数据库中的中医治疗糖尿病视网膜病变光凝术后的随机对照研究,由两名评价者独立提取资料并进行方法学质量评估,数据分析采用Rev Man5.3软件进行统计分析。结果共纳入10个随机对照研究,包括883例患者。中医药治疗DR光凝术后总疗效优于对照组[OR=3.77,95%CI(2.59,5.48),P<0.000 01];中医药治疗DR光凝术后消退黄斑水肿的疗效优于对照组[OR=4.05,95%CI(1.75,9.37),P=0.001];中医药治疗DR光凝术后减少眼底出血的疗效优于对照组[OR=3.58,95%CI(1.72,7.42),P=0.000 6]。结论中医药治疗有利于患者消退黄斑水肿和减少眼底出血,在治疗DR光凝术后总体疗效上更有优势。

散血明目片防控增殖性玻璃体视网膜病变的机制研究

目的观察散血明目片对兔外伤性增殖性玻璃体视网膜病变(proliferative vitreoretinopathy, PVR)模型中增殖信号通路相关蛋白PI3K、Akt、P38MAPK、MEK表达的影响,探讨散血明目片对兔外伤性PVR的防治作用。方法实验以42只新西兰大白兔为对象,采用巩膜穿通法联合向玻璃体腔注射富含血小板血浆形成PVR模型,随机分为7组,每组6只,分别为:A组空白组、B组模型组、C组散血明目片组、D组PD98059组、E组LY294002组、F组MK-2206组、G组抑制剂混合组。造模后30 min,D组、E组、F组、G组分别向玻璃体腔注射0.1 mL的PD98059、LY294002、MK-2206及3种混合抑制剂。B、C组则予以玻璃体腔内注射0.1 mL生理盐水。术后第1天C组予以散血明目片10 mg/kg溶液灌胃,除A组外其余组以生理盐水10 mL/kg灌胃,连续灌胃28 d。28 d后采用B超观察术眼玻璃体、眼底情况;取材后采用免疫组化法、RT-qPCR法对送检组织进行相关蛋白表达的测定。结果 B超结果显示散血明目片能抑制兔PVR中视网膜的增殖,维持视网膜正常形态。免疫组化与RT-qPCR检测结果显示,散血明目片能有效降低兔视网膜及增殖膜中PI3K、Akt、MEK、P38MAPK的表达,其中以下调PI3K、Akt、P38MAPK的表达更显著。结论散血明目片可抑制PVR的发生与发展,降低视网膜及增殖膜中相关增殖蛋白的表达,其防治PVR方面可能与MAPK、PI3K/Akt信号通路有关。

基于MAPK、PI3K/AKT信号通路探讨散血明目片防治增殖性玻璃体视网膜病变机制

目的:通过建立兔外伤性增殖性玻璃体视网膜病变(PVR)模型,观察散血明目片对其视网膜增殖膜中磷脂酰肌醇-3(PI3K)、蛋白激酶B(AKT)、丝裂原活化蛋白激酶(MEK)、丝裂原活化细胞信号调节激酶(P38MAPK)蛋白的表达影响。方法:将42只新西兰大白兔随机分为空白(A)组、模型(B)组、散血明目片(C)组、PD98059干预(D)组、LY294002干预(E)组、MK-2206干预(F)组、混合抑制剂干预(G)组,每组6只。造模后30min,向D、E、F、G组玻璃体腔内分别注射0.1mL PD98059、LY294002、MK-2206及3种混合抑制剂。B、C组则予以玻璃体腔内注射0.1mL 0.9%氯化钠溶液。术后第1天,C组予以散血明目片10mg/kg溶液灌胃,除A组其余组以0.9%氯化钠溶液10mL/kg灌胃,连续28d。造模后观察眼底情况,取材后光镜下观察视网膜各层的形态结构,Western Blot法检测各组视网膜增殖膜PI3K、AKT、MEK、P38MAPK蛋白的表达情况。结果:散血明目片能够抑制炎性细胞的增殖及浸润,减少增生。与A组比较,B、C、D、E、F组PI3K蛋白表达均显著升高(P<0.01,P<0.05);与B组比较,各给药组PI3K蛋白表达显著降低(P<0.01);与C组比较,D、E、F组PI3K蛋白表达显著升高(P<0.01)。与A组比较,B、D、E、F组AKT蛋白表达均显著升高(P<0.01);与B组比较,各给药组AKT蛋白表达均显著降低(P<0.01,P<0.05);与C组比较,D、E、F组AKT蛋白表达显著升高(P<0.01,P<0.05)。与A组比较,其余各组MEK蛋白表达均显著提高(P<0.01),与B组比较,各给药组MEK蛋白表达均显著降低(P<0.01,P<0.05);与C组比较,D、G组MEK蛋白表达显著降低(P<0.05),而E、F组MEK蛋白表达显著升高(P<0.01)。与A组比较,其余各组P38MAPK蛋白表达显著升高(P<0.01,P<0.05);与B组比较,各给药组P38MAPK蛋白表达均显著降低(P<0.01,P<0.05);与C组比较,D、E、F、G组P38MAPK蛋白表达均显著升高(P<0.01)。结论:散血明目片可以通过MAPK、PI3K/AKT信号通路降低PI3K、AKT、MEK、P38MAPK蛋白的表达,有效维持视网膜正常形态结构。

针刀松解联合续筋接骨液内服治疗肩袖损伤的临床观察

目的:观察针刀松解联合续筋接骨液内服治疗NeerⅡ期肩袖损伤的临床疗效。方法:选取60例肩袖损伤患者,随机分为治疗组和对照组各30例,对照组患者予续筋接骨液口服治疗,治疗组在对照组基础上采用针刀松解治疗,比较两组患者临床疗效。结果:治疗后两组VAS评分均下降,ROM评分及UCLA评分均上升,差异均有统计学意义(P<0.05),且治疗组患者治疗后VAS评分低于对照组,ROM评分及UCLA评分高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:针刀松解联合续筋接骨液内服治疗NeerⅡ期肩袖损伤有较好的疗效。