大肠杆菌全局调控蛋白CsrA中抑制十字花科黑腐病菌胞外蛋白酶活性所必需的氨基酸残基的鉴定

CsrA／RsmA蛋白家族是细菌中一类重要的转录后全局调控因子，它们调控细菌的碳代谢、次生代谢、运动、生物被膜形成以及致病等过程。CsrA／RsmA蛋白家族通常由60～72个氨基酸基组成，其中第1至第52位氨基酸高度保守，而第53位以后的氨基酸则高度可变。目前人们认为其氨基酸高度保守性是不同种属细菌CsrA／RsmA功能和作用机理相似的基础，但是其高度可变区与不同种属CsrA／RsmA蛋白功能差异的关系尚不清楚。我们之前的研究显示，大肠杆菌（Escherichiacoli）的CsrA（CsrAE删）蛋白的高度可变区（第53至第61位氨基酸残基）具有强烈的抑制十字花科黑腐病菌（XanthomonztscampeStr／spathovarcampestris，简称‰c）胞外蛋白酶活性的能力。本研究中，我们采用丙氨酸置换方法，确定了CsrA。蒯可变区中抑制xcc胞外蛋白酶活性必需的氨基酸残基。结果显示，CsrAE枷蛋白的第54位赖氨酸（K54）、第60位丝氨酸（S60）和第61位酪氨酸（Y61）置换成丙氨酸后，csrA‰。蛋白丧失了抑制Xcc胞外蛋白酶活性的能力；而其它位点的丙氨酸置换不影响其抑制Xcc胞外蛋白酶活性的能力。这个结果证明K54、S60和Y61是CsrAE.coli抑制Xcc胞外蛋白酶活性所必需的，为揭示大肠杆菌的CsrA。融蛋白抑制Xcc胞外蛋白酶活性的分子机理奠定基础。

声频刺激对大肠杆菌生物学特性的影响

[目的]初步研究复合声频刺激对大肠杆菌生物学特性的影响作用。[方法]采用自行研制的声频发生装置,以大肠杆菌为研究对象,进行声波刺激试验。[结果]结果表明,在固定声频的情况下,随着刺激强度的增加,大肠杆菌的繁殖速率、代谢活性显著增强,并最终呈现出一种"饱和"现象;但随着刺激强度的进一步增加,大肠杆菌的生长却表现为明显的抑制效应。在声频、刺激强度一定的情况下,大肠杆菌在不同培养底物上的生长特性也表现出明显差异,其中在LB液体培养基中被明显促进,而在BPY液体培养基中则表现为抑制效应。[结论]声波刺激对大肠杆菌的生长及代谢具有显著影响。