表皮生长因子对培养的气道上皮细胞抗臭氧损伤的保护作用

本研究观察到臭氧（Ｏ３）对体外培养经３Ｈ－ＵｄＲ标记的免气道上皮细胞有明显细胞毒性作用，且损伤程度与Ｏ３作用时间呈正相关。Ｏ３暴露组细胞内丙二醛（ＭＤＡ）产生增多（Ｐ＜０．０１），提示Ｏ３损伤细胞的机制与胞膜脂质过氧化有关。表皮生长因子（ＥＧＦ）可明显降低Ｏ３所致的３Ｈ释放率（Ｐ＜０．０１）、降低Ｏ３的细胞毒指数及细胞内ＭＤＡ含量（Ｐ＜０．０１），证明ＥＧＦ对气道上皮细胞有保护作用。进一步还观察到浓度为５ｎｇ／ｍｌ的ＥＯＦ可以取消Ｏ３所引起的细胞内还原型谷胱甘肽（ＧＳＨ）含量降低（Ｐ＜０．０１），并增加细胞内谷胱甘肽总含量（Ｐ＜０．０５），但不能改变Ｏ３所致的氧化型谷胱甘肽（ＧＳＳＧ）含量的增加（Ｐ＞０．０５），对ＧＳＨ／ＧＳＳＧ比值也无明显提高，这些都提示ＥＧＦ的细胞保护机理可能与其促进细胞内谷胱甘肽合成有关，而对ＧＳＳＧ转化为ＧＳＨ的还原过程影响不明显。

纤维连接蛋白或精甘天冬氨酸肽促进兔支气管上皮细胞NO合成

为验证细胞外基质成分纤维连接蛋白 (fibronectin ,Fn)对气道上皮细胞具有调控作用 ,本文用硝酸还原酶法测定了原代培养的兔支气管上皮细胞 (bronchialepithelialcells,BEC)的一氧化氮 (nitricoxide ,NO)释放 ,并测定了细胞内一氧化氮合酶 (nitricoxidesynthesase ,NOS)活性 ,观察纤维连接蛋白、精 甘 天冬氨酸肽 (Arg Gly Asppep tide ,RGD)处理的影响 ,设置臭氧攻击组为阳性对照。结果 :(1)臭氧攻击 2h后 ,NO释放增多 (P <0 0 1,n =7) ,Fn (15 μg/ml)也能增加NO释放 (P <0 0 1) ,并被钙调素抑制剂N (6 氨基己烷 ) 5 氯 1 萘酚 磺酰胺 (N (6 Amino hexyl) 5 chloro 1 naphthalene sulfonamide ,W7) (10 -5mol/L)所阻断 (P <0 0 1) ;(2 )Fn (5～ 2 0 μg/ml)及RGD (15～ 6 0μg/ml)均显示对NO释放量的剂量依赖性促进作用 (分别为r=0 85和r =0 89) ;(3)Fn (15 μg/ml)明显提高BEC的NOS活性 (P <0 0 1,n =7) ,此效应也能被W7阻断 (P <0 0 1)。Fn及RGD对NOS活性的上调有量 效关系 ,分别为r=0 93及r=0 90。结果提示 ,Fn及其特殊识别片段RGD肽与BEC整合素分子的结合 ,可上调细胞的NOS活性及NO释放 ,其效应发挥与钙调素途径有关。

基础医学整合式创新实验教学课程体系构建

基础医学实验教学涉及多个二级学科的理论和技术。医学教育国际化趋势要求学生具备跨学科综合思维和创造能力。在医学教育国际标准中国本土化试点班尝试构建了新的基础医学理论和实验教学课程体系,由学科基本知识与技能训练、跨学科器官系统综合实验、以问题为导向的探索设计性实验。为医学生创新能力培养提供了宽阔的空间。

整合素配体结合反应上调兔支气管上皮细胞抗氧化能力

支气管上皮细胞 (BECs)的抗氧化活性对于改善上皮的抗损伤能力、维持上皮结构和功能的完整性具有重要意义。BEC表达的整合素分子是细胞外基质成分如纤维连接蛋白 (Fn)的受体 ,与细胞的生长、分化、代谢调控有关。为论证整合素 配体结合反应对细胞抗氧化活性的影响 ,本实验用臭氧攻击培养的兔BEC ,观察用Fn或其特异性识别域片段RGD肽处理后细胞内谷胱甘肽过氧化物酶 (GSH Px)、超氧化物歧化酶 (SOD)、过氧化氢酶(catalase)三种抗氧化酶活性变化和谷胱甘肽 (GSH)含量的变化。结果 :(1)Fn及RGD肽均呈剂量依赖性地提高GSH Px活性 (分别为r=0 93和r=0 73) ,Fn的上调作用可被钙调素抑制剂W7逆转 ;(2 )Fn可提高SOD活性 ,但能被W7阻断 ;(3)Fn增加细胞的catalase活性 ,W7可取消这一效应 ;(4 )Fn和RGD肽处理增加细胞内GSH含量 ,且有量 效关系 (相关系数r分别为 0 82和 0 84)。以上结果提示 ,细胞外基质与整合素结合可增强细胞的抗氧化酶活性 ,增加GSH含量 。

支气管上皮细胞在气道高反应中的作用(英文)

气道高反应的发病机制目前仍然不清楚,但大多数人认同是气道的一种慢性炎症。近十年来,上皮缺陷学说逐渐成为解释气道高反应机制的主流观点。气道上皮不再被仅仅看作为单纯的机械屏障,而是机体内环境与外部环境相互作用的界面。气道上皮具有广泛的生理作用,包括抗氧化、内分泌和外分泌、黏液运输、生物代谢、结构性黏附、损伤修复、应激或炎症信号传递、抗原递呈作用等。借助这些生理作用,支气管上皮细胞在气道局部微环境稳态维持中发挥重要作用。有理由相信,气道上皮的结构完整性缺陷或功能紊乱是哮喘和慢性阻塞性肺疾病等气道高反应性疾病的启动环节。

血管活性肠肽、表皮生长因子上调支气管上皮细胞bcl-2基因表达

为探索肺内调节肽血管活性肠肽（ＶＩＰ） 和表皮生长因子（ＥＧＦ） 抗氧化保护的基因机制， 用逆转录聚合酶链式反应（ＲＴＰＣＲ） 及Ｓｏｕｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ 杂交等方法检测原代培养的兔支气管上皮细胞（ＢＥＣ） 内ｂｃｌ２ 和ｃｍｙｃ 基因的表达情况， 观察ＶＩＰ、ＥＧＦ及热应激对这两个基因表达的影响。结果显示：（１） 基础情况下ＢＥＣ内有ｂｃｌ２ 和ｃｍｙｃ 基因的低水平表达；（２） ＥＧＦ和ＶＩＰ均明显增强ｂｃｌ２ 和ｃｍｙｃ 的转录，ＥＧＦ的作用更强， 而热应激无明显效应；（３） ｂｃｌ２ 和ｃｍｙｃ 两者的转录有显著相关性。上述结果提示，ＶＩＰ和ＥＧＦ等肺内调节肽可通过上调ｂｃｌ２ 基因表达增强支气管上皮细胞的抗氧化能力；ｃｍｙｃ 基因的编码产物可能是ｂｃｌ２ 基因转录的上游调节因子。

血管活性肠肽对兔支气管上皮细胞抗臭氧损伤的保护作用

用支气管刷洗法收集新西兰兔支气管上皮细胞（ＢＥＣ），以臭氧（Ｏ３）攻击培养的ＢＥＣ，建立细胞损伤模型。测定ＢＥＣ的３Ｈ释放率计算Ｏ３的细胞毒指数（ＣＩ）、测定细胞内丙二醛（ＭＤＡ）的含量反映细胞氧化性损伤的程度，测定细胞内过氧化氢酶（ＣＡＴ）活性及还原型和氧化型谷胱甘肽（ＧＳＨ和ＧＳＳＧ）的含量反映细胞抗氧化能力。观察血管活性肠肽（ＶＩＰ）预处理对ＢＥＣ的细胞保护作用并初步探讨其保护机制。观察到：ＢＥＣ的３Ｈ释放率与Ｏ３暴露时间成正比；Ｏ３暴露２ｈ使ＭＤＡ含量和ＧＳＳＧ含量明显增加，ＧＳＨ减少；ＶＩＰ预处理呈剂量依赖性降低Ｏ３暴露的ＣＩ值、降低ＭＤＡ和ＧＳＳＧ含量、增加ＧＳＨ及ＧＳＨ／ＧＳＳＧ比值、增加ＣＡＴ活性，显示出细胞保护效应；ＶＩＰ的保护效应可被放线菌素Ｄ（Ａ－Ｄ）或蛋白激酶Ｃ阻断剂Ｈ７部分取消。结果表明：Ｏ３暴露会导致ＢＥＣ损伤，ＶＩＰ可通过增强ＢＥＣ的抗氧化能力而保护ＢＥＣ，ＶＩＰ的信号在细胞内的转导途径与基因转录及依赖ＰＫＣ的酶蛋白磷酸化有关。

大鼠肺泡巨噬细胞的前列腺素分泌

肺泡巨噬细胞(AM)除有吞噬、溶菌等防御功能外,还参与许多调节活动,如抑制肺纤维化,免疫调控,气道阻力调节等。近年来注意到AM这些功能的发挥与前列腺素(PG)有关。本研究拟观察大鼠AM分泌某些PG的动态变化及其特点,以期为探讨AM的功能提供参考。 1 材料和方法 1.1 AM培养上清液制备 健康Wistar大鼠,体重150g左右,雌雄不拘。洗肺法收集AM,台盼蓝排斥法计数存活率在92％以上。

热应激对支气管上皮细胞的抗臭氧细胞保护作用

本研究在臭氧（Ｏ３）对培养的兔支气管上皮细胞损伤模型上观察了热应激处理对支气管上皮细胞抗Ｏ３损伤的保护效应，并初步探讨其机制。结果表明，４２℃热应激处理３０ｍｉｎ可明显降低Ｏ３攻击下的细胞毒指数（ＣＩ）及细胞内ＭＤＡ含量，表示热应激对支气管上皮细胞具有细胞保护作用。进一步观察表明，热应激预处理可增加细胞内还原型谷胱甘肽（ＧＳＨ）含量、降低氧化型谷胱甘肽（ＧＳＳＧ）含量、增加ＧＳＨ／ＧＳＳＧ比值，并能增加两型谷胱甘肽的总量。结果提示热应激的细胞保护作用机理可能与其增加从谷胱甘肽合成及增强谷胱甘肽还原酶活性，提高细胞自身的内源性抗氧化能力有关。

肺泡巨噬细胞对豚鼠气道平滑肌张力的调控

经调理酵母多糖(OPZ)刺激的大鼠肺泡巨噬细胞培养上清液可松弛豚鼠离体气管肌条,上清液中PGE_1增加,表明PGE_1是肺泡巨噬细胞松弛气管肌条的介质之一。经OPZ激活的肺泡巨噬细胞培养上清液与豚鼠血小板作用后,其松弛效应被逆转为收缩效应,提示可能由于肺泡巨噬细胞分泌血小板活化因子激活血小板,使释放收缩介质所致。肺泡巨噬细胞借助所分泌的介质经常性地调节气道阻力,对肺通气具有保护意义。

气道平滑肌收缩性能的细胞内调控

气道平滑肌(ASM)的缩舒主要调节气道的口径,反映其收缩性能的指标以最大缩短能力(△Lmax)最有意义,其次是最大缩短速度(Vmax)。研究ASM收缩性能及其调控机制对于探讨哮喘发病机理有重要意义。一。

综合性大学基础医学教育中心化实验教学平台的建设与思索

综合性大学基础医学实验教学中心的建设仍面临许多问题.为探讨实验教学中心建设和发展的规律,文章结合3个校级实验中心的实践,从实验中心定位、实验中心与学科建设或课程建设的关系、如何提高中心自身发展能力三个方面对医学基础课实验教学中心的建设和管理进行了探索和讨论.提出了要以课程建设的思想提高实验教学中心的自身发展能力这一命题.

临床医学基础强化班介绍

大部分医学生毕业后不愿意从事基础医学工作,主动报考基础医学专业研究生的人数呈快速递减之势、生源质量不断下滑,导致基础医学人才储备严重不足,已成为制约我国基础医学可持续发展的重要瓶颈。为此,从2009年开始,尝试在五年制临床医学专业学生中开办基础医学强化班,以提高学生对基础医学的兴趣,选拔培养有潜力的学生将来从事基础医学教学与研究。强化班已持续开办4届,现就其培养目标、管理模式、特色课程以及办班进展情况进行探讨。

气道上皮细胞的抗氧化损伤保护及微环境调控

本工作建立了臭氧对原代培养的兔支气管上皮细胞（ＢＥＣ）损伤模型，观察到血管活性肠肽（ＶＩＰ）、表皮生长因子（ＥＧＦ）、热应激等微环境理化因子可减轻细胞损伤，具有细胞保护作用。其保护机制与提高还原型谷胱甘肽（ＧＳＨ）含量有关，并依赖于蛋白激酶的磷酸化调节及基因转录。ＢＥＣ细胞在基础情况下有ｂｃｌ２基因的低水平表达，ＶＩＰ和ＥＧＦ可促进ｂｃｌ２基因转录，增强ＢＥＣ的抗氧化损伤能力。ＥＧＦ或热应激促进ＢＥＣ自分泌ＶＩＰ，并上调ＢＥＣ表达ＶＩＰ受体（ＶＩＰＲ），可放大ＶＩＰ的局部保护效应。论证了气道上皮存在抗损伤自我保护机制，受到局部微环境中调节肽及外源性刺激的适应性调控。

基于浏览器模式的人体生理学机能实验系统的设计与实现

本文分析了国内医学院校人体生理实验教学的现状和改革方向,说明了人体生理实验是中国机能实验教学改革的一个发展方向。然后介绍了人体生理实验设备的设计思想和原理,最后介绍了一种基于浏览器方式的可实际运用与教学的人体生理学机能实验系统。

解读《基础医学实验教学基本要求的行业共识》

为适应医学教育的变革和培养目标、凝练国家级实验教学示范中心建设成果和经验,示范中心联席会基础医学学科组组织了来自全国40多所本科医学院校的60多名教师讨论制订了《基础医学实验教学基本要求的行业共识》。基础医学实验教学基本要求以培养目标和医学生需求为出发点,在实验教学课程整合的基础上,在解剖学、形态学、机能学、生化及分子生物学、病原生物学与免疫、虚拟仿真实验六个版块展开知识、技能要点的最低教学要求。这是中国医学教育第一个以需求侧为目标对供给侧提出的基本要求的行业共识,将对全国基础医学实验教学和实验室建设产生规范化指导性影响,形成了基础医学实验教学行业标准的中国声音。

肺内调节肽对兔支气管上皮细胞分泌白介素的影响

为探讨肺内调节肽对支气管上皮细胞 (bronchialepithelialcells ,BECs)分泌功能的影响 ,实验观察了兔BECs在未受应激与臭氧应激两种条件下白细胞介素 (interleukin ,ILs)的分泌。结果发现 :血管活性肠肽 (vasoactiveintestinalpeptide ,VIP)对未受应激BECs存在抑制作用 ,并使臭氧应激BECs分泌ILs下降 ;表皮生长因子 (epidermalgrowthfactor,EGF)使未受应激BECsIL 1、IL 8分泌增加 ,使臭氧应激的BECsILs分泌降低 ;内皮素 1(endothelin 1,ET 1)、降钙素基因相关肽 (calcitoningene relatedpeptide ,CGRP)可使未受应激的BECs分泌ILs增加 ,CGRP还可使臭氧应激的BECsILs分泌增加。结果提示 :肺内调节肽可调控BECsILs的分泌 。

医学机能学国家级实验教学示范中心的建设与发展

为了加快实验教学改革和实验室建设,促进优质资源整合和共享,全面推进素质教育、培养有创新精神和实践能力的高素质医学人才,该文从中心的建设思路、建设手段和建设成果等方面作了重点介绍。

肺内调节肽对支气管上皮细胞ICAM-1表达及NF-κB活性的调控(英文)

细胞间粘附分子 1(ICAM 1)是介导细胞与细胞之间粘附的重要生物分子 ;核因子 κB (NF κB)是体内普遍存在、能迅速对刺激产生反应的重要核转录因子。越来越多的证据显示 ,ICAM 1表达与NF κB激活是炎症反应的重要步骤。我们应用免疫组化、RT PCR、凝胶阻滞电泳 (EMSA)等多种实验方法 ,观察了肺内调节肽对支气管上皮细胞ICAM 1表达及NF κB活性的影响 ,以及NF κB抑制剂MG 13 2对ICAM 1表达的影响。实验结果发现 ,VIP、EGF可使臭氧应激BECs的ICAM 1表达降低 ;ET 1、CGRP可使未受应激BECs的ICAM 1表达增加。NF κB抑制剂MG 13 2可阻断O3、ET 1、CGRP引起的ICAM 1表达 ,提示NF κB在调控ICAM 1表达中起重要作用。EM SA结果显示 ,BECs中NF κB在臭氧应激下反复激活 ,CGRP与ET 1可促进NF κB的激活 ;VIP与EGF可抑制臭氧应激的BECs中NF κB的激活。以上结果说明 ,VIP、EGF可通过下调ICAM 1转录及NF κB激活减轻炎症反应 ,而ET 1、CGRP可通过上调ICAM 1转录及NF κB激活、加大炎症反应。ICAM 1与NF