血清IGF-1水平及癌组织VEGF表达在结肠癌患者诊断和治疗中的临床意义

目的探讨血清中胰岛素样生长因子-1(IGF-1)水平及癌组织中血管内皮生长因子(VEGF)表达在结肠癌的诊断和治疗中的临床意义。方法选择处于不同Dukes分期的结肠癌患者80例,并以同期因外伤而切除正常结肠组织的患者20例作为对照组,采用双位点免疫放射测定法和免疫组化法检测患者在结肠癌手术前后血清中IGF-1水平和癌组织中VEGF表达水平,并与对照组进行对比。结果 Dukes各期结肠癌患者手术前后血清IGF-1水平均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);各期结肠癌患者术前血清IGF-1水平高于术后水平,差异有统计学意义(P<0.05)。结肠癌组VEGF弱阳性和阳性患者比例明显高于对照组,差异有统计学差异(P<0.01)。结论血清IGF-1水平和VEGF表达水平与结肠癌的发病密切相关,有望作为结肠癌发生、发展的预测指标及手术疗效的评价指标。

肝X受体在人进展性结直肠腺瘤-腺癌的表达差异

目的探讨肝X受体（LXRs）在不同部位的结直肠腺瘤向癌转变过程中的表达变化。方法通过内镜下治疗和手术采集结直肠正常黏膜、腺瘤和腺癌组织，采用定量一聚合酶链反应RT—PCR分析LXRs（包括LX胁和LxRB）的表达情况。结果正常结直肠黏膜中LxR鲫1RNA表达量极低，而LXRβmRNA表达量是LXRa的42-55，两者在管状腺瘤和腺癌组织中的表达量均显著下降（P〈0．05）。结论LXRs可能在腺瘤向腺癌转化过程中起抑制作用。

肝X受体激动剂GW3965对人结肠癌细胞增殖的抑制作用

目的：探讨激活肝X受体（liver X receptors,LXRs）对人结肠癌细胞增殖的影响。方法：采用实时定量聚合酶链反应检测人结肠癌细胞HCT116和Lovo中LXRα和LXRβ的mRNA表达;LXRs激动剂GW3965分别处理2种细胞后,以CCK-8法检测细胞生长曲线的变化,流式细胞仪检测细胞增殖周期的变化,蛋白印迹法检测AMPK、mTOR和p70S6K蛋白及相应磷酸化蛋白的表达变化。结果 ：设定LXRαmRNA在HCT116细胞的表达水平为1,LXRβmRNA在HCT116和Lovo细胞中的相对表达量分别是LXRαmRNA在HCT116细胞表达水平的3.1倍和4.6倍。经10μmol/L和20μmol/L的GW3965处理48 h及72 h后,2种结肠癌细胞的生长都受到明显抑制（P〈0.05）;相应G1-G0期细胞百分比显著增多,而S期细胞百分比明显减少（P〈0.01）;磷酸化AMPK蛋白（p-AMPK）的表达水平在HCT116和Lovo细胞中分别上升了2.97倍和3.48倍（P〈0.05）;p-mTOR和p-p70S6K在HCT116细胞中的表达分别下降了33.14%和38.44%,在Lovo细胞中的表达分别下降了51.68%和31.52%（P〈0.05）。结论：激活LXRs可通过干预细胞周期和AMPK-mTOR-S6K信号通路抑制结肠癌细胞增殖。

雌激素受体β通过调节AMPK/mTORC1轴的作用诱导结肠癌细胞自噬

目的:探讨雌激素受体(ER)β诱导结肠癌细胞自噬的作用机制。方法:将ERβ质粒转染人结肠癌细胞株HCT116(p53野生型)和SW480(p53突变型)后,通过荧光显微镜观察自噬现象;采用蛋白印迹法检测LC3-Ⅱ蛋白、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、AMPK和p70S6K蛋白及相应磷酸化蛋白的表达变化;应用实时定量PCR法检测DRAM1、Sestrin1和Sestrin2的mRNA表达变化。结果:ERβ过表达能促进HCT116和SW480细胞发生自噬;LC3-Ⅱ和p-AMPK蛋白在HCT116细胞中分别上调了2.81倍和1.80倍(P<0.05);在SW480细胞中分别上调了1.70倍和2.48倍(P<0.05)。p-mTOR和p-p70S6K蛋白的表达水平在HCT116细胞中分别下降了29.52%和34.54%,在SW480细胞中分别下降37.89%和41.86%。除了Sestrin1 mRNA在SW480细胞中的表达无变化外,DRAM1和Sestrin2 mRNA的表达量在2种细胞中均显著上调(P<0.05)。结论:ERβ可通过对AMPK/mTORC1轴的调节作用诱导结肠癌细胞发生自噬。