核因子相关因子2参与间充质干细胞调节大鼠梗死心肌氧化应激作用

目的探讨间充质干细胞(MSC)移植对梗死心肌组织氧化应激反应的调节作用及其作用机制。方法清洁级雄性Spragye-Dawley(SD)大鼠60只,建立心肌梗死大鼠模型,按随机数字表随机分入对照组、MSC移植组和MSC移植+血红素氧化酶1(HO-1)抑制剂组,每组20只。以密度梯度离心并贴壁培养获得骨髓源MSC,于心肌梗死模型建立后经心肌局部多点注射MSC悬液。在细胞移植后不同时间点测定心肌梗死和梗死交界区组织的超氧化物歧化酶(SOD)、还原型谷胱甘肽(GSH)和丙二醛(MDA)水平,采用Western印迹法检测核因子相关因子(Nrf)2和HO-1蛋白表达。结果 3组间心肌梗死前的心肌组织中SOD、GSH和MDA水平的差异均无统计学意义(P值均>0.05)。3组在细胞移植后24h、72h、7d的心肌组织中SOD和GSH水平均显著低于同组心肌梗死前(P值均<0.05),以72h时最低,以后逐渐回升,至细胞移植14d时与心肌梗死前的差异无统计学意义(P值均>0.05);同时,MDA水平均显著高于同组心肌梗死前(P值均<0.05),以72h时最高,以后逐渐下降,至细胞移植14d时与心肌梗死前的差异无统计学意义(P值均>0.05)。MSC移植组在细胞移植24、72h的心肌组织中SOD和GSH水平均显著高于对照组和MSC移植+HO-1抑制剂组同时间点(P值均<0.05),而MDA水平显著降低(P值均<0.05);MSC移植+HO-1抑制剂组与对照组间的差异无统计学意义(P值均>0.05)。对照组中,细胞移植后24和72h时心肌梗死组织Nrf2和HO-1的表达水平均较心肌梗死前有升高趋势,但差异无统计学意义(P值均>0.05);而MSC移植组细胞移植后24和72h时Nrf2和HO-1蛋白表达水平均显著高于同组心肌梗死前和对照组同时间点(P值均<0.05),且细胞移植后7d时的HO-1水平仍显著高于对照组同时间点(P<0.05)。结论心肌梗死后移植MSC可能通过促进局部Nrf2及其下游抗氧化酶靶基因HO-1蛋白表达而调节梗死心肌的氧化应激反应,进而减轻氧化应激诱导的心肌损伤。

Nrf2参与MSCs调节大鼠梗死心肌氧化应激作用的实验研究

目的 探讨间充质干细胞（MSCs）移植对梗死心肌组织氧化应激反应的调节作用及其机制.方法 建立心肌梗死大鼠模型,利用随机数字表进行随机化分组,分为对照组（n=20）、MSC移植组（n=20）和MSC移植＋HO-1抑制剂组（n=20）.以密度梯度离心并贴壁培养获得骨髓源MSCs,于心肌梗死模型建立后经心肌局部多点注射MSCs悬液;细胞移植后不同时间点以测定血浆以及心肌梗死和梗死交界区组织超氧化物歧化酶（SOD）、还原型谷酰甘肽（GSH）和丙二醛（MDA）水平;Western Blot检测Nrf2和HO-1蛋白表达的变化.结果 细胞移植后8 h,3组大鼠梗死组织中SOD、GSH表达量开始下降,72 h时达到最低,以后逐渐开始回升,至两周时恢复接近心肌梗死前水平;同时,细胞移植后梗死组织中脂质氧化终产物MDA水平开始增高,3组均在72 h达到高峰（P〈0.05）,以后开始下降,至2周时降至梗死前水平.细胞移植后各时间点,与对照组比较,MSC移植组SOD和GSH含量下降幅度减小、恢复较快（P〈0.05）,且MDA含量减少（P〈0.05）.对照组梗死心肌组织中Nrf2及HO-1蛋白表达轻微升高,72 h时最显著;而MSC移植组中Nrf2和HO-1蛋白表达显著增高,且升高时间提前至细胞移植后24～72 h,且与对照组比较,细胞移植后24 h和72 h,Nrf2和HO-1表达水平均高于对照组（P〈0.05）;MSC移植＋HO-1抑制剂组与对照组比较,差异无统计学意义（P〉0.05）.结论 心肌梗死后移植MSCs可能通过促进局部Nrf2及其下游抗氧化酶靶基因HO-1蛋白表达而调节梗死心肌的氧化应激反应,进而减轻氧化应激诱导的心肌损伤.