农杆菌介导的玉木耳遗传转化体系的建立

以玉木耳菌丝球为受体,潮霉素(Hyg)为筛选标记,利用农杆菌介导法对玉木耳菌丝进行了遗传转化研究。潮霉素敏感性测试结果表明,玉木耳Hyg耐受浓度为30mg·L^(-1)。农杆菌介导的玉木耳菌丝最佳遗传转化体系为菌液浓度OD600=0.6~0.8,共培养时间2d,乙酰丁香酮(AS)浓度为100μmol·L^(-1);经潮霉素抗性筛选和GUS活性的组织化学分析,表明外源基因GUS已转入到玉木耳菌丝中,并获得表达。本实验成功地建立了稳定的农杆菌介导的玉木耳遗传转化体系。

基于非靶向代谢组学分析长孢假单隔孢侵染对羊肚菌代谢的影响

以羊肚菌子实体为试材,利用非靶向代谢组学、样本相关性分析、偏最小二乘法判别分析、聚类分析和KEGG富集分析等方法,研究了羊肚菌白霉病在不同侵染阶段中的代谢物差异。结果表明:不同时期羊肚菌受到侵染的代谢物存在较大差异,共鉴定出395种代谢物,大部分代谢化合物不存在显著差异,其中在M1与M2、M1与M3样本中分别检测到81和146个差异代谢物。此外,KEGG主要富集到全局地图和总览图、氨基酸代谢、辅因子和维生素代谢及核苷酸代谢等代谢途径;HMDB主要富集到有机酸及其衍生物、脂质和类脂质类、有机杂环化合物、苯甲酸酯类等代谢途径。

氮肥不同施用方式对稻麦轮作体系作物产量及其产量构成的影响

【目的】研究探索不同的基肥-追肥处理组合对稻麦轮作体系中作物产量及产量构成、氮肥偏生产力的影响,为高效农业和农业可持续发展的实现提供理论支撑。【方法】稻季基肥深施、追肥水施处理为G1,基肥深施、追肥湿施为G2,基肥面施、追肥水施为G3,基肥面施、追肥湿施为G4;麦季,基肥采用深施和面施两种方式,追肥全为面施,两种处理命名为G1、G2。以不施用氮肥作为对照处理。【结果】同等条件下,基肥深施的增产效果大于基肥面施,且达极显著水平,稻季作物产量和氮肥偏生产力以G2处理时最高,表现为G2>G1>G4>G3>CK;麦季以G1处理更优。基肥深施能明显提高氮肥偏生产力,水稻对氮肥的偏生产力为35. 4%-37. 3%,小麦的氮肥偏生产力较低,基肥深施和基肥面施处理分别为22. 2%、21. 8%,【结论】基肥深施、追肥湿施对作物具有最佳增产效果,提高氮肥利用率。

金针菇活性成分及药理活性研究进展

从金针菇中分离纯化出许多具有生物活性的化学成分,包括核糖体失活蛋白、真菌免疫调节蛋白、金针菇毒素、多糖、亚油酸、糖蛋白、酚类和倍半萜烯等,这些活性物质具有抗肿瘤、免疫调节、降胆固醇、抑菌、消炎、抗病毒等多种生理功能。本文综述了金针菇的化学成分和营养价值以及目前药理活性研究概况,并指出了目前研究中存在的问题和未来研究方向,以期为金针菇作为潜在有效治疗药物的研究提供参考。

金针菇菌株农艺性状评价及遗传多样性分析

【目的】分析评价金针菇菌株的农艺性状及其遗传多样性,为金针菇种质资源分类鉴定、保藏及遗传育种等提供理论参考。【方法】采用拮抗对峙试验、ISSR标记分析和农艺性状测定相结合的方法综合分析29株采自山东和江苏地区的金针菇菌株遗传多样性,并利用NTSYSpc 2.11F计算菌株间遗传相似系数,采用非加权配对算数平均法(UPGMA)构建聚类树状图。【结果】29株金针菇菌株间有246组发生拮抗反应,有160组未发生拮抗反应。供试菌株的菌盖和菌柄颜色有黄色、浅黄色、乳白色和白色4种,菌柄长度15.00～21.20 cm,菌盖直径0.73～1.72 cm,单袋产量332～513 g,生育期41～68 d。白色或乳白色金针菇菌株的生物学效率为73.0%～102.6%,生育期48～68 d;黄色或浅黄色金针菇菌株的生物学效率为66.4%～87.2%,生育期41～58 d,表明白色或乳白色金针菇菌株较黄色或浅黄色菌株产量较高,商品性状优良,但生育期较长。筛选出的8条ISSR引物共计扩增多态性位点270个,多态性比率为94%。供试金针菇菌株遗传相似系数为0.860～0.900,在遗传相似系数0.870处,29株金针菇菌株可分为五大类群。【结论】菌株间是否发生拮抗反应与菌株子实体颜色无关。江苏和山东两地区的金针菇菌株具有较丰富的遗传差异和遗传多样性,但亲缘关系较近。

基于ISSR分子标记技术的杏鲍菇种质资源评价

【目的】对杏鲍菇菌株进行种质资源综合评价,筛选出具有开发潜力的优良菌株作为育种的试验材料,为杏鲍菇育种手段和方法的深入研究和开发利用提供参考。【方法】本研究通过体细胞不亲和性、ISSR荧光标记毛细管电泳技术及农艺性状的比较分析,对27株杏鲍菇菌株进行种质资源评价。【结果】参试的杏鲍菇菌种遗传变异丰富,遗传相似系数的变化范围为0.85~0.91,当遗传相似性系数为0.87时,27株杏鲍菇菌株分为4类。结合杏鲍菇农艺性状比较分析,得出LX18和LX21两种亲缘关系较远且优势互补的种质资源可作为开发早熟高产优质的新菌株的亲本。【结论】由此可得,结合分子标记技术对杏鲍菇菌株从DNA水平进行分类鉴定以及种质资源分析,可加快推进杏鲍菇杂交育种的顺利进行。

基于RAPD的白色金针菇菌株遗传多样性分析

利用RAPD技术研究了15株白色金针菇菌株的遗传多样性。试验从20条RAPD引物中筛选出8条扩增条带清晰、多态性丰富的引物,共扩增出45条片段,多态性比率为73.3%;供试金针菇菌株遗传相似系数在0.560～0.984之间,在0.68水平上供试菌株被聚为1个类群,在0.83水平上可分为4个类群。RAPD分析结果与主成分分析结果具有一致性,说明供试菌株间遗传多样性丰富,RAPD技术能够作为快速鉴别金针菇菌株亲缘关系的一种方法。

响应面法优化玉木耳原生质体制备条件

【目的】优化玉木耳原生质体制备条件,获得高质量、高产量的原生质体,为后续玉木耳遗传育种、优良性状筛选和品种改良提供良好的试验材料。【方法】以玉木耳原生质体产量为考察指标,结合单因素试验和响应面优化法,建立原生质体制备回归方程,探究玉木耳原生质体的最佳制备条件。【结果】单因素试验结果表明,玉木耳原生质体制备的适宜条件为:酶解时间3 h、酶解液浓度2.0%、酶解温度35℃。响应面试验结果表明,各因素对原生质体制备影响程度的排序为:酶解温度>酶解时间>酶解液浓度,酶解温度与酶解时间的交互作用对原生质体产量有极显著影响(P<0.01),酶解时间与酶解液浓度的交互作用影响显著(P<0.05)。响应面试验优化后,获得玉木耳原生质体的制备条件为:酶解液浓度2.0%、酶解时间3.4 h、酶解温度35℃,此条件下玉木耳原生质体的平均产量为17.5×10^6CFU/mL,与理论产量(17.77×10^6CFU/mL)偏差小。【结论】利用响应面法可确立玉木耳原生质体制备的最佳条件,获得较理想的原生质体产量。

食用菌菌糠资源化利用研究进展

随着食用菌产业的迅速发展,食用菌菌糠的资源化利用受到了广泛关注。菌糠的丢弃或燃烧不仅造成了资源浪费,还对周边地区生态环境带来了威胁。该文探究了食用菌菌糠的基础特性和资源化利用现状,并分析了目前发展中存在的问题,明确了菌糠资源化的可行性和未来发展趋势,为菌糠资源化利用的进一步发展提供了理论基础。

工厂化金针菇菌株液体培养基的筛选和优化

探究不同营养因素对金针菇液体发酵的影响,提高金针菇菌丝体产量,为金针菇的工厂化生产和液体发酵产物开发利用提供参考和依据。试验采用6种不同的碳源和氮源,并分别测定其对金针菇液体培养菌丝体干重的影响,进一步选取了良好的碳源、氮源、无机盐和维生素作为4个影响因子设计正交试验。供试碳源中的玉米粉、可溶性淀粉和葡萄糖是金针菇菌丝液体培养的良好碳源,供试氮源中的黄豆粉、麸皮和酵母粉培养效果优于其它供试氮源。影响金针菇液体培养中菌丝体干重的主要因素依次是碳源和氮源。试验确定了适宜的金针菇液体培养基配方为可溶性淀粉3%、麸皮3%、MgSO_4 0.05%、V_(B2) 0.01%。

基于RAPD的杏鲍菇菌株遗传多样性分析

基于RAPD分子标记技术,通过计算遗传相似系数、UPGMA聚类、主成分分析,研究了10株供试杏鲍菇菌株的遗传多样性。利用筛选出的8条谱带清晰、多态性较好的引物合计扩增出47个位点,其中36个多态性位点,多态性比率为77%,遗传相似系数在0.556~1.000。结果表明,供试菌株在0.62水平上被聚为1类,在0.68水平上可分为3个类群。RAPD分析结果与主成分分析结果一致,说明RAPD技术能够作为快速鉴别杏鲍菇菌株亲缘关系的一种方法,有利于对杏鲍菇种质资源管理、优良品种选育等。

玉木耳转录组测序及褐变相关基因的挖掘

为了从分子水平研究玉木耳褐变的机理,对褐变和未褐变的玉木耳子实体进行了转录组测序分析,共筛选到5915个差异基因,其中有924个Unigene上调表达,有4991个Unigene下调表达。通过基因本体(Gene Ontology,GO)富集分析发现,差异基因显著富集于细胞及代谢过程、单一有机体、细胞和细胞组分、细胞器和大分子复合体、结合作用和催化活性。KEGG代谢通路富集分析表明,富集程度比较显著的通路包括翻译通路、信号转导途径、内分泌系统、折叠排序及退化、运输和分解代谢通路。挑选与组织褐变相关的差异基因进行qRT-PCR表达模式验证,获得的结果与表达谱分析结果一致。

种植密度与施氮量对稻麦轮作体系作物产量及地表径流氮素流失的影响

于2016~2017年在江苏连云港市研究了水稻-小麦轮作体系下种植密度与施氮量对作物产量及地表径流氮素流失的影响。结果表明:在一定范围内增加种植密度和施氮量可以提高作物的产量,改善其产量构成因素;水稻的最适栽植规格为25 cm×13 cm,最适施氮量为300 kg/hm^2;小麦的最适播种量为375 kg/hm^2,最适施氮量为315 kg/hm^2;增加种植密度能够有效降低农田地表径流氮流失量和氮流失率,提高作物的氮肥偏生产力;随着施氮量的增加,农田地表径流水体氮流失量显著上升,氮流失率出现减小的趋势,且作物的氮肥偏生产力逐渐下降。

连云港市都市农业现状分析

总结了连云港市都市农业发展的现状及主要类型,并对存在的问题进行分析,以期为该市都市农业的发展提供参考。

玉木耳络氨酸酶基因的克隆及表达分析

克隆获得了玉木耳络氨酸酶基因的全长cDNA序列,命名为Actyr。序列分析结果表明:其cDNA序列为1113 bp,编码371个氨基酸;相对分子量为41.11 kDa,等电点为7.64。亚细胞定位分析发现其定位于细胞质。qRT-PCR分析结果表明:Actyr基因的表达量在菌丝生长时期最低;随着玉木耳的生长发育,其表达量不断上升;到子实体直径为3 cm时,Actyr基因的表达量达到最高。

基于低能离子束注入的食用菌育种研究进展

利用低能离子束注入的生物学效应对生物体的遗传物质进行修饰和改良是近年来应用于植物和微生物育种的新技术,对打破基因连锁、促进植物和微生物遗传背景多样化具有重要意义。综述了低能离子束的注入诱变机理和目前低能离子束注入技术在食用菌育种上的研究进展,并对低能离子束注入技术在食用菌育种研究中存在的问题及今后发展方向进行了展望。

玉木耳漆酶基因Aclac的克隆及原核表达

【目的】对玉木耳漆酶基因Aclac进行克隆及原核表达分析,为深入研究漆酶基因在玉木耳子实体发育中的生物学功能提供理论依据。【方法】克隆Aclac基因的cDNA和DNA全长序列,对其进行生物信息学分析,并将目的基因连接至pET-28a质粒上以构建原核表达载体pET28a-Aclac,将其转化大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达。【结果】克隆获得的Aclac基因cDNA序列长度为1734 bp,编码577个氨基酸残基;Aclac基因DNA序列长度为2521 bp,含14个内含子。AcLAC蛋白理论分子量为64.75 k D,理论等电点为5.70,不稳定指数为34.01,无跨膜区域,存在1个信号肽,在4个铜离子结合区高度保守,且含有Cupredoxin超家族蛋白保守功能域。AcLAC蛋白与真菌的漆酶蛋白聚为一支,其中,AcLAC蛋白与木耳属真菌的漆酶蛋白亲缘关系最近。AcLAC融合蛋白在大肠杆菌BL21(DE3)表达宿主中成功表达,分子量为67 kD。【结论】克隆获得的Aclac基因属于Cupredoxin超家族基因,可在原核表达系统中异源表达,推测其与其他真菌漆酶基因在生物学功能上具有一致性,丰富了真菌漆酶资源。

羊肚菌化学成分及药理作用研究进展

羊肚菌是一类珍稀食用菌,具有很高的药用价值,富含氨基酸、酶、亚油酸、维生素、多糖、微量元素等活性成分,具有抗肿瘤、调节免疫、保肝护肾、保护心血管系统等多种药理作用。本文综述了目前羊肚菌化学成分和药理作用研究概况,为羊肚菌功能性食品和医药保健产品的研发提供参考和依据。

5个甜高粱品种在连云港地区的引种初报

为了筛选适合在连云港地区种植,生物产量、茎秆含糖量高的甜高粱品种,对引进的5个品种进行了品比试验。结果表明,BJ0602、 IMP-2的产量和品质表现较好,茎叶鲜产量分别为7 425 kg/亩、8 468 kg/亩,茎秆鲜重分别为0.76 kg/株、0.85 kg/株,茎秆糖锤度分别为12.68%、11.43%,可作为连云港地区的醇用型适栽品种推广种植。