直接用于输注的临床级细胞冻存保护剂的动物体内外安全性评价

目的探索研究一种安全有效的可以直接用于输注的临床级细胞冻存保护剂.方法采集50份脐带血,使用羟乙基淀粉沉淀法分离得到脐血有核细胞,加入5种不同浓度的冻存保护剂(DMSO、人血白蛋白、勃脉力A),于液氮中冻存6个月,检测并比较冻存前后有核细胞、CD34+细胞、细胞集落形成单位、回收率和台盼蓝拒染率;将不同浓度的冻存保护剂经尾静脉注射到小鼠体内,评估其安全性.结果 A组(10%DMSO+5%人血白蛋白+勃脉力A)与C组(7.5%DMSO+10%人血白蛋白+勃脉力A)台盼蓝拒染率、有核细胞回收率、CD34+细胞回收率和集落形成单位回收率无统计学差异(P>0.05)且高于其它3组(P<0.05),但A组的肝脏毒性高于其它组(P<0.05).结论 7.5%DMSO+10%人血白蛋白+勃脉力A是一种安全有效的冻存保护剂.

骨髓干细胞输注修复放疗免疫抑制的动物实验

目的探讨骨髓干细胞(bone marrowstem cell,BMSC)对放疗所致免疫抑制小鼠的修复作用,为干细胞用于临床修复放化疗后免疫抑制的患者提供一定的理论依据.方法选择雌性BALB/C小鼠,随机分为实验组、对照组和空白组,实验组和对照组的每只小鼠经照射剂量为8 Gy的6 MV直线加速器X线照射,随后实验组小鼠通过尾静脉输注小鼠骨髓干细胞1×107个,0.2 m L,对照组小鼠通过尾静脉输入0.2 m L生理盐水,空白组小鼠不做任何处理.于移植后第15、25、35天用血细胞分析仪检测外周血血常规,流式细胞仪检测T淋巴细胞亚群(CD3+、CD4+、CD8+)、ELISA试剂盒检测血清免疫球蛋白Ig M变化情况,并观察生存状态和存活率.结果经放疗所致免疫抑制的小鼠经骨髓干细胞输注后35 d存活率为80%,未经输注的小鼠35 d存活率为10%;放疗后小鼠经骨髓干细胞输注后外周血白细胞数、淋巴细胞比例及CD3+T细胞亚群较未经输注干细胞的小鼠高(P<0.05);在骨髓干细胞移植后第15天,CD4+%、CD8+%和免疫球蛋白Ig M最低,随后逐渐升高(P<0.05);骨髓干细胞移植后能降低免疫抑制小鼠外周血单核细胞比例及CD4+/CD8+比值(P<0.05).结论骨髓干细胞的输注能够修复免疫抑制小鼠的免疫功能,这为干细胞用于临床修复放化疗所致的免疫抑制的病人提供了一定的实验基础和理论依据.