蜱IgG结合蛋白的昆虫细胞表达及结合IgG特性分析

蜱吸食宿主大量血液，其中宿主血液中IgG分子能穿过蜱肠道，进入血淋巴，且能保持其活性。为逃避宿主免疫攻击，蜱唾液腺分泌一种免疫球蛋白结合蛋白（ImmunoglobulinGbindingprotein，IGBP），与蜱体内的宿主IgG结合，抑制宿主IgG对蜱的损害，是蜱唾液腺重要的功能分子，也是抗蜱疫苗候选分子。镰形扇头蜱是我国南方的优势蜱种，其唾液腺免疫球蛋白结合蛋白（RH．IGBP）被鉴定为抗蜱免疫保护性抗原，为进一步了解其生物学功能，本研究应用杆状病毒表达系统，构建出重组杆粒Bacmid．IGBP，并在昆虫细胞中表达出真核重组蛋白RH-IGBP，经免疫荧光实验鉴定和Westernblot分析，重组蛋白大小为23kDa，与预期一致。重组蛋白经纯化，利用ELISA方法，研究重组蛋白与不同哺乳动物宿主（兔、猪、牛羊、鼠、犬）和人的IgG结合能力，发现RH·IGBP与不同宿主IgG结合能力不同，与兔、猪的IgG有明显结合能力。对来自兔源IgG不同酶切片段F（ab’）2和Fc与RH．IGBP结合特性分析表明，蜱IgG结合蛋白主要识别部位是IgG的F（ab’）2片段。这些结果初步揭示了蜱IgG结合蛋白的作用机制和特点。