血管瘤血管内皮细胞体外分离纯化方法的优化

目的:寻找更高效的婴幼儿血管瘤内皮细胞培养方法,为婴幼儿血管瘤的研究提供基础的科研保证。方法:选取增生期婴幼儿血管瘤手术标本,采用组织块贴壁法与酶消化法结合进行原代培养;二代细胞进行流式分选,取CD31阳性的细胞继续培养。分别进行细胞形态学观察、细胞表面标记物免疫荧光鉴定、细胞表面标记物流式鉴定。结果:培养48～72h清晰可见组织块周围细胞游出,细胞核清晰,细胞呈长梭形及多边形,2周左右部分可形成"血管腔样"结构,20d可铺满平传代;细胞流式测定CD31阳性率达98.4%,VWF与CD31双阳率90.3%,免疫荧光染色CD31、VWF均呈阳性表达。结论:组织块与消化结合法经流式分选后可获得高纯度的内皮细胞,为下一步研究婴幼儿血管瘤增生消退机制奠定了基础。

尿素对婴幼儿血管瘤内皮细胞增殖和凋亡影响的体外研究

目的检测不同浓度和剂量的尿素对人血管瘤内皮细胞凋亡的影响,为尿素治疗血管瘤的机制研究提供依据。方法体外培养的人血管瘤内皮细胞和正常血管内皮细胞经不同浓度(40%、50%、60%、70%)和剂量(3、6、9μl/ml)的尿素干预后,通过CCK-8法检测细胞活力及抑制率;采用流式细胞术和碘化丙啶荧光染色观察人血管瘤内皮细胞的凋亡情况。结果在不同浓度和剂量的尿素作用下,人血管瘤内皮细胞的细胞活性比正常血管内皮细胞的活性低(P<0.05);40%尿素对人血管瘤内皮细胞的抑制率随着尿素剂量的增加而升高(P<0.05),且在4h和12h时抑制率相对较高;40%尿素作用下人血管瘤内皮细胞的凋亡随尿素剂量增加和时间的延长而升高,大剂量(9μl/ml)、40%尿素可显著促进人血管瘤内皮细胞的凋亡(P<0.05)。结论低剂量40%尿素对血管瘤内皮细胞的增殖有明显的抑制、对正常血管内皮细胞无明显作用,而大剂量尿素能促使人血管瘤内皮细胞凋亡。

106例卡波西样血管内皮瘤治疗方案探讨

目的观察比较保守治疗、早期手术及晚期手术治疗卡波西样血管内皮瘤的效果。方法2004年1月至2016年12月河南省人民医院血管瘤外科收治106例卡波西样血管内皮瘤患者,男62例,女44例,年龄最小1 d,最大43岁,中位年龄94.5 d。根据治疗方式不同分为保守治疗组29例、早期手术组55例和晚期手术组22例,保守治疗组采用激素或激素联合尿素局部注射治疗;手术治疗组行手术切除瘤体,发病至手术时间<3个月为早期手术组,≥3个月为晚期手术组。疗效评定标准:治愈为瘤体消失或基本消失,血小板恢复正常,随访半年以上无复发;有效为瘤体显著缩小,血小板明显回升;无效为瘤体无缩小或继续增大,血小板无回升或继续下降。比较3组治疗后的总疗效,比较治疗前及治疗后1、7、14 d患者血小板值的变化;比较早期手术组、晚期手术组术中及术后情况。结果患者均获6~23个月随访,治愈65例,有效24例,无效12例,死亡5例。治疗7 d后3组血小板值分别为保守治疗组68(31,157)×10^9/L、早期手术组(294.75±150.59)×10^9/L、晚期手术组(221.48±148.71)×10^9/L,组间比较差异有统计学意义(P<0.05);治疗14 d后3组血小板值分别为保守治疗组78(25.5,154.5)×10^9/L、早期手术组281(234,356)×10^9/L、晚期手术组(219.67±140.95)×10^9/L,组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。随访至少半年后3组临床疗效总有效率:保守治疗组62.07%、早期手术组96.34%、晚期手术组81.82%,两两比较差异有统计学意义(P<0.05)。早期手术组术中出血量与手术时间、术后血小板值升高时间以及总住院时间与晚期手术组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论早期手术治疗卡波西样血管内皮瘤优于晚期手术治疗和保守治疗,手术应作为治疗卡波西样血管内皮瘤首选方案,应早发现早治疗。

皮下错构瘤误诊为静脉畸形一例

患者女,19岁,3年前发现左前臂青紫色且逐渐增大包块,无明显疼痛,活动度可,按压时青紫色消失,初诊为左前臂静脉畸形。采用手术治疗,术中见瘤体边界清,包膜完整,瘤体血运十分丰富,内含较多超微毛细血管网,大体观似静脉畸形。经病理检查诊断为皮下错构瘤。术前、术中的临床表现与静脉畸形十分相似导致误诊,因此遇到类似疾病,应慎重处理,拓宽对疾病的分析思路。