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耻垢分枝杆菌烯酰辅酶A水合酶编码基因表达分析及其敲除质粒的构建 被引量:2
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作者 任尧 程世君 +5 位作者 马彩虹 王薇伊 唐明 李维 葛方兰 陈贵英 《四川师范大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2015年第1期126-133,共8页
胆固醇是某些病原菌胞内生存所必需的碳源和能源物质,而胆固醇的各种代谢酶是潜在的药物作用靶点.烯酰辅酶A水合酶主要参与了脂肪酸的β-氧化循环,但其在胆固醇降解中的作用机理尚不完全清楚.首先对耻垢分枝杆菌(Mycobacterium smegmati... 胆固醇是某些病原菌胞内生存所必需的碳源和能源物质,而胆固醇的各种代谢酶是潜在的药物作用靶点.烯酰辅酶A水合酶主要参与了脂肪酸的β-氧化循环,但其在胆固醇降解中的作用机理尚不完全清楚.首先对耻垢分枝杆菌(Mycobacterium smegmatis MC2155)进行了全基因组搜索,获得了18个烯酰辅酶A水合酶的候选基因.对在不同甾醇类化合物条件下的转录组测序结果进行了分析,发现18个候选基因差异表达明显,其中位于胆固醇降解基因簇中的MSMEG_5915(ech A19),在胆固醇条件下表达明显上调,MSMEG_5915(ech A19)可能参与了胆固醇的侧链降解.最后,构建了MSMEG_5915的敲除质粒,并对耻垢分枝杆菌进行了基因转化.经PCR快速分子鉴定,MSMEG_5915基因被同源整合于耻垢分枝杆菌染色体上.为进一步揭示MSMEG_5915(ech A19)基因的功能奠定了基础. 展开更多
关键词 耻垢分枝杆菌 烯酰辅酶A水合酶 转录分析 敲除质粒 电转化
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混晶组织对GH4720Li合金高温力学性能的影响 被引量:6
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作者 唐超 程世君 +3 位作者 曲敬龙 张龙 杜金辉 张继 《稀有金属材料与工程》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2021年第9期3280-3287,共8页
利用光学显微镜、场发射扫描电镜及力学性能测试等手段,研究了不同组织特征对GH4720Li合金高温拉伸和持久性能的影响。结果表明:组织B(局部混晶+一次γ′相)的650℃抗拉强度和屈服强度与组织A(均匀细晶+一次γ′相)相比有所降低;随着混... 利用光学显微镜、场发射扫描电镜及力学性能测试等手段,研究了不同组织特征对GH4720Li合金高温拉伸和持久性能的影响。结果表明:组织B(局部混晶+一次γ′相)的650℃抗拉强度和屈服强度与组织A(均匀细晶+一次γ′相)相比有所降低;随着混晶程度的提高,组织C(完全混晶+一次γ′相)的抗拉强度迅速下降,但组织C的抗拉强度远高于粗晶组织D(粗晶+无一次γ′相)。不同持久试验条件下,合金的高温变形机制不同:730℃/530 MPa条件下,组织A和组织D持久寿命相当,但从组织B和组织C可以看出持久寿命随混晶所占百分比的增加而提高,高温低应力下的变形机制主要为晶界粘滞滑动;680℃/830 MPa条件下主要变形机制是晶内位错滑移,组织A和组织B的持久性能较好,持久寿命随着粗晶所占百分比的增加而降低,同时晶界滑移同样产生一定作用,使得以粗晶为主的混晶组织持久寿命的降幅不大。 展开更多
关键词 GH4720Li合金 混晶组织 高温拉伸性能 持久性能
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灰毡毛忍冬‘渝蕾1号’内生菌对其悬浮细胞生物量及绿原酸含量的影响 被引量:5
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作者 李群 汪超 +4 位作者 唐明 程世君 马丹炜 王亚男 卢红 《植物生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第11期1997-2005,共9页
从灰毡毛忍冬‘渝蕾1号’中分离出17株内生菌,并采用16S r DNA和18S r DNA分子鉴定结合形态特征鉴定出其中6株。将获得的6株内生菌作为诱导子添加至‘渝蕾1号’悬浮培养体系中,探讨其对‘渝蕾1号’悬浮细胞生物量及绿原酸含量的影响。... 从灰毡毛忍冬‘渝蕾1号’中分离出17株内生菌,并采用16S r DNA和18S r DNA分子鉴定结合形态特征鉴定出其中6株。将获得的6株内生菌作为诱导子添加至‘渝蕾1号’悬浮培养体系中,探讨其对‘渝蕾1号’悬浮细胞生物量及绿原酸含量的影响。结果表明,分离得到的6株菌分别为根瘤菌(cc2)、荧光假单孢菌(cc4)、盾壳霉菌(cc5)、高地芽孢杆菌(cc13)、同温层芽孢杆菌(cc14)及短小芽孢杆菌(cc15)。同时,6株内生菌均不同程度地影响‘渝蕾1号’悬浮细胞生物量及次生代谢产物绿原酸含量。对生物量来说,6种内生菌均在浓度为25 mg·L-1时,生物量达到最大值。对绿原酸来说,根瘤菌、荧光假单孢菌、盾壳霉菌及同温层芽孢杆菌均在浓度为25 mg·L-1时,绿原酸含量达到最大,而高地芽孢杆菌和短小芽孢杆菌在浓度为12.5mg·L-1时,绿原酸含量达到最大。总结以上结果,与对照相比,细胞生物量和绿原酸含量会在菌株的某个浓度下大大提高,该结果为绿原酸的工业化生产打下了基础。 展开更多
关键词 灰毡毛忍冬'渝蕾1号’ 内生菌 生物量 绿原酸
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3-甾酮-9α-羟基化酶基因在分枝杆菌中的异源表达与9α-羟基雄烯二酮的制备 被引量:9
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作者 袁家代 陈贵英 +4 位作者 程世君 葛方兰 王琼 李维 李江 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期523-533,共11页
9α-羟基雄烯二酮(9-OH-AD)是制备甾体类药物的重要中间产物。3-甾酮-9α-羟基化酶(KSH)能够转化雄烯二酮(AD)产生9α-羟基雄烯二酮(9-OH-AD),该酶由Ksh A和Ksh B两个亚基构成。为获得高效积累9-OH-AD的重组菌株,本研究选择耻垢分枝杆菌... 9α-羟基雄烯二酮(9-OH-AD)是制备甾体类药物的重要中间产物。3-甾酮-9α-羟基化酶(KSH)能够转化雄烯二酮(AD)产生9α-羟基雄烯二酮(9-OH-AD),该酶由Ksh A和Ksh B两个亚基构成。为获得高效积累9-OH-AD的重组菌株,本研究选择耻垢分枝杆菌Mycobacterium smegmatis mc2155和戈登氏菌Gordonia neofelifaecis NRRL B-59395,对其在胆固醇为唯一碳源条件下表达明显上调的ksh A和ksh B候选基因进行克隆,插入到分枝杆菌表达载体p NIT中,构建共表达质粒,并将它们导入分枝杆菌Mycobacterium sp.NRRL B-3805中,获得重组菌株。利用重组菌株分别对植物甾醇、胆固醇和谷甾醇进行生物转化,分离纯化转化产物,采用光谱学方法鉴定其化学结构,确定该转化产物为9α-羟基雄烯二酮,说明分枝杆菌Mycobacterium sp.NRRL B-3805由积累雄烯二酮变为积累9α-羟基雄烯二酮(9-OH-AD),进而证明导入的候选基因ksh A和ksh B确实为有功能的基因。生物转化实验表明,与胆固醇、谷甾醇相比,植物甾醇作为底物更易于转化;而用来源于耻垢分枝杆菌的ksh A、ksh B构建的重组菌转化率更高,可达90%,具有较高的应用价值。本研究通过对KSH编码基因的异源表达,成功地进行了分枝杆菌生物转化特性的改造,为探索各种甾体药物中间体的工业生产奠定了基础。 展开更多
关键词 分枝杆菌NRRL B-3805 9α-羟基雄烯二酮 3-甾酮-9α-羟基化酶 异源表达 生物转化
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涡轴发动机导叶调节结构设计影响因素分析 被引量:3
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作者 查小晖 黄晓鸣 +1 位作者 程世君 冯凯凯 《航空精密制造技术》 2020年第3期18-21,共4页
本文从导叶调节机构的作动力、操纵杆刚度、联动环刚度、连杆长度、装配工艺等方面对影响涡轴发动机导叶调节结构设计因素进行分析.分析结果表明:零件间配合、安装方式和装配工艺影响着导叶调节机构的摩擦阻力,进而影响机构作动力,作动... 本文从导叶调节机构的作动力、操纵杆刚度、联动环刚度、连杆长度、装配工艺等方面对影响涡轴发动机导叶调节结构设计因素进行分析.分析结果表明:零件间配合、安装方式和装配工艺影响着导叶调节机构的摩擦阻力,进而影响机构作动力,作动力过大会加大操纵杆和联动环的变形,从而影响着导叶的调节精度。 展开更多
关键词 涡轴发动机 导叶调节 结构设计 分析
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