两种化学发光法检测25-羟基维生素D的性能差异及结果一致性评价

目的 研究直接化学发光法和电化学发光法2种方法检测25-羟基维生素D进行性能验证,并对收集的血清标本进行2种检测方法的结果一致性评价。方法 应用国产新产业M4000P(直接化学发光法)和德国罗氏Cobas e411(电化学发光法)分别进行精密度、正确度、线性范围和参考区间的性能验证,并对收集的145例血清标本分别在两个检测平台检测后进行数据一致性分析。结果 国产新产业M4000P直接化学发光法25-羟基维生素D精密度1水平2.49%,2水平1.63%;德国罗氏Cobas e411电化学发光法25-羟基维生素D的1水平精密度5.37%,2水平3.64%;国产新产业M4000P直接化学发光法平均偏倚5.67%和3.43%,德国罗氏Cobas e411电化学发光法平均偏倚3.34%和6.59%。2种方法在各自的线性区间国产新产业M4000P(10 ng/ml~150 ng/ml)和德国罗氏Cobas e411(3 ng/ml~70 ng/ml)内线性良好,国产新产业M4000P和德国罗氏Cobas e411r2分别为0.9997和0.9996;国产新产业M4000P直接化学发光法和德国罗氏Cobas e411电化学发光法两个平台25-羟基维生素D参考区间均可通过验证。将收集的血清标本用这2种化学发光法的检测结果进行一致性分析,组内相关系数ICC=0.925,提示一致性极好;Bland-Altman偏差分析显示2种方法25-羟基维生素D检测结果在检测均值偏低范围(7.65 ng/ml~20 ng/ml)表现出极佳的一致性,随检测值增大,偏差增大的可能性增大。结论 2种检测方法25-羟基维生素D性能参数正确度、精密度、线性区间、稀释倍数和参考区间均符合临床检测需求。新产业M4000P直接化学发光法和德国罗氏Cobas e411电化学发光法检测25-羟基维生素D在检测均偏低范围表现出极好的一致性,随25-羟基维生素D浓度增大,偏差可能性越大。

美国FDA HIV-1和HCV核酸检测程序、血液处置和献血者屏蔽与归队指引主要推荐及其启示

病毒核酸检测（nucleic acid test,NAT）技术应用在血液筛查中是输血安全技术的巨大进步。为了规范血液病毒NAT操作、血液和献血者管理,美国FDA于2010年5月发布了《HIV-1和HCV核酸检测程序、血液处置和献血者屏蔽与归队指引》（简称2010年版指引）[1],其时正恰逢我国着手开展血液病毒NAT的试点工作,我们认识到该文对我国血液病毒NAT技术规范化操作和管理具有重要的参考借鉴价值.

HEV感染血小板模型的建立及其机制的初步研究

目的研究戊型肝炎病毒(hepatitis E virus, HEV)是否感染血小板并进一步在其内复制,以及血小板与HEV的相互作用情况。方法将纯化的血小板与病毒共培养1 h后在PBS中洗涤2次,22℃下继续震荡培养5 d,每天观察病毒的复制情况。使用荧光定量PCR方法检测HEV核酸浓度的变化;免疫荧光染色观察HEV是否感染血小板;流式细胞术分析HEV是否促进血小板活化。结果随着HEV感染量的增加,血小板感染病毒量逐渐增加并趋于平稳,并且感染率最高约为1.22%,免疫荧光结果可同时观察到HEV结合或进入血小板;培养上清中的病毒浓度与d0相比,d4、d5有明显的增长(P<0.01),且沉淀中的病毒浓度在d2有明显的增加(P<0.01);HEV导致CD62P,CD41双阳性血小板比例增加约8%(P<0.01)。结论 HEV在体外实验中可以感染血小板并促进血小板活化,HEV在血小板内的复制特征需进一步研究验证。

成人重症肌无力1642例抗核抗体和抗核抗体谱检测结果分析

目的研究抗核抗体(antinuclear antibody, ANA)和抗核抗体谱在成人重症肌无力中的分布和临床意义。方法采用间接免疫荧光法(IIF)检测1 642例成人重症肌无力患者抗核抗体,免疫印迹法同时检测ANuA、Anti-P、aha、AMA M2、CENPB、Jo-1、PCNA、PM-Scl、Ro-52、SCL-70、SS-B、Sm、dsDNA、nRNP/Sm、SS-A共15种抗核抗体。结果在1 642例成人重症肌无力患者中,ANA阳性率为39.0%,其中男性阳性者占32.14%,女性阳性者占67.86%,二者差异有统计学意义(P<0.001);同性别不同年龄组间ANA阳性率差异有统计学意义(P<0.05);同年龄组间女性ANA阳性率均高于男性(P<0.001)。成人重症肌无力ANA阳性患者荧光模式分析结果表明,单一荧光核型以均质型最多(34.17%),其次是核斑点型(28.55%)和胞浆型(14.98%)。混合荧光模式以核斑点型/细胞浆型(S/C)为主(4.84%)。ANA阳性患者滴度以1∶100为主,占57.57%。抗核抗体谱以Ro-52、SS-A、AMA M2和CENPB阳性率较高,约70%ANA均质型阳性标本中其ANA谱为阴性。结论成人重症肌无力患者ANA阳性率女性显著高于男性,高年龄组阳性率更高。ANA荧光核型以均质型、核斑点型和胞浆型为主,ANA谱以Ro-52、SS-A、AMA M2和CENPB阳性率较高。约70%ANA均质型阳性标本中其ANA谱为阴性,因此均质型中高度怀疑有其他重症肌无力特异性抗体未被识别。

中西医结合治疗重症肌无力对Treg/Th17免疫细胞及相关细胞因子的影响

目的比较中西医结合治疗(包括免疫抑制剂和以补中益气汤为主的辩证加减联合治疗)和单纯免疫抑制剂治疗重症肌无力两种治疗方案对Treg/Th17免疫细胞及相关细胞因子的影响。方法选择2017年1月至2018年12月收治的重症肌无力患者80例,随机分为两组(I组和II组)进行临床治疗,其中I组(42例)采用免疫抑制剂(甲泼尼松龙和硫唑嘌呤)配伍中药重剂补中益气汤联合治疗;II组(38例)采用单纯免疫抑制剂(甲泼尼松龙冲击配伍硫唑嘌呤)治疗。监测两组患者治疗12个月前后的Treg/Th17细胞及相关细胞因子IL-6、IL-17、IL-21的变化,同时观察MG特异性抗体乙酰胆碱受体抗体(AChRAb)水平变化及MG临床绝对评分标准来判定治疗后12个月前后的临床疗效。结果(1)两组治疗后Treg和Th17细胞均较治疗前差异有统计学意义(P<0.001),I组较II组Treg和Th17细胞变化更显著(P<0.001)。(2)治疗后两组MG患者细胞因子IL-6、IL-17和IL-21水平均显著降低(P<0.001),且I组明显低于II组(P<0.001)。(3)两组MG患者治疗前AChRAb水平差异无统计学意义(P>0.05),治疗后两组均显著降低(P<0.01);而I组较II组表现出疗效差异明显,患者血清AChRAb水平降低更明显(P<0.001)。(4)两组患者MG绝对评分治疗前组间及II组治疗前后比较差异均无统计学意义(P>0.05);治疗后两组组间MG绝对评分及I组治疗前后比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论中西医结合治疗重症肌无力可使Treg和Th17细胞变化更显著、细胞因子IL-6、IL-17和IL-21表达水平降低更明显、乙酰胆碱受体抗体(AChRAb)降低更明显、临床绝对评分明显降低,患者的临床症状缓解率高,长效性和稳定性好。

循环阈值、铁蛋白、CRP及SAA与COVID-19患者疾病严重程度的相关性研究

目的分析不同临床分型新型冠状病毒肺炎(corona virus disease 2019,COVID-19)患者新冠病毒核酸循环阈值(cycle threshold,Ct值)、血清铁蛋白(serum ferritin,SF)、C-反应蛋白(C-reactive protein,CRP)及全血血清淀粉样蛋白A(serum amyloid A,SAA)检测结果,探讨其与COVID-19疾病严重程度之间的关系。方法选取2021年1月至2月石家庄市人民医院收治的COVID-19确诊患者81例,根据新型冠状病毒诊疗方案(试行第八版)分型标准分为重症组(24例)和轻症组(57例),分别统计其入院后新型冠状病毒核酸循环阈值、血清铁蛋白、CRP及全血SAA的检测结果,分析以上指标与疾病严重程度的关系。结果重症组患者病毒核酸循环阈值在入院后多个时间点均显著低于轻症组(P<0.05);同时,与轻症组相比,重症组患者核酸阳性率更高,阳性持续时间更长,两者差异具有统计学意义(P<0.05);重症组患者血清铁蛋白、CRP和SAA均显著高于轻症组(P<0.05);ROC分析结果表明血清铁蛋白、CRP及全血SAA可用于COVID-19患者疾病严重程度分级(AUC分别为0.961、0.967、0.952),同时,确定了3指标用于COVID-19疾病严重程度分级的临界值分别为:204.95ng/mL、26.70mg/L、144.28mg/L;另外,相关性分析发现CRP和SAA均与新冠病毒核酸循环阈值呈负相关(P<0.05),未发现铁蛋白与循环阈值之间的相关性(P>0.05)。结论新型冠状病毒核酸循环阈值、阳性持续时间、血清铁蛋白、CRP及全血SAA的结果均与COVID-19疾病严重程度相关,监测这些指标对病情判断、疾病分级及预后评估均有重大意义。