二恶英暴露下奶牛血液代谢组学研究

旨在研究食用被PCDD/Fs污染的饲料对奶牛血液代谢组的影响.选择飞灰作为PCDD/Fs的载体,暴露期间将30 g飞灰与40 kg奶牛饲料均匀混合,使用配制的污染饲料饲喂奶牛,连续饲喂38 d后采集血液.采用液相色谱-质谱(LC-MS)联用技术对血液进行代谢组学分析,并且结合主成分分析(PCA)和正交偏最小二乘法判别分析(OPLS-DA)对代谢轮廓进行模式识别分析并筛选差异代谢产物.共鉴定差异代谢物50个,主要为氨基酸、胆酸、磷脂与脂肪酸类成分.将差异代谢物进行通路分析并注释,涉及19条代谢通路,主要与氨基酸、脂肪酸及胆碱代谢相关.PCDD/Fs暴露干扰了奶牛的脂肪酸代谢、氨基酸代谢、磷脂代谢、胆汁酸代谢,可作为PCDD/Fs暴露的靶标代谢通路供进一步的研究.

国产玫瑰精油的化学成分及香气特征

对玫瑰精油制备方法进行了综述。按照化学物种类归纳了国产玫瑰精油的化学成分并对其香气特征进行了分析。

气相色谱-串联四极杆质谱测定餐厨废弃物中的丙烯酰胺

【目的】建立气相色谱-串联四极杆质谱(GC/MS/MS)检测餐厨废弃物中的丙烯酰胺。【方法】样品经去离子温水提取结合C18 SPE小柱净化或者经甲酸溶液提取/Carrez试剂预处理,MCX柱净化的两种前处理方法进行前处理,然后经过衍生反应,利用气相色谱串联三重四极杆质谱检测,在SRM检测模式下,以离子对m/z 152>135和m/z 152>107为定性离子对,m/z 152>135为定量离子,碰撞气体能量15 V,外标法定量。【结果】该方法在3.0—30 ng·L-1浓度中呈现良好的线性关系,相关系数R2=0.9984,丙烯酰胺的检出限值为1.0 ng·g-1(S/N=3),回收率为95.3%—108.1%,3个水平添加下的相对标准偏差(RSD)均小于4.3%。【结论】所建立的方法稳定、灵敏度高,可用于餐厨废弃物中丙烯酰胺的测定。

纳米银粒子表面增强拉曼光谱在宠物饲料中三聚氰胺的速测研究

研究将制备的纳米银粒子作为表面增强拉曼光谱的增强试剂,实现对宠物饲料中三聚氰胺的快速定性定量分析。以709与1542cm-1处拉曼位移作为定性依据,以1149cm-1峰强度作为归一化标准,在1.0～10.0mg·kg-1浓度范围实现定量计算,检测限0.5mg·kg-1。研究发现,纳米银粒子对三聚氰胺具有较强的拉曼增强效应,特征峰信号强度与纳米银粒子加入时间,溶液涡旋强度有很大的关系,同时也受提取溶剂的种类、提取方式及样品加入量的影响。本方法中每个样品5min内完成分析,与现有方法相比,快速简便,对宠物饲料中三聚氰胺实现现场、快速检测。

SERS的煎炸食品中丙烯酰胺速测方法研究

丙烯酰胺是一种具有神经毒性、生殖毒性,遗传毒性及免疫毒性的化合物,被列为2A级致癌物。富含碳水化合物的食物经高温烹饪后,丙烯酰胺暴露风险极大,建立对丙烯酰胺的速测方法具有重要的意义和实用价值。表面增强拉曼光谱技术(SERS)近年来发展迅速,利用高SERS活性纳米结构基底可实现对目标物拉曼"指纹"信号的高灵敏增强。复杂基质中目标物的SERS快速分析需要高活性的基底和高效的净化技术。建立了一种基于复合纳米结构的煎炸食品中丙烯酰胺的SERS快速分析方法。利用纳米银阵列负载纳米金粒子(AgNR@AuNPs)作为增强基底,一是该基底基于AgNR纳米棒之间以及AuNPs纳米粒子之间双重"热点"增强作用,对丙烯酰胺具有较高的SERS增强活性;二是该基底中AgNR为固相基底,每次使用前,利用稀硝酸除去表面氧化物,大大提高了SERS分析稳定性。还研究了AuNPs粒径和样品添加顺序对分析灵敏度的影响。煎炸食品中基质干扰严重,结合QuECHERS快速净化技术,在优化除脂、萃取溶剂及净化材料的用量比例、种类的基础上,选择正己烷为除脂溶剂,水∶乙腈(V/V=1∶1)为提取溶剂, MgSO4+NaCl为净化材料, 5 min内完成检测。分析灵敏度1μg·kg-1,在5~100μg·kg-1内以Δν=1 482 cm^-1为定量峰,实现定量分析,线性相关系数r=0.985, 5个添加浓度下回收率为77.1%~93.6%,相对标准偏差小于4.0%。所建立的方法有望用于食品安全现场检测中。

超临界CO_2流体色谱分离α-紫罗兰酮和β-紫罗兰酮

采用超临界CO2流体色谱分离α-紫罗兰酮与β-紫罗兰酮2个异构体,考察了改性剂浓度、柱温、柱压对容量因子和分离度的影响,确定了较佳的分离条件:硅胶柱(250mm×4.6mmI.D.6μm);流动相:V(CO2):V(异丙醇)=99:1;流速:2mL/min;柱温:40℃;柱压程序:起始压力8MPa,以300kPa/min的速率升至12MPa;紫外检测波长:254nm;进样:2μL浓度为480mg/mL的α-紫罗兰酮与β-紫罗兰酮2个异构体的二氯甲烷溶液,此时,分离时间约10min,分离度达到3.3。

饲料中D-泛酸钙的超临界流体色谱测定

采用超临界流体色谱（SFC）测定了饲料中D-泛酸钙的含量。在二氧化碳流动相中添加14．85％甲醇改性剂及0．15%三氟乙酸添加剂，流速2mL／min，在KromasilODS柱上分离，检测波长为210nm。结果表明D-泛酸钙能在3min内完成分离，在1．0～25．0mg／L范围内，样品的质量浓度与色谱峰面积呈良好的线性关系（r=0．9995）。方法的精密度良好，相对标准偏差在2．3％以内，回收率为89％～98％。方法操作简单，结果准确，适合普及应用。

饲料中二恶英类化合物检测方法研究进展

二恶英类化合物稳定性高,不易降解,在食物链中具有富集作用,二恶英污染的饲料对人类健康有潜在的危害。主要结合近年来国内外有关二恶英检测技术的最新进展,介绍了目前饲料中检测二恶英类化合物可运用的分析,并提出了我国开展二恶英分析检测的建议和展望。

宫外孕腹腔镜手术与开腹手术的临床对比分析

目的针对宫外孕患者,从手术时间、疗效及疗程方面,对腹腔镜手术和开腹手术进行比较。方法以回顾性方法对312例宫外孕患者行腹腔镜手术及80例开腹手术的临床资料进行分析。结果通过比较,对宫外孕行腹腔镜手术与开腹手术,在出血量方面无明显差别,但其手术时间及术后住院天数上有显著差异(P<0.01)。结论腹腔镜手术治疗宫外孕具有较明显的优势。

伊曲康唑联合达克宁栓治疗外阴阴道假丝酵母菌病临床效果研究

目的临床验证伊曲康唑联合达克宁栓治疗外阴阴道假丝酵母菌病的临床效果、观察不良反应。方法采用口服伊曲康唑、阴道放置达克宁栓,并且夫妻同时治疗。结果①206例病例中200例治愈,总治愈率为97.1%,复发率为1.94%。②服用斯皮仁诺后有12例出现不良反应,不良反应发生率为5.82%;使用达克宁栓治疗过程中19例出现轻微局部刺激,不良反应发生率为9.22%。结论伊曲康唑联合达克宁栓治疗外阴阴道假丝酵母菌病能起到互补作用,治愈率高,复发率低,不良反应小、安全性好,是治疗外阴阴道假丝酵母菌病的有效措施,值得在临床推广使用;夫妻同时治疗可提高治愈率、降低复发率。

系统性淋巴结清扫术治疗子宫内膜癌的预后效果及安全性探讨

目的探讨系统性淋巴结清扫术治疗子宫内膜癌(EC)的预后效果及安全性。方法选择2011年2月-2014年2月郑州人民医院收治的EC患者76例,以随机数字表分组为研究组与对照组,各38例。对照组行子宫全切+双附件切除+盆腔淋巴结清扫手术,研究组行子宫全切+双附件切除+系统性盆腔、腹主动脉旁淋巴结清扫术。通过观察两组EC患者术中指标、术后恢复与随访情况来评价两种术式的预后与安全性。结果研究组患者手术时间长于对照组,淋巴结清扫数量多于对照组(P<0. 05)。研究组术后整体并发症的发生率为23. 68%,低于对照组的50. 00%(χ~2=5. 655,P<0. 05)。随访3年,研究组EC患者复发率为10. 53%,低于对照组31. 58%(χ~2=5. 067,P<0. 05);研究组生存率94. 74%,高于对照组73. 68%(χ~2=5.333,P<0. 05)。结论系统性淋巴结清扫术能够保证EC患者的预后质量,虽然增加了并发症概率,但仍在可控范围内,安全性尚可。

超高效液相色谱-串联质谱法同时测定绵羊唾液中14种β-受体激动剂

以固相萃取为前处理方式,建立了超高效液相色谱-串联质谱法检测绵羊唾液中克伦特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇等14种β-受体激动剂的新方法。试样用pH 5.2的乙酸铵缓冲液稀释并沉淀蛋白,离心去杂质后由MCX柱净化、浓缩,经Waters BEH C18色谱柱梯度分离,串联质谱法测定,正离子扫描,并以内标法计算结果。方法检出限为0.1～0.2μg/L,定量限为0.3～0.5μg/L。3个添加水平的回收率在60%～110%之间;相对标准偏差均小于20%。

miRNA-22在卵巢癌组织的表达及其对卵巢癌细胞增殖、迁移与侵袭的影响

目的:观察在不同卵巢组织中miRNA-22的表达,并研究上调miRNA-22表达对卵巢癌细胞株SKOV-3增殖、迁移与侵袭的影响。方法:实时荧光定量PCR(q PCR)检测不同卵巢组织样本miRNA-22的表达;随机将SKOV-3细胞分为正常对照组(control组)、空白载体组(miRNA-22-NC组)和转染miRNA-22-mimic组(miRNA-22-m组),q PCR检测各组细胞miRNA-22的表达,CCK-8法检测细胞存活率,划痕实验与Transwell小室法分别检测细胞的迁移与侵袭能力,Western blot法检测VEGF和P53蛋白表达。结果:卵巢癌组织中miRNA-22的水平显著低于正常卵巢组织;与control组相比,miRNA-22-m组细胞miRNA-22的表达显著增加,细胞存活率显著降低,细胞迁移数和侵袭数下降,VEGF和P53的蛋白表达水平显著下降。结论:miRNA-22的低表达可能与卵巢癌的发生发展有关。过表达miRNA-22能够抑制卵巢癌细胞株的增殖、迁移和侵袭,其机制可能与下调VEGF和P53的蛋白表达有关。

应用表面增强拉曼光谱技术快速检测较大婴幼儿配方奶粉中的香兰素

【目的】香兰素(3-甲氧基-4-羟基苯甲醛)是一种婴幼儿配方食品中常用的食品添加剂,因具有浓郁奶香被广泛使用,但过量使用香兰素会引起婴儿肝肾损伤。目前,国家尚未出台相关检测标准,现场检测手段相对缺乏,建立婴幼儿配方奶粉中香兰素检测方法特别是现场快速检测方法迫在眉睫。本文建立了基于纳米金粒子的表面增强拉曼光谱对较大婴幼儿配方奶粉中香兰素的速测方法,为政府监管提供技术支撑。【方法】本文主要从样品前处理方法优化,增强基底的制备以及上机参数的选择3方面进行研究。比较不同萃取溶剂对香兰素提取效率的影响,确立较佳的样品前处理方法;研究不同粒径的纳米金胶溶液对香兰素的表面增强拉曼光谱信号强度的影响,确定较佳的增强基底;探明pH、离子强度等对上机液的影响,得到较优的检测条件。【结果】确立了较优的前处理方法:首先以饱和醋酸铅溶液作为沉淀剂去除基质中蛋白,之后以二氯甲烷为萃取溶剂对香兰素进行提取,最终使用pH为9的氢氧化钠水溶液对提取液进行纯化;确立了较佳的检测条件:以粒径约58 nm的金胶溶液作为增强基底,同时,在上机液中加入200μL 1%硝酸溶液、50μL 1%硝酸钾溶液,此时香兰素特征拉曼信号最强,有利于进行定性定量分析。本文建立的速测方法以1 149、1 497、1 575 cm-1处拉曼位移作为定性依据,以1 531 cm-1峰强度作为归一化标准,绘制1 497 cm-1处峰强度对香兰素浓度的标准曲线,在质量浓度30—300μg·mL-1内实现定量计算,线性相关系数0.9913,检出限为10μg·mL-1。在50、100和200μg·mL-13个添加水平下,回收率为80.5%—86.9%,相对标准偏差小于8.6%。【结论】通过实际样品检测并将结果与现有文献报道方法相比较发现,该方法样品前处理简单、分析时间短(单个样品分析时间约5 min),检测结果可靠,适用于对较大婴幼儿奶粉的现场快速检测,为市场监管提供了新的手段。

超临界CO_2流体色谱法分离丁香酚与异丁香酚

用超临界CO2流体色谱分离丁香酚与异丁香酚两个双键位置异构体。以分离度为指标,考察改性剂、柱压、柱温3个因素对分离的影响,优化使用硅胶色谱柱和氰基色谱柱分离丁香酚与异丁香酚的色谱条件。结果表明,使用氰基柱的分离效果更好,异丁香酚的顺、反异构体也得到分离。在紫外检测波长283nm、流动相流速1.5ml/min的条件下,进一步考察进样量对分离的影响,最终确定分离丁香酚、异丁香酚的色谱条件为氰基柱(250mm×4.6mm,5μm),改性剂为体积分数8%的甲醇、柱温40℃、柱压8MPa、进样质量体积10μl、样品质量浓度43.7mg/ml。此时分离度2.41,分离时间大约为7min。

同位素稀释-气相色谱串联质谱法测定饲料中指示性多氯联苯

建立了气相色谱-串联质谱法(GC-MS/MS)测定动物饲料中6种指示性多氯联苯的痕量分析方法。样品中的多氯联苯经溶剂加速萃取,用44%酸性硅胶柱脱脂和复合硅胶柱净化,气相色谱-串联质谱法分析。采用DB-5MS毛细管柱分离,电子轰击电离源(EI)电离,多反应监测模式下(MRM)检测,同位素稀释法进行定量分析。结果表明,方法的线性范围为0.1～500.0 ng/m L,相关系数(R^2)均大于0.999,平均相对响应因子(RRF)为1.08～1.21;定量限为5.5～9.2 pg/g,样品添加回收率为92.8%～109.7%,RSD为1.6%～14.8%;定量内标的回收率为32.6%～90.2%。应用此方法对北京市周边地区采集的10个配合饲料样品进行检测,6种指示性PCBs均有检出,其中PCB28和PCB52为优势单体,总浓度范围为54.7～191.7 pg/g,远低于我国国标饲料限量标准(10μg/kg)。

毛细管气相色谱法测定聚氯乙烯食品包装中的氯乙烯单体

研究采用毛细管气相色谱法检测聚氯乙烯薄膜中残留的氯乙烯单体,并用气相色谱质谱法进行确证。样品中的氯乙烯单体采用静态顶空技术提取,利用极性毛细管气相色谱柱进行分离并结合氢火焰离子化检测器进行高灵敏度检测。氯乙烯单体在0.05～0.2 mg/L的浓度范围内有较好的线性关系,相关系数为0.999,相对标准偏差在3.1%以内,检测低限为0.5 mg/kg,该方法具有较好的检测精密度和灵敏度。

卵巢上皮性癌组织中细胞周期素B1和CDK1的表达

目的:探讨卵巢上皮性癌组织中细胞周期素B1(CyclinB1)和细胞周期蛋白依赖性激酶1(CDK1)的表达及其意义。方法:应用免疫组化SP法检测20例正常卵巢组织、20例卵巢良性上皮性肿瘤组织、40例卵巢上皮性癌组织中CyclinB1和CDK1蛋白的表达。结果:①卵巢上皮性癌组织中CyclinB1和CDK1蛋白的阳性表达率分别为77.5%和90.0%,良性卵巢上皮肿瘤组织分别为25.0%和35.0%,正常卵巢组织分别为5.0%和10.0%,3者相比差异有统计学意义(χ2=33.036,39.568;P<0.001)。②CyclinB1蛋白的表达与卵巢上皮性癌FIGO分期、组织分化和淋巴结转移有关(P<0.05),CDK1蛋白的表达与卵巢上皮性癌临床病理特征无关。结论:CyclinB1和CDK1蛋白在卵巢上皮性癌组织中存在异常高表达,可能在卵巢上皮性癌的早期恶变过程中发挥重要作用。

《高级语言程序设计》探究式教学设计研究

本文介绍探究式教学法在大学《高级语言程序设计》课程中运用的指导原则。并通过具体案例,介绍了探究式教学的教学过程。通过与传统教学的比较,分析了探究式在程序设计课程中运用的必要性。