成年和幼年大鼠海马微环境星形胶质细胞对神经干细胞增殖的作用

目的 探讨成年和幼年大鼠海马微环境中星形胶质细胞对神经干细胞(NSCs)增殖的作用及其机制。方法 分别取出生后1 d及30周的雌性SD大鼠各5只,分离培养海马星形胶质细胞;孕15 d SD大鼠1只分离培养胚胎海马NSCs;收取星形胶质细胞条件培养基(CM)用于培养NSCs。应用流式细胞术和CCK-8检测星形胶质细胞CM培养下NSCs增殖情况;收取星形胶质细胞CM进行质谱分析筛选神经发生相关的差异表达蛋白集落刺激因子1 (CSF-1);应用Western blotting和ELISA验证质谱结果;应用免疫荧光、流式细胞术和CCK-8等技术检测不同浓度CSF-1重组蛋白(20μg/L、100μg/L、1 mg/L及5 mg/L)处理后NSCs增殖情况。结果 与成年组海马星形胶质细胞CM相比,幼年组星形胶质细胞CM可促进NSCs增殖(P<0.01);与幼年组海马星形胶质细胞CM相比,成年组海马中CSF-1表达明显上调(P<0.01);20μg/L CSF-1可促进NSCs增殖(P<0.01),5 mg/L CSF-1明显抑制NSCs增殖(P<0.01)。结论 随着年龄增长,海马微环境中星形胶质细胞分泌CSF-1增加,可调控NSCs增殖。