槐耳颗粒对索拉非尼耐药的肝细胞癌细胞凋亡的影响研究

目的探讨槐耳颗粒对索拉非尼耐药的肝细胞癌(HCC)细胞生长的抑制作用及其分子机制。方法利用梯度浓度槐耳颗粒处理HCC细胞,分析槐耳颗粒对索拉非尼耐药的HCC细胞增殖、迁移和侵袭的效果。采用生物信息学手段分析微小RNA-31-5p(miR-31-5p)与sprouty相关EVH1域蛋白1(SPRED1)的可能互作关系。采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测HCC细胞中miR-31-5p、SPRED1的表达;采用CCK-8、克隆形成、划痕愈合、Transwell以及流式细胞术实验分别检测细胞活力、增殖、迁移、侵袭和凋亡;采用RNA免疫沉淀(RIP)实验和双荧光素酶实验验证miR-31-5p与SPRED1的结合关系。结果槐耳颗粒可以显著抑制索拉非尼耐药的HCC细胞增殖、迁移和侵袭,并诱导细胞凋亡。生物信息学分析发现miR-31-5p在HCC中高表达,而槐耳颗粒可以下调miR-31-5p的表达,抑制索拉非尼耐药的HCC细胞的增殖和转移,并诱导细胞凋亡;miR-31-5p可靶向抑制SPRED1的表达。SPRED1在HCC中表达下调,过表达SPRED1可以逆转miR-31-5p过表达对索拉非尼耐药的HCC增殖和转移的促进作用。结论槐耳颗粒通过miR-31-5p/SPRED1轴抑制索拉非尼耐药的HCC转移,表明槐耳颗粒有潜力作为治疗HCC的新型药物。

血清微RNA-429、肿瘤坏死因子受体相关因子6与肝癌肝动脉化疗栓塞术灵敏度相关性及槐耳颗粒干预作用研究

目的 探讨血清微RNA-429(miR-429)、肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)与肝癌肝动脉化疗栓塞术(TACE)灵敏度相关性及槐耳颗粒干预作用。方法 选取2016年1月至2021年1月唐山市工人医院收治的80例肝癌病人,采用电脑随机数字表法按照随机、平行、对照原则分为对照组和观察组,各40例。两组均给予TACE治疗,对照组术后1 d起口服甲苯磺酸索拉非尼片,观察组在对照组基础上,于术前1个月及术后3 d开始口服槐耳颗粒,术后3个月评估疗效,比较两组治疗前、术后1个月、术后3个月血清miR-429、TRAF6蛋白表达,应用Spearman分析治疗前后血清miR-429、TRAF6蛋白变化与灵敏度关系,并比较不同灵敏度病人治疗前血清miR-429、TRAF6蛋白变化,采用受试者操作特征(ROC)曲线及曲线下面积(AUC)分析血清miR-429、TRAF6蛋白治疗前后变化预测治疗灵敏度的价值,Pearson分析血清miR-429与TRAF6蛋白关系。结果 观察组总有效率为95.00%,高于对照组80.00%,差异有统计学意义(P<0.05);观察组术后1个月、术后3个月血清miR-429(0.42±0.11、0.51±0.13)高于对照组(0.33±0.09、0.34±0.10)、TRAF6蛋白(2.49±0.65、2.02±0.57)低于对照组(3.30±0.76、3.18±0.69)(P<0.05);观察组血清miR-429、TRAF6蛋白术后1个月与治疗前差值、术后3个月与治疗前差值大于对照组(P<0.05);血清miR-429、TRAF6蛋白术后1个月与治疗前差值、术后3个月与治疗前差值和灵敏度呈正相关(P<0.05);血清miR-429、TRAF6蛋白术后1个月与治疗前差值、术后3个月与治疗前差值:敏感>一般>较差(P<0.05);血清miR-429、TRAF6蛋白术后1个月与治疗前差值预测敏感的AUC分别为0.78、0.74;治疗前血清miR-429与TRAF6蛋白呈负相关(P<0.05)。结论 血清miR-429、TRAF6与肝癌TACE灵敏度相关,槐耳颗粒可提高miR-429表达,降低TRAF6蛋白,增强肝癌TACE灵敏度,提高疗效。

老年晚期恶性梗阻性黄疸患者小肠黏膜中黏蛋白-2表达变化及不同疗法的效果

目的探讨老年晚期恶性梗阻性黄疸患者小肠黏膜中黏蛋白-2表达变化及3种姑息疗法的效果分析。方法恶性胆管梗阻患者88例,分为恶性胆管梗阻伴黄疸组56例,恶性胆管梗阻无黄疸组32例;另收集同期行胃镜检查的健康老年人30例为正常对照组。每位受试者在逆行胰胆管造影或胃镜检查时钳取8块肠黏膜组织,分别行HE染色,在透射电镜下观察肠黏膜超微结构改变,AB-PAS染色,免疫组化染色检测黏蛋白-2表达情况。根据治疗方法不同将恶性胆管梗阻伴黄疸患者分为采取Roux-en-Y吻合术(胆肠吻合组)、ERCP并胆管支架置入术(ERCP组)、PTCD组,观察治疗前后患者肝功能、体能、并发症情况。结果 HE染色显示,恶性胆管梗阻伴黄疸组患者肠黏膜绒毛完整性部分破损。电镜下观察恶性胆管梗阻伴黄疸组患者肠黏膜微绒毛变短、稀释、排列不齐,杯状细胞经复合胞吐释放出大量黏蛋白。AB-PAS染色显示,恶性胆管梗阻伴黄疸组患者肠杯状细胞数明显少于恶性胆管梗阻无黄疸组和健康对照组(P<0.05);恶性胆管梗阻无黄疸组与健康对照组之间无统计学差异(P>0.05)。免疫组化染色显示,恶性胆管梗阻伴黄疸组患者黏膜-蛋白2阳性细胞表达水平明显低于恶性胆管梗阻无黄疸组和健康对照组(P<0.05);恶性胆管梗阻无黄疸组与健康对照组之间无统计学差异(P>0.05)。术后7 d 3组患者总胆红素(TBIL)、谷丙转氨酶(ALT)、γ-谷氨酰转移酶(GT)均明显低于术前(P<0.05);3组间TBIL、ALT、γ-GT水平无统计学差异(P>0.05)。胆肠吻合组住院时间明显长于ERCP组和PTCD组(P<0.05)。ERCP组术后并发症发生率明显低于PTCD组和胆肠吻合组,PTCD组明显低于胆肠吻合组(P<0.05)。结论梗阻性黄疸患者小肠黏膜黏蛋白-2数量明显减少,是导致肠黏膜屏障损伤的主要机制之一;杯状细胞可通过复合胞吐释放大量黏蛋白-2修复受损的黏液层,维持屏障功能。老年晚期恶性梗阻性黄疸患者行ERCP胆道支架治疗在保证疗效基础上可有效降低并发症发生率,缩短住院时间。