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稳定表达CD19-FLUC-GFP的CT26细胞系的构建及鉴定
1
作者
郭雨洁
段海潇
+4 位作者
程奕宁
杨斌丰
胡翰
刘滨磊
汪洋
《生物工程学报》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第2期458-472,共15页
实体瘤缺乏明确的嵌合抗原受体T细胞(chimeric antigen receptor T-cell,CAR-T)治疗靶点。因此,通过慢病毒将已经明确的靶点分子CD19带入实体瘤细胞系,研究CD19 CAR-T细胞对其的杀伤,能够为CAR-T细胞针对实体瘤的治疗提供潜在的支撑。...
实体瘤缺乏明确的嵌合抗原受体T细胞(chimeric antigen receptor T-cell,CAR-T)治疗靶点。因此,通过慢病毒将已经明确的靶点分子CD19带入实体瘤细胞系,研究CD19 CAR-T细胞对其的杀伤,能够为CAR-T细胞针对实体瘤的治疗提供潜在的支撑。本研究利用三质粒慢病毒系统构建了稳定表达CD19、萤火虫荧光素酶(firefly luciferase,FLUC)和绿色荧光蛋白(green fluorescent protein, GFP)的结肠癌CT26细胞系CT26-CD19-FLUC-GFP。该细胞系与CT26细胞系的生长活性一致。通过流式细胞术检测不同代次CT26-CD19-FLUC-GFP细胞,证实了CT26-CD19-FLUC-GFP细胞连续传代至第5、10、22代后CD19及GFP的稳定表达。进一步证实,连续传代至第22代的CT26-CD19-FLUC-GFP细胞中的CD19 mRNA及FLUC表达水平显著高于对照组CT26细胞。与T细胞相比,CD19CAR-T细胞能够显著杀伤CT26-CD19-FLUC-GFP细胞及MC38-CD19细胞。CT26-CD19-FLUC-GFP细胞腹腔植入小鼠体内1周后,通过活体成像仪可以检测到腹腔区域的FLUC表达。上述结果表明,成功构建了稳定表达CD19-FLUC-GFP的CT26细胞系,且该细胞系能够被CD19 CAR-T细胞特异性杀伤。
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关键词
CD19
萤火虫荧光素酶
CT26细胞
嵌合抗原受体T细胞(CAR-T)
慢病毒
原文传递
溶瘤病毒联合CAR-T细胞治疗实体瘤研究进展
2
作者
段海潇
程奕宁
+2 位作者
汪洋
胡翰
刘滨磊
《生命科学》
CSCD
北大核心
2023年第11期1462-1474,共13页
嵌合抗原受体修饰的T细胞(chimeric antigen receptor T cells,CAR-T)疗法属于肿瘤免疫治疗的范畴。该疗法在血液系统恶性肿瘤治疗中表现优异,但在实体瘤治疗中存在诸多挑战。近年来,溶瘤病毒(oncolytic viruses,OVs)在针对黑色素瘤、...
嵌合抗原受体修饰的T细胞(chimeric antigen receptor T cells,CAR-T)疗法属于肿瘤免疫治疗的范畴。该疗法在血液系统恶性肿瘤治疗中表现优异,但在实体瘤治疗中存在诸多挑战。近年来,溶瘤病毒(oncolytic viruses,OVs)在针对黑色素瘤、脑胶质瘤等实体瘤适应证的临床试验中展现出良好的疗效。溶瘤病毒一方面选择性地在肿瘤细胞中复制杀伤肿瘤细胞,另一方面通过激活机体自身的免疫系统发挥抗肿瘤作用。因此,溶瘤病毒与免疫检查点抑制剂、肿瘤浸润淋巴细胞疗法(tumor infiltrating lymphocytes,TIL)等免疫疗法的联合应用也在广泛开展。目前研究表明,溶瘤病毒不仅能够增加CAR-T细胞的抗肿瘤活性,而且通过传递肿瘤相关抗原或特异性抗原来增强CAR-T细胞对肿瘤的杀伤作用,同时溶瘤病毒还可以帮助CAR-T细胞克服免疫抑制性的肿瘤微环境。两种疗法的联合应用在临床前研究中展现出了良好的疗效和安全性,能够解决CAR-T在实体瘤治疗领域的瓶颈,具有广阔的临床转化前景。本文就溶瘤病毒与CAR-T细胞联合治疗实体瘤的药效及相关机制研究展开论述。
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关键词
溶瘤病毒
CAR-T细胞
联合治疗
实体瘤
肿瘤微环境
原文传递
题名
稳定表达CD19-FLUC-GFP的CT26细胞系的构建及鉴定
1
作者
郭雨洁
段海潇
程奕宁
杨斌丰
胡翰
刘滨磊
汪洋
机构
湖北工业大学生物工程与食品学院
武汉滨会生物科技股份有限公司
出处
《生物工程学报》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第2期458-472,共15页
基金
国家自然科学基金(32270969,82001758)。
文摘
实体瘤缺乏明确的嵌合抗原受体T细胞(chimeric antigen receptor T-cell,CAR-T)治疗靶点。因此,通过慢病毒将已经明确的靶点分子CD19带入实体瘤细胞系,研究CD19 CAR-T细胞对其的杀伤,能够为CAR-T细胞针对实体瘤的治疗提供潜在的支撑。本研究利用三质粒慢病毒系统构建了稳定表达CD19、萤火虫荧光素酶(firefly luciferase,FLUC)和绿色荧光蛋白(green fluorescent protein, GFP)的结肠癌CT26细胞系CT26-CD19-FLUC-GFP。该细胞系与CT26细胞系的生长活性一致。通过流式细胞术检测不同代次CT26-CD19-FLUC-GFP细胞,证实了CT26-CD19-FLUC-GFP细胞连续传代至第5、10、22代后CD19及GFP的稳定表达。进一步证实,连续传代至第22代的CT26-CD19-FLUC-GFP细胞中的CD19 mRNA及FLUC表达水平显著高于对照组CT26细胞。与T细胞相比,CD19CAR-T细胞能够显著杀伤CT26-CD19-FLUC-GFP细胞及MC38-CD19细胞。CT26-CD19-FLUC-GFP细胞腹腔植入小鼠体内1周后,通过活体成像仪可以检测到腹腔区域的FLUC表达。上述结果表明,成功构建了稳定表达CD19-FLUC-GFP的CT26细胞系,且该细胞系能够被CD19 CAR-T细胞特异性杀伤。
关键词
CD19
萤火虫荧光素酶
CT26细胞
嵌合抗原受体T细胞(CAR-T)
慢病毒
Keywords
CD19
firefly luciferase(FLUC)
CT26 cells
chimeric antigen receptor T-cell(CAR-T)
lentivirus
分类号
R735.35 [医药卫生—肿瘤]
原文传递
题名
溶瘤病毒联合CAR-T细胞治疗实体瘤研究进展
2
作者
段海潇
程奕宁
汪洋
胡翰
刘滨磊
机构
湖北工业大学生物工程与食品学院
武汉滨会生物科技股份有限公司
出处
《生命科学》
CSCD
北大核心
2023年第11期1462-1474,共13页
基金
国家自然科学基金项目(82001758)。
文摘
嵌合抗原受体修饰的T细胞(chimeric antigen receptor T cells,CAR-T)疗法属于肿瘤免疫治疗的范畴。该疗法在血液系统恶性肿瘤治疗中表现优异,但在实体瘤治疗中存在诸多挑战。近年来,溶瘤病毒(oncolytic viruses,OVs)在针对黑色素瘤、脑胶质瘤等实体瘤适应证的临床试验中展现出良好的疗效。溶瘤病毒一方面选择性地在肿瘤细胞中复制杀伤肿瘤细胞,另一方面通过激活机体自身的免疫系统发挥抗肿瘤作用。因此,溶瘤病毒与免疫检查点抑制剂、肿瘤浸润淋巴细胞疗法(tumor infiltrating lymphocytes,TIL)等免疫疗法的联合应用也在广泛开展。目前研究表明,溶瘤病毒不仅能够增加CAR-T细胞的抗肿瘤活性,而且通过传递肿瘤相关抗原或特异性抗原来增强CAR-T细胞对肿瘤的杀伤作用,同时溶瘤病毒还可以帮助CAR-T细胞克服免疫抑制性的肿瘤微环境。两种疗法的联合应用在临床前研究中展现出了良好的疗效和安全性,能够解决CAR-T在实体瘤治疗领域的瓶颈,具有广阔的临床转化前景。本文就溶瘤病毒与CAR-T细胞联合治疗实体瘤的药效及相关机制研究展开论述。
关键词
溶瘤病毒
CAR-T细胞
联合治疗
实体瘤
肿瘤微环境
Keywords
oncolytic virus
CAR-T cells
combination treatment
solid tumor
tumor microenvironment
分类号
R730.5 [医药卫生—肿瘤]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
稳定表达CD19-FLUC-GFP的CT26细胞系的构建及鉴定
郭雨洁
段海潇
程奕宁
杨斌丰
胡翰
刘滨磊
汪洋
《生物工程学报》
CAS
CSCD
北大核心
2024
0
原文传递
2
溶瘤病毒联合CAR-T细胞治疗实体瘤研究进展
段海潇
程奕宁
汪洋
胡翰
刘滨磊
《生命科学》
CSCD
北大核心
2023
0
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