同种异体骨髓间充质干细胞输注对MRL/lpr狼疮鼠肾脏CXCL12/CXCR4表达的影响

背景:趋化因子CXCL12及其受体CXCR4在狼疮肾炎的发病中起到一定作用,探究骨髓间充质干细胞对狼疮小鼠肾脏CXCL12/CXCR4表达的影响对于进一步研究狼疮肾炎的发病机制以及骨髓间充质干细胞对狼疮肾炎的治疗机制有一定意义。目的:探讨同种异体骨髓间充质干细胞输注对MRL/lpr狼疮鼠外周血和肾脏CXCL12/CXCR4表达的影响。方法:分离培养C57BL/6小鼠骨髓间充质干细胞,扩增至第3代,细胞浓度为1×10^(9) L^(-1)。选取四五周龄雌性MRL/lpr小鼠15只,分为MRL/lpr组(未进行尾静脉输注)、PBS组(12周龄末注射PBS)、骨髓间充质干细胞组(12周龄末注射骨髓间充质干细胞),每组5只,另选取5只C57BL/6小鼠为正常对照。各组小鼠在20周龄末处死,采用ELISA法检测各组小鼠外周血血浆中CXCL12的表达;流式细胞分析外周血、肾脏中B淋巴细胞表面CXCR4的表达;免疫组化染色观察肾脏中CXCL12的表达;苏木精-伊红染色观察肾脏病理变化。结果与结论:(1)与C57BL/6组相比,MRL/lpr组狼疮鼠外周血血浆和肾脏中CXCL12表达增高,且外周血以及肾脏B淋巴细胞表面CXCR4的表达均增高;(2)与PBS组相比,骨髓间充质干细胞组狼疮鼠外周血血浆和肾脏中CXCL12表达降低,且外周血以及肾脏B淋巴细胞表面CXCR4的表达均降低;(3)苏木精-伊红染色观察输注骨髓间充质干细胞后狼疮鼠肾脏炎症改善;(4)结果表明,MRL/lpr狼疮鼠肾脏中存在CXCL12/CXCR4表达异常,骨髓间充质干细胞输注可能通过影响CXCL12/CXCR4的表达从而起治疗作用。

骨髓间充质干细胞输注对MRL/lpr狼疮鼠B淋巴细胞CXCR4表达的影响

目的:研究骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMMSCs)输注对狼疮鼠血浆C3、IgG浓度及B细胞、浆细胞表面CXCR4表达的影响,分析BMMSCs改善系统性红斑狼疮疾病活动的机制。方法:分离培养C57BL/6小鼠的BMMSCs,并对MRL/lpr狼疮鼠进行尾静脉输注。实验分为C57BL/6组(C57BL/6小鼠未进行尾静脉输注)、MRL/lpr组(MRL/lpr鼠未进行尾静脉输注)、BMMSCs组(MRL/lpr鼠12周龄注射BMMSCs)和PBS组(MRL/lpr鼠12周龄注射PBS)。在20周末取小鼠的外周血、骨髓、脾脏进行流式细胞分析,检测B细胞、浆细胞表面CXCR4表达;同时取4组血浆,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测C3、IgG浓度。取小鼠肾脏组织行苏木精伊红(HE)染色。结果:①MRL/lpr组较C57BL/6组小鼠血浆C3浓度明显降低、IgG浓度明显增高(P均<0.01);MRL/lpr组较C57BL/6组小鼠B细胞表面CXCR4的表达在外周血明显下降,在骨髓和脾脏明显升高(P均<0.01);MRL/lpr组小鼠骨髓(P<0.05)及脾脏(P<0.01)浆细胞表面CXCR4表达明显高于C57BL/6小鼠。②BMMSCs组较PBS组、MRL/lpr组C3浓度明显升高、IgG浓度明显降低(P均<0.01);BMMSCs组较PBS组B细胞表面CXCR4表达在外周血明显增加(P<0.01),在骨髓(P<0.01)和脾脏(P<0.05)明显下降,较MRL/lpr组在骨髓和脾脏均明显下降(P均<0.01)。③BMMSCs组较PBS组、MRL/lpr组浆细胞表面CXCR4表达在骨髓和脾脏均明显降低(P均<0.05)。④肾脏HE染色提示输注BMMSCs后狼疮鼠肾脏炎症改善。结论:BMMSCs输注可调节B细胞、浆细胞表面CXCR4的表达,改善MRL/lpr鼠病情活动指标。