Oct4B1在结直肠癌干细胞中的表达及意义

目的:探讨胚胎干细胞转录因子Oct4的亚型Oct4B1在结直肠癌干细胞中的表达及其可能的作用。方法:以结直肠癌细胞株SW480细胞采用悬浮培养法培养出的3D微球体及其亲本细胞SW480为研究对象,采用细胞分化实验、细胞软琼脂克隆实验、流式细胞技术检测干细胞标记物CD133、CD44的表达以验证3D微球体是否富集肿瘤干细胞(CSCs),实时荧光定量PCR(RT-q PCR)检测两种细胞Oct4B1 mRNA表达水平。结果:3D微球体具有分化为普通肿瘤细胞的能力,相对于亲本细胞,3D微球体体外克隆形成能力明显增强(P<0.01),干细胞标记物CD133、CD44明显高表达(P<0.01),Oct4B1 mRNA表达水平明显增高(P<0.01)。结论:干细胞调控因子Oct4的亚型Oct4B1在富集结直肠癌CSCs的3D微球体中表达明显增高,其可能参与结直肠癌CSCs的调控。

上皮间质转化在结直肠癌肿瘤干细胞富集过程中的作用观察

目的探讨悬浮培养法富集结直肠癌肿瘤干细胞(CSCs)的过程是否与诱导上皮间质转化(EMT)有关。方法以采用悬浮培养法培养出的结直肠癌SW620细胞3D微球体及其亲本细胞SW620为研究对象。采用流式细胞技术、Western blotting检测CSCs标记物CD44、Ep-CAM的表达,并行软琼脂克隆实验、NOD/SCID小鼠成瘤实验,以验证3D微球体是否富集CSCs;采用Western blotting检测EMT标记物E-钙黏蛋白(E-Ca)、N-钙黏蛋白(N-Ca)及波形蛋白(Vim)在3D微球体细胞及亲本SW620细胞中的表达差异。结果与亲本SW620细胞比较,3D微球体细胞软琼脂克隆形成能力明显增强(P<0.01),NOD/SCID小鼠成瘤能力明显提高,CD44+细胞百分比增加,Ep-CAM蛋白表达量明显增高(P<0.01),上皮细胞标记物E-Ca表达明显降低(P<0.01),而间质细胞标记物N-Ca和Vim表达明显增高(P<0.01)。结论悬浮培养法富集结直肠癌CSCs可能与诱导EMT有关。

Twist1在结直肠癌多药耐药中的作用机制

目的探讨Twist1在结直肠癌多药耐药中的作用机制。方法建立人结直肠癌耐奥沙利铂细胞株(SW620/OxR),构建带G418抗性的Twist1-shRNA质粒转染SW620/OxR细胞作为实验组,同时,设置转染带G418抗性阴性对照质粒的SW620/OxR细胞作为阴性对照组,并在转染成功后用G418筛选建立稳定转染细胞株。采用实时荧光定量PCR和Western blot法检测SW620/OxR细胞中Twist1基因和蛋白的表达,采用流式细胞术间接法检测细胞中Twist1、p-STAT3、P-gp、Survivin蛋白变化,Western blot法检测两组细胞Twistl、STAT3、p-STAT3蛋白表达变化。结果 Twist1-shRNA干扰质粒能够明显降低SW620/OxR细胞Twist1 mRNA及蛋白水平。且实验组的E-cadherin表达水平明显降低,vimentin表达水平明显升高。采用流式细胞术检测肿瘤细胞凋亡,阴性对照组细胞凋亡率为5.08%,实验组则明显增高至30.69%。流式细胞术间接法检测实验组中Pgp、Survivin、p-STAT3及Twist1阳性率分别为5.25%、1.93%、2.51%、3.58%,阴性对照组中P-gp、Survivin、p-STAT3及Twist1阳性率分别增加至21.98%、22.36%、19.42%、53.68%,二者差异有统计学意义(P<0.01)。实验组Twist1、STAT3、p-STAT3蛋白相对表达量明显低于阴性对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。结论 Twist1可能是结直肠癌多药耐药机制中的关键因子,其可能通过逆向调控STAT3信号通路发挥作用。

病变主要位于大网膜的腹膜恶性间皮细胞瘤1例

患者男,58岁,因＂腹胀、乏力并伴有咳嗽1月＂入院。1月前,患者无明显诱因出现腹胀,腹胀呈进行性加重,伴有乏力及咳嗽,咳嗽为刺激性干咳,夜间偶感发热、盗汗,无反酸、嗳气、恶性及呕吐等。患者发病以来精神、饮食差,体质量3个月减轻约10 kg。既往否认肝炎、结核及肿瘤等病史。入院查体：T 36.7℃、P 110次/min、R 20次/min、BP107／85mmHg。

结肠损伤修补(吻合)外置治疗26例体会

目的 探讨结肠损伤修补 (吻合 )外置术的应用价值。方法 对 1993年 3月至 2 0 0 0年 9月行结肠损伤修补 (吻合 )外置术治疗 2 6例病人临床资料进行总结分析。结果 治愈率 6 9.2 %。 2 6例中 ,发生粘连性不全性肠梗阻 2例 ,修补处肠瘘2例 ,外置肠管回缩 1例 ,切口感染 4例。结论 损伤结肠行修补 (吻合 )外置术安全 ,并发症低 ,对禁忌一期手术修补 (吻合 )

腹会阴联合直肠癌根治术(Miles)后会阴部肿块八例诊治体会

目的 探讨腹会阴联合直肠癌根治术 (Miles)后会阴肿块的诊治经验。方法 对 1998年 3月至 2 0 0 0年 12月 8例Miles术后会阴肿块临床资料进行总结分析。结果 8例中再次手术前确诊 4例 ,均为细胞学穿刺检查确诊 ;行肿块切除手术7例 ,术后随访 3～ 30mo ,10mo后再复发 1例 ;失访 1例 ;余均仍存活 ,最长随诊 30mo无复发。线头清除术 1例 ,3mo后复诊仍有肿块 ,确诊为复发。结论 Miles术后会阴部痛性肿块一般为肿瘤局部复发表现 。

姜黄素通过抑制STAT3通路调控人结肠癌耐奥沙利铂细胞株的耐药性

目的:探讨姜黄素(Cur)对人结肠癌耐奥沙利铂(Oxa)细胞株(SW620/OxR)的逆转耐药作用及其机制是否与抑制STAT3信号通路有关。方法:采用WST-1试剂检测Cur对SW620/OxR细胞株的半数抑制(IC50)浓度,选择IC50低一浓度梯度的Cur+2μmol/L Oxa作用于SW620/OxR细胞48 h(称为实验组),与仅加入2μmol/L的Oxa对照组比较,1采用流式细胞术检测细胞凋亡;2采用Western blot检测STAT3活化标志磷酸化STAT3(P-STAT3)蛋白及其下游耐药相关靶分子P糖蛋白(P-gp)的表达情况。结果:Cur对SW620/OxR细胞的IC50浓度为18.9μmol/L;实验组与对照组比较:1细胞凋亡率由(5.08±1.82)%上升到(30.69±2.94)%,实验组细胞凋亡率明显高于对照组(P<0.05);2P-STAT3及P-gp表达量均明显受抑制(P<0.05)。结论:Cur具有调控人结肠癌耐药细胞株耐药性的作用,可能与抑制STAT3信号通路,降低P-gp表达有关。

6例咳嗽致腹壁血肿报道

自发性腹壁血肿少见，老年人多发，临床表现为急腹诊，易导致漏诊、误诊［1］。该病早期不被重视，部分患者未得到及时诊治而致严重出血、休克甚至死亡［2］。现就本科收治的6例腹壁血肿患者，现报道如下。 1临床资料 6例患者，男4例，女2例，年龄60～70岁，平均66．2岁，发病到就诊时间1～4d，平均住院11d。6例中5例有高血压病史；6例均无糖尿病、肝硬化病史；无口服抗凝药物病史，家族中无血液系统疾病史。

双吻合技术在中低位直肠癌保肛手术中的临床应用

目的:探讨双吻合技术(double stapling technique,DST)在中低位直肠癌保肛手术(sphincter-reserving operation,SPO)中的应用价值及并发症的防治。方法:对比分析采用DST者32例(研究组)与采用单吻合技术者(single stapling technique,SST)43例(对照组)两组患者临床病理指标、术后并发症及肿瘤复发情况。结果:全组患者手术顺利,无手术死亡。两组患者在术后3个月和6个月时的排便功能比较差异有统计学意义(P<0.05),但1年后两组大部分患者排便功能基本正常。DST组术后发生吻合口瘘3例(9.38%),吻合口狭窄4例(12.5%),吻合口出血1例(3.13%),局部复发2例(6.25%);SST组术后发生吻合口瘘2例(4.65%),吻合口狭窄3例(6.98%),吻合口出血2例(4.65%),局部复发2例(4.65%)。结论:DST在中低位直肠癌手术治疗中是有效、安全的,能够提高中低位直肠癌保肛手术成功率,改善患者生存质量。

涂片细胞学检查在直肠癌诊断中的意义

目的 探讨细胞学检查在诊断直肠癌中的价值。方法 对 1998年 1月至 2 0 0 1年 11月 185例直肠癌患者 ,术前对直肠肿块行涂片组、活检组、活检组加涂片组检查 ,比较各组诊断阳性率。结果 活检组阳性率 6 4 .4 % ,涂片组 38.1% ,活检加涂片组 91.8% ,差异均有显著性 (P <0 .0 5或P <0 .0 1)。结论 涂片细胞学检查可作直肠癌常规诊断方法 ,结合活检 。

罕见非开放性腹腔内气性坏疽死亡1例临床分析

对于开放性创伤并发气性坏疽有成功诊治经验,非开放性损伤致气性坏疽缺少诊治经验积累。通过对非开放性腹腔内气性坏疽罕见病例报道,应引起普通外科医生关注,非开放性腹腔内气性坏疽患者术前短时间内确诊困难,病情进展快,术中处理困惑,术中能否使用过氧化氢溶液行腹腔内冲洗,从而使患者获益，值得探讨。

大肠癌患者血清IAP、sIL-2R和IL-12变化

[目的]探讨检测血清IAP、sIL鄄2R和IL鄄12含量在大肠癌的辅助诊断、预后判断中的临床意义。[方法]采用单向免疫扩散法和ELISA法分别检测30例健康正常人及32例大肠癌患者手术前、后的血清IAP、sIL鄄2R和IL鄄12水平。[结果](1)大肠癌患者手术前血清IAP、sIL鄄2R水平均明显高于对照组(P<0.001和P<0.01),晚期组血清IAP、sIL鄄2R水平明显高于早期组(P<0.02和P<0.05),IAP与sIL鄄2R水平呈显著正相关(r=0.987,P<0.001);大肠癌患者血清IL鄄12水平明显低于对照组(P<0.05)。(2)串联IAP、sIL鄄2R两指标筛检大肠癌的敏感性为78.1%,特异性为93.33%,并联两指标筛检大肠癌,其敏感性为93.75%,特异性为73.3%。(3)手术后患者血清IAP、sIL鄄2R水平均明显低于手术前(P<0.001),早期组下降有明显差异性(P<0.001),而晚期组下降不明显(P>0.1);患者术后血清IL鄄12水平明显比术前升高(P<0.02),早期组上升显著(P<0.001),晚期组上升不明显(P>0.05)。[结论](1)检测患者血清IAP、sIL鄄2R水平对大肠癌的辅助诊断、病情判断、手术治疗和预后观察均有较高的临床价值。(2)联合检测血清IAP、sIL鄄2R对筛检大肠癌患者具有较高的敏感性。(3)血清IAP、sIL鄄2R和IL鄄12可作为指导大肠癌患者免疫学治疗较客观的指标。

右半结肠癌淋巴结转移规律与手术范围的临床研究

目的研究右半结肠癌肿瘤浸润与淋巴结转移规律,为早期右半结肠癌手术范围的改进提供依据。方法前瞻性收集根治性切除24例右半结肠腺癌患者的病理资料,采用淋巴结显示技术(LRT)检获手术标本的淋巴结;HE及CK20免疫组化法检测淋巴结转移情况,分析不同分期各站各组淋巴结转移的差异。结果 24例标本共检获淋巴结492个,平均20.5个/例。HE检查转移率41.6%(11/24),淋巴结转移度12.4%(61/492);CK20免疫组化染色检查转移率66.7%(16/24),淋巴结转移度17%(87/492)。随着浸润深度加深,中枢方向及肠管旁淋巴结转移率及转移度均有增高趋势。肠旁淋巴结主要转移在距离肿瘤10 cm范围内。pT1期者N1、N2、N3各站中及肠旁无淋巴结转移,pT2期淋巴结转移发生在N1、N2站及肠旁10 cm以内,无一例转移至N3站及肠旁>10 cm组。结论 LRT可以明显提高淋巴结的检出数;该技术结合CK20免疫组化检测技术能较精准的检测右半结肠癌淋巴结,明确其转移规律,指导临床结肠癌的治疗;针对早期右半结肠腺癌患者(如T1、T2期者),尤其是肝曲结肠癌,可采取缩小范围的手术。

PBL教学在胃肠外科临床实习教学中的研究

目的探讨PBL教学在胃肠外科临床实习中的教学效果。方法选取我科2016年1—12月实习的120名5年制临床医学专业本科生为研究对象,将其随机分为实验组及对照组。实验组采取PBL教学方法,对照组采用传统教学方法,比较两组理论、临床技能、病例分析及医患沟通成绩。结果 PBL教学实验组理论、临床技能、病例分析及医患沟通成绩均高于对照组(P<0.05)。结论 PBL教学方法能提高临床实习生理论成绩、临床技能能力、病例分析能力及医患沟通技巧,值得临床实习教学进一步推广应用。

超声波探测系统模拟肠内容物感知神经的作用

背景:现有的人工肛门括约肌不能感知肠管内是否有肠内容物及肠内容物的状态,既往对肠内容物信号的研究未对不同结肠部位不同状态肠内容物信号进行研究。目的:比较对射式超声波信号探测系统测量新西兰兔不同大肠部位不同状态肠内容物电压信号的差异。方法:选用20只健康新西兰兔,每只兔按近结肠远端、远结肠远端、直肠远端3个部位进行分组,每组选取5个固体大便颗粒处作为测量点,用超声波信号探测系统分别测量每个测量点内固体、流体、气体、肠管空虚4种状态大便的电压信号。结果与结论:在直肠部位,除了直肠内的固体和气体比较差异无显著性意义外,其余不同状态比较差异均有显著性意义(P=0);在远结肠和近结肠内的不同状态多重比较差异均有显著性意义(P=0)。对固体和流体而言,直肠、远结肠、近结肠之间差异有显著性意义(P=0),多重比较差异亦均有显著性意义(P=0);对气体和空虚状态而言,直肠、远结肠、近结肠之间差异无显著性意义。不同的大肠部位和不同状态肠内容物之间存在交互效应(P=0)。提示对射式超声波信号探测系统具有分辨不同肠内容物"人工肠内容物感觉神经"的作用,用超声波探测不同状态肠内容物可为研究"人工肠内容物感知神经"提供一种有效方法。