金银花-连翘药对抗肠道病毒71型的初步探究

目的采用体内体外的方法初步探讨金银花-连翘(以下简称"银翘")药对提取物对肠道病毒71型的抑制作用。方法采用MTT法检测"银翘"药对提取物对Hela细胞的毒性以及抗EV71作用;采用腹腔注射20μl EV71建立感染模型,观察小鼠的一般体征,并在光学显微镜下观察心脏组织病理学变化。结果"银翘"药对提取物对Hela细胞的半数有毒浓度(TC50)为123.3 mg/ml,最大无毒浓度(TC0)为15.6 mg/ml(按生药计)。无论同时加入药物和病毒,还是药物在病毒感染后加入均能够有效抑制病毒,并呈现出一定程度上的剂量依赖关系。体内抗病毒研究显示,中、高剂量组的"银翘"药对提取物均能显著改善小鼠的不良症状和心脏组织的病理变化,效果接近利巴韦林。结论"银翘"药对提取物能有效地抑制EV71,为其临床应用提供理论依据。

干扰血红素加氧酶-1改善黑色素瘤细胞对顺铂耐药性的机制研究

目的:探讨血红素加氧酶-1(HO-1)对皮肤黑色素瘤细胞耐药性的影响并分析其分子机制。方法:采用慢病毒载体介导RNA干扰HO-1稳定低表达的恶性皮肤黑色素瘤细胞A375(KD组),用RT-PCR和Western印迹验证其干扰效率;CCK-8法检测HO-1敲减后细胞的增殖情况及对药物顺铂的敏感性变化;流式细胞术检测顺铂对细胞凋亡的影响;RT-PCR及Western印迹检测顺铂处理的HO-1稳定敲减细胞系中凋亡相关基因的变化。结果:构建了HO-1稳定低表达的A375细胞株,敲低HO-1明显抑制细胞增殖;敲低HO-1后细胞对顺铂的敏感性增加,在低浓度顺铂(0.25～6μg/m L)处理的情况下,A375-sh HO-1细胞抑制率比正常A375细胞高8倍以上;顺铂处理后,在RNA水平和蛋白水平上A375-sh HO-1细胞中凋亡相关基因Bax、active Caspase-3显著增加,并降低Bcl-2的表达。结论:RNA干扰抑制HO-1基因表达能够增强皮肤黑色素瘤细胞A375对顺铂的敏感性。

贝伐单抗联合多西环素治疗胶质瘤的疗效与机制研究

目的探讨贝伐单抗联合多西环素治疗胶质瘤的疗效与相关机制。方法以胶质瘤原代细胞为模型,分别用生理盐水、贝伐单抗和贝伐单抗联合多西环素处理胶质瘤细胞,并分为生理盐水组、贝伐单抗组和贝伐单抗联合多西环素组。采用MTS法及克隆形成实验检测各处理组细胞的增殖情况;同时利用划痕及Transwell侵袭实验,检测不同处理组细胞的迁移及侵袭能力,并在裸鼠皮下注射胶质瘤原代细胞,15天后分别用生理盐水、贝伐单抗和贝伐单抗联合多西环素进行治疗处理,观察移植瘤大小、重量差异,并进一步通过免疫组化法验证各组移植瘤中CD34及Ki67的差异。结果贝伐单抗组细胞增殖和克隆形成能力、迁移和侵袭能力明显低于生理盐水组(P<0.05),而贝伐单抗联合多西环素组抑制效果更显著且与贝伐单抗组比较,差异有统计学意义(P<0.05);贝伐单抗组处理后移植瘤的大小、重量和体积均抑制明显,与生理盐水组比较差异有统计学意义(P<0.05),而贝伐单抗联合多西环素组抑制更为明显,与贝伐单抗组比较,差异均有统计学意义(P<0.01);贝伐单抗组的CD34及Ki67表达较生理盐水组下降(P<0.01),贝伐单抗联合多西环素组下降更明显,与贝伐单抗组比较,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论贝伐单抗联合多西环素治疗胶质瘤,通过抑制细胞增殖、迁移和侵袭能力,药物产生叠加效应显著增强抗肿瘤作用,可减少肿瘤新生血管的形成,从而抑制胶质瘤的生长、重量和体积,为临床治疗胶质瘤提供了理论依据。

鸦胆子苦醇抑制黑色素瘤生长和增殖的作用机理研究

目的研究中药鸦胆子苦醇对黑色素瘤细胞增殖和凋亡的作用机制。方法采用细胞活力测定(MTS)不同浓度的鸦胆子苦醇对黑色素瘤A375细胞生长抑制率;应用PI单染及Annexin-V-FITC双染法流式细胞术分析细胞周期分布及凋亡率的变化;以DCFA-DA荧光探针标记细胞,分析活性氧簇(ROS)的产生;利用Western Blot检测Nrf2及Akt通路蛋白表达的影响。结果鸦胆子苦醇对黑色素瘤细胞的生长抑制呈剂量依赖性;鸦胆子苦醇处理A375细胞后,细胞周期阻滞在G1期,S期减少。且鸦胆子苦醇诱导细胞细胞凋亡发生;免疫沉淀检测结果表明鸦胆子苦醇处理移植Nrf2蛋白的表达,使磷酸化Akt表达减少。结论鸦胆子苦醇可抑制细胞增殖,并诱导ROS的生成及细胞凋亡发生。Akt途径的抑制可能是鸦胆子苦醇对A375细胞生长抑制及凋亡诱导的作用机制之一。因此,鸦胆子苦醇可能是潜在的抗黑色素瘤的药物。

浅谈现代医院药学发展

介绍现代医院药学需由传统的药品供应保障型,向临床药学和现代科学研究相结合的技术服务型转变,才能满足现代社会的需要。建立以病人为中心的临床药学服务体系,给医院药学学科发展提供广阔的空间。