云南烟草丛枝症病害研究 Ⅶ 激素的变化

采用植物激素ＥＬＩＳＡ测定试剂盒，对比测定了烟草感染丛枝症的病株与健株体内细胞分裂素（ｉＰＡ和ＺＲ）与生长素（ＩＡＡ）含量的变化．结果表明：生长素含量在整个发病期间健株都较高于病株，细胞分裂素含量在发病初期明显高于健株，随后呈下降趋势并趋于稳定，Ｃ／Ａ值在病程中相对处于较高水平．

云南烟草丛枝症病害研究 IV建立标准毒株

以蚜虫传染发生云南烟草丛枝症病害的烟株为材料进行组织培养，连续培育３代，以第３代组培烟苗为毒源经蚜虫传染健康烟株，提取毒源和各实验烟株的总核酸进行琼脂糖凝胶电泳．结果表明：第３代组培烟苗为毒源经蚜虫传染的烟株发病表现丛枝症，并检测到与云南烟草丛枝症病害相关的低分子量ＲＮＡ．说明与云南烟草丛枝症病害相关的病原能在寄主离体培养组织中长期保存，成功建立云南烟草丛枝症病害的标准毒株．

烟草感染丛枝病后的生理生化变化初步研究Ⅰ

烟草感染丛枝病病原后表现为典型的矮化丛枝症状．供试烟草品种Ｋ３２６以烟蚜为媒介，成功接种丛枝病病原后，分析病株与健株中与生长素（ＩＡＡ）代谢相关的锌元素含量；ＩＡＡ氧化、过氧化物酶的活性及同功酶变化，同时对抗感病相关的苯丙烷代谢关键酶苯丙氨酸氨裂解酶（ＰＡＬ）和植株解除Ｈ２Ｏ２毒害相关的过氧化氢酶活性进行测定．结果表明：感病烟株代谢发生了显著的变化，病株中锌含量降低、ＩＡＡ氧化及过氧化物酶活性增强且在聚丙烯酰胺凝胶电泳图谱上它们的同功酶谱带多于健株，ＰＡＬ的活性随接种时间的延长先升后降；过氧化氢酶的活性显著下降．另据测定，病株叶绿素含量减少而可溶性糖含量增高．

云南烟草丛枝症病害研究 Ⅺ 病原研究:类病毒问题

感染云南烟草丛枝症病害的病苗的细胞切片中观察到类似于旁壁体的质膜体，旁壁体是类病毒侵染植物形成的特征病变结构，但多次双向电泳实验均未检测到类病毒分子，质膜体的形成可能和莫笑晗等发现的与云南烟草丛枝症病害相关的稳定ＲＮＡ有密切关系，但线性开环结构和失活温度说明其不具有类病毒核酸特征．

两种烤烟夹的设计开发和应用

为解决烤烟烘烤环节人工编烟耗时费工等问题,根据夹紧机构理论,设计开发了两种烤烟夹。试验结果表明:烤烟夹夹紧力稳定,操作方便,降低了编烟劳动强度,节约了编烟用时,夹烟量为常规编杆的1～2倍,大大提高了夹烟量,提高了工作效率,降低了成本。综合其各方面性能,烤烟夹具有很强的广谱性。

一种改进的烟草丛顶病快速诊断方法

与病害特异的小分子RNA的检测是烟草丛顶病的主要诊断方法。本文报道了一种改进的与烟草丛顶病相关的小分子RNA的简便提取方法,在烟草丛顶病的快速、特异检疫中具有较好的应用前景。

不同编烟方式对烤烟烘烤质量的影响

2009年在云南省曲靖市了进行了不同编烟方式对烟叶烘烤质量的影响研究。结果表明:使用烟夹和编烟机编烟能够降低烘烤成本,提高烤后烟烟叶等级比例,增加经济效益,烤后烟外观质量指数和以烟夹的83.85最高,常规化学成分最接近优质烤烟适宜的范围,评吸综合效果以使用烟夹的烟叶最佳。综合各项指标,以烟夹编烟方式效果最佳,适宜在烟叶烘烤中推广和应用。

云南烟草丛枝症病害研究 Ⅷ 验证与烟草丛枝症病害相关的稳定RNA

来自云南省２２个县市的烟草丛枝症标本均检测到与云南烟草丛枝症病害相关的稳定ＲＮＡ，大小相当于８００ｂｐ左右的ＤＮＡ；病株的根、茎、叶、花和枯叶中含有此ＲＮＡ，种子中未检测到此ＲＮＡ；此ＲＮＡ的最大吸收峰为２６９ｎｍ；能被蛇毒磷酸二酯酶Ｉ消化，不具有类病毒结构特征，推测可能是病毒的基因组分；支持莫笑晗等对此ＲＮＡ的结构推测，即可能是有广泛内部配对、具有类似发叉结构的线性长度为１６１ｋｂ的单链ＲＮＡ．与云南烟草丛枝症病害相关的低分子量ＲＮＡ目前发现的超稳定ＲＮＡ．

云南烟草丛枝症病害研究 Ⅸ 追踪致病因子

云南烟草丛枝症病害病株的粗汁液、ＰＥＧ沉淀物、粗提纯物、酚处理物、总核酸均具有致病性．

腺病毒介导人卵泡刺激素基因在山羊乳腺上皮细胞的表达及蛋白活性分析

该研究旨在构建含人FSH基因的重组腺病毒载体,在山羊乳腺上皮细胞中进行表达,验证重组人FSH的体外生物学活性。利用AdEasy重组腺病毒系统获得pAdEasy-FSH/His重组腺病毒载体,经HEK293A细胞包装、扩增后获得重组人FSH腺病毒,感染GMEC后,检测FSH表达情况。结果表明,将获得的较高滴度的含FSH目的基因的重组腺病毒感染GMEC后,经Western blot检测GMEC细胞可以成功表达FSH蛋白;通过体外细胞活性试验验证其具备生物学活性。综上所述,腺病毒介导的羊乳腺上皮细胞表达的重组人FSH具备体外生物学活性,这为进一步在大动物乳腺表达重组FSH奠定了基础。

Wortmannin抑制Wnt/β-Catenin通路对猪卵巢颗粒细胞发育的影响

为探究PI3K通路与Wnt/β-Catenin通路在猪卵巢颗粒细胞发育中的互作关系以及调控功能,以不同浓度(DMSO,0.1,1,1.5,3,5μM)PI3K通路抑制剂Wortmannin处理体外培养猪卵巢颗粒细胞48h,CCK-8法检测猪卵巢颗粒细胞细胞活力,Western Blot法检测β-Catenin蛋白水平;5μMWortmannin处理体外培养猪卵巢颗粒细胞48h,实时定量PCR检测猪卵巢颗粒细胞内类固醇生成、激素受体和细胞凋亡相关基因的表达。结果表明,Wortmannin处理猪卵巢颗粒细胞可抑制颗粒细胞细胞增殖活力,其中3μM和5μMWortmannin,相对其他处理组,显著地(P<0.05)降低细胞增殖活力;对应的,不同浓度的Wortmannin也阻遏Wnt/β-Catenin通路,对比其他组,3μM和5μMWortmannin处理组抑制效果最显著(P<0.05);实时定量PCR检测结果表明,5μMWortmannin处理显著下调猪卵巢颗粒细胞CYP19A1(P<0.001)和CYP11A1(P<0.01)mRNA水平,抑制激素受体基因FSHR和LHCGR基因表达(P<0.05),促进Caspase3(P<0.05)和PTSG2(P<0.01)表达。综上所述,Wortmannin抑制猪卵巢颗粒细胞Wnt/β-Catenin通路,诱导细胞活力下降,促进细胞凋亡,并且阻碍激素受体表达和类固醇激素合成。

p38MAPK抑制剂SB202190对猪颗粒细胞活力的影响

p38MAPK是丝裂原活化蛋白激酶(Mitogen-activated potein kinase,MAPK)家族成员,是细胞内重要的信号转导系统之一,对细胞的生长、分化、凋亡具有重要影响及作用。为探究p38MAPK信号对猪卵巢颗粒细胞增殖和凋亡的影响及其可能作用机制,研究以体外培养的猪卵巢颗粒细胞为模型,在培养液中分别添加浓度为0、1、10、20μmol/L的p38MAPK特异性抑制剂SB202190。以免疫细胞化学染色法鉴定体外培养猪卵巢颗粒细胞,通过CCK-8法检测其增殖活性,应用Annwxin V-FITC/PI及细胞周期试剂盒染色检测细胞凋亡及细胞周期状况,以实时定量PCR检测猪卵巢颗粒细胞中凋亡、周期相关基因的相对表达水平。结果表明,添加p38APK信号抑制剂SB202190可抑制体外培养猪卵巢颗粒细胞的增殖活性,20μmol/L处理组与其他组相比呈显著性差异(P<0.05);20μmol/L SB202190添加处理未显著影响颗粒细胞的凋亡水平,而该浓度SB202190可将大部分细胞阻滞在G1/G0期,与对照组相比差异显著(P<0.05);基因相对表达水平检测显示SB202190添加可抑制Fas、FasL、CDK-4的表达,而同时促进Bcl-2、Bax、P27的表达(P<0.05),对Caspase-3的表达没显著影响(P>0.05)。综上所述,SB202190通过调控猪卵巢颗粒细胞的周期来影响其增殖作用,但对其凋亡没有影响。

香料烟细菌性斑点病的发生流行及控制技术研究

香料烟上发现的叶斑病主要在成熟或尚成熟叶片上发生,该病发病高峰期在3月下旬至4月上旬,此期间降雨和温度对病害流行影响较大。影响病害发生的主要因素还有:品种抗性及叶片成熟度等。农业措施中封顶能有效地控制细菌性斑点病,平均防效在90%以上,同时封顶后烟叶中总糖、还原糖、淀粉含量降低,烟碱含量提高,败花期为最适封顶时期。化学控制中以多宁防效较好,其次为K波尔多液可湿性微粉、农用链霉素。

熊果酸对猪精液冷冻保存效果的影响

猪精子冷冻是长久保存珍贵家猪品种遗传物质的有效手段,然而因其细胞膜结构组成的特殊性,猪精子经过冷冻后活力大不如前。熊果酸是一种天然的、具有抗氧化作用羧酸类化合物,在其他多个领域已被报道具有优异的抗氧化功能。为研究熊果酸对长白公猪冷冻精液的作用,该试验在猪精子冷冻稀释液中分别添加不同浓度梯度(0、1.0、1.4、1.6、1.8和2.0 mg/mL)的熊果酸,并检测冷冻-解冻后猪精子的活力及其他相关参数。结果表明,当添加1.6 mg/mL熊果酸提取液时,与对照组相比较,精子活力(50.27%±3.24%)显著增加(P<0.05);同时STR和VAP数值明显提高(分别为54.95%±3.35%和36.53±3.28μm/s)(P<0.05),VCL也最高(59.63±3.11μm/s)(P<0.05)。每个处理组之间VSL、LIN、ALH值无显著性差异(P<0.05)。结果表明,1.6 mg/mL熊果酸的添加可以显著提高猪冷冻精子的各项质量参数。

中尺度复杂岩体应力波传播特性的微震试验研究

采用全数字型多通道微震监测系统,对深部复杂采空区岩体和上部露天台阶絮渣岩体分别进行了现场爆破应力波传播特性试验,利用P波触发时间和传播距离组成的离散点进行线性拟合,得出应力波传播速度,结果显示深部复杂采空区岩体和上部絮渣岩体明显出现两个层状速度模型。利用应力波振幅和传播距离组成的离散点进行曲线拟合,并对应力波信号进行频谱分析和滤波处理,研究应力波的衰减特性。试验结果表明,应力波振幅随传播距离的增加而减小,且在数值上呈乘幂衰减;应力波衰减系数和应力波频率成正比,数值上呈三次多项式关系,高频成分应力波衰减更加明显。利用试验数据,分别计算出深部复杂采空区岩体和上部絮渣岩体的平均品质因子,计算结果分别为4.055和2.478,两者远小于一般原岩的岩体品质因子,说明复杂采空区和絮渣的存在对应力波的传播有很大影响。

地下多层复杂空区处理的工程实践

介绍了洛阳栾川钼业集团股份有限公司三道庄矿区多层复合空区的赋存形态、空区处理方案以及采用切割深孔区域整体崩落法一次爆破同时处理多层空区时的工程实践;切割深孔区域整体崩落法处理地下多层复杂空区的孔位布置、施工、装药、爆破及网路、施工安全管理等,对国内外同类型矿山资源的安全、合理的开发利用具有重要参考意义。

三道庄露天矿D采区多通道微震监测的可行性研究

根据三道庄露天矿的采空区分布、目前开采现状和地压特点,论述了建立全数字型多通道微震监测的必要性。根据矿山开采条件、空区分布状况,制定了微震监测系统的基本方案和基本组成框架,确定了在露天地表台阶和井下采空区联合布置传感器的监测方案,并在理论上对传感器的空间位置进行了优化分析,为进一步的微震监测系统的建立提供了依据。

露天台阶深孔切割崩落处理多层复合空区的工程实践

介绍了洛阳栾川钼业集团股份有限公司三道庄矿区多层复合空区的赋存形态、空区处理方案选择以及采用地表深孔切割崩落法一次爆破同时处理多层空区时的工程实践;地表深孔切割崩落法处理的孔位布置、施工、装药、爆破及施工安全管理等,对国内同类型矿山资源的安全、合理开发具有重要参考意义。

慧学评价:“致远”好教师团队校本化实践初探

江苏连云港市海宁小学好教师团队开展的“慧学评价”改革实践依据多元智能理论,线上基于云平台建构评价体系,线下依托“海豚争章”评价手段,引领儿童亲身实践,动手创造,自主发展与规划。

创建阳光童谣氛围,强化学生品德教育

采用多种途径实施阳光童谣的德育课程,是构建阳光童谣所寓含的小学生品德教育的内容。学校应以阳光童谣为载体进行小学生品德教育,并构建阳光童谣所寓含的小学生品德教育的内容。