猪β2m二级结构预测及同源模建

目的:研究猪β2m的结构。方法:应用EXPASY服务器(http://www.expasy.ch/tools)上的SOPMA法对β2m进行二级结构的预测,并与人的β2m的氨基酸和二级结构成分比较,在此基础上同源模建β2m的三级结构。结果:β2m二级结构成分α螺旋、β折叠、转角和无规则卷曲的数目分别为5、36、5和52,与人β2m相应二级结构的符合率分别达到100%(α螺旋)、92.3%(β折叠)、71.7%(转角)和92.3%(无规则卷曲),且二级结构的同源率要大于氨基酸的同源率。同源模建分析表明猪和人的3D结构也非常相似,只是存在个别氨基酸的差异。结论:猪和人β2m空间结构相似。

猪β2m在pMAL-p2X系统中的表达与纯化

试验分别从pH、温度、菌体密度、IPTG浓度、诱导时间等条件对b2m在pMAL-p2X的表达进行优化,表达蛋白经过Amylose树脂柱进行纯化。结果发现,b2m在pMAL-p2X的最佳表达条件为:pH=7.5、T(温度)=37℃、D600 nm=0.3、IPTG=0.5 mmol/L和t(诱导时间)=5 h;在最佳表达条件下b2m的相对表达含量可达到45%;纯化后的融合蛋白纯度达到90%以上。