基于UHPLC-QE-MS的橘荔散结丸诱导子宫肌瘤细胞凋亡的炎症机制

目的运用超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱串联质谱(UHPLC-QE-MS)技术分析橘荔散结丸的药物成分,围绕核因子-κB(NF-κB)信号通路探讨橘荔散结丸诱导子宫肌瘤细胞凋亡的炎症机制。方法①采用UHPLC-QE-MS技术分析橘荔散结丸化学成分。②培养原代人子宫肌瘤细胞,免疫组化法进行鉴定。实验分为5组,空白组常规培养,基质组加入0.05%DMSO培养,米非司酮组加入1×10-5 mol/L米非司酮含药液培养,橘荔散结丸高、低浓度组分别加入2 mg/mL和1 mg/mL橘荔散结丸含药液培养。采用流式细胞术检测子宫肌瘤细胞凋亡率,采用Western blot法检测子宫肌瘤细胞中IKKα、IKBα、p-IKBα、p65、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)蛋白表达情况,采用qPCR技术检测子宫肌瘤细胞中IKKα、IKBα、p65、TNF-α、IL-6 mRNA表达量。结果鉴别橘荔散结丸主要化学成分91个,冻干粉与中成药间共有22个。米非司酮组和橘荔散结丸高、低浓度组子宫肌瘤细胞早期凋亡率和晚期凋亡率均明显高于空白组和基质组(P均<0.05),且米非司酮组、橘荔散结丸高浓度组早期凋亡率和晚期凋亡率均明显高于橘荔散结丸低浓度组(P均<0.05),橘荔散结丸高浓度组早期凋亡率明显高于米非司酮组(P<0.05)。橘荔散结丸高浓度组和米非司酮组子宫肌瘤细胞中IKKα、p-IKBα、p65、TNF-α蛋白相对表达量均明显高于空白组和橘荔散结丸低浓度组(P均<0.05),且橘荔散结丸高浓度组和米非司酮组子宫肌瘤细胞中IL-6蛋白相对表达量均明显高于空白组(P均<0.05);橘荔散结丸高浓度组子宫肌瘤细胞中p-IKBα、p65、IL-6蛋白相对表达量均明显低于米非司酮组(P均<0.05)。米非司酮组、橘荔散结丸高浓度组、橘荔散结丸低浓度组子宫肌瘤细胞中IKKα、IKBα、p65、IL-6 mRNA相对表达量和米非司酮组、橘荔散结丸高浓度组TNF-αmRNA相对表达量均明显高于空白组(P均<0.05);橘荔散结丸高浓度组和米非司酮组IKBα、p65、IL-6 mRNA相对表达量均明显高于橘荔散结丸低浓度组(P均<0.05)。结论橘荔散结丸化学成分具有抗炎免疫调节作用,其治疗子宫肌瘤分子机制与干预肌瘤细胞微环境炎症反应密切相关。

多发性硬化患者治疗前后IL-17、IL-23、IL-27、TNF-α变化及与头颅MRI增强病灶数目的相关性探讨

目的 探究多发性硬化(Multiple sclerosis, MS)患者治疗前后IL-17、IL-23、IL-27、TNF-α变化及与头颅MRI增强病灶数目的关系。方法 选取2018年1月至2021年5月于义马煤业集团股份有限公司总医院神经内科诊断为MS患者的病人86例,观察MS患者治疗前后的IL-17、IL-23、IL-27、TNF-α水平变化,分析这些变化与头颅MRI增强病灶数目的关系。结果 (1)MS患者治疗前后的MRI增强病灶数目变化不明显(P>0.05)。(2)MS患者治疗后的IL-17、IL-23、TNF-α水平明显低于治疗前(P<0.05),而IL-27水平明显高于治疗前(P<0.05)。(3)MS患者头颅MRI增强病灶数目与IL-17、IL-23、TNF-α水平呈正相关关系(P<0.05),与IL-27水平呈负相关关系(P<0.05)。结论 MS患者的IL-17、IL-23、TNF-α水平升高,IL-27水平降低,则头颅MRI增强病灶数目增多。作为参与MS发病机制的炎性因子,IL-17、IL-23、TNF-α具有促炎性反应作用,IL-27具有炎性反应抑制作用。因此,可根据IL-17、IL-23、IL-27、TNF-α水平变化指导临床治疗。

用尼莫地平治疗脑出血后缺血性脑损伤的效果研究

目的 :探讨用尼莫地平治疗脑出血后缺血性脑损伤的临床效果。方法 :对2013年2月~2014年3月期间我院收治的84例脑出血后缺血性脑损伤患者的临床资料进行回顾性研究。将这84例患者随机分为对照组和观察组,每组各有42例患者。为对照组患者使用依达拉奉注射液进行静脉注射治疗,为观察组患者口服尼莫地平进行治疗。然后,比较两组患者的治疗效果及其不良反应的发生率。结果 :观察组患者治疗的总有效率明显高于对照组患者,二者相比差异具有显著性(P<0.05)。观察组患者不良反应的发生率明显低于对照组患者,二者相比差异具有显著性(P<0.05)。结论 :用尼莫地平治疗脑出血后缺血性脑损伤的效果显著,可有效地促进患者疾病的康复,且不良反应的发生率低。此疗法值得在临床上推广使用。

宫腔镜治疗宫腔粘连的临床效果分析

目的:观察分析宫腔镜治疗宫腔粘连的临床效果。方法:本次研究随机选择近两年来我院妇科就诊的90例宫腔粘连患者作为研究对象,采用宫腔镜对宫腔粘连组织进行切除,并在宫内放置透明质酸钠药物进行预防,防止粘连复发,患者在术后进行常规的预防感染治疗并予口服安宫黄体酮片、补佳乐进行术后处理。术后对患者的月经量以及次数、妊娠、痛经等情况进行观察分析。结果:除7例重度粘连的患者手术时是采用宫腹腔镜联合治疗外,其余患者一次宫腔镜手术成功,术后没有出现严重的并发症。随访结果显示,75例闭经患者在术后恢复月经,25例月经量减少的患者术后月经量恢复正常,40例患者在就诊前有腹痛的症状术后不存在腹痛现象,15例患者自然受孕。结论:研究结果显示,宫腔粘连患者进行宫腔镜分离术技术成熟,成功率高,除了有少数患者因为重度粘连以及有其他疾病需要在腹腔镜配合下完成外,一般的宫腔粘连可以采取宫腔镜分离术进行治疗。目前宫腔镜分离术安全性高,术中、术后无严重的并发症,成功率大,术后恢复效果良好,值得临床推广。

左氧氟沙星联合甲硝唑治疗急性盆腔炎疗效观察

目的:探讨左氧氟沙星联合甲硝唑治疗急性盆腔炎的临床疗效。方法:选取2011年1月-2014年8月我院收治的急性盆腔炎患者136例,随机分为观察组和对照组,每组68例。对照组患者给予甲硝唑治疗,观察组对照组治疗的基础上联合应用左氧氟沙星,观察结束后,对两组患者的临床治疗效果进行分析。结果:观察组患者治疗总有效率为98.5%,对照组为91.2%,组间比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。治疗期间,观察组不良反应发生率为1.5%,对照组为3.0%,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:采用左氧氟沙星联合甲硝唑治疗急性盆腔炎疗效显著。

用氯吡格雷联合阿司匹林治疗急性心肌梗死的效果分析

目的 :探讨用氯吡格雷联合阿司匹林治疗急性心肌梗死的临床效果。方法 :对2012年12月~2013年12月期间我院收治的90例急性心肌梗死患者的临床资料进行回顾性研究。我们将这90例患者随机分为观察组和对照组,每组各有45例患者。我院给对照组患者使用阿司匹林进行治疗,给观察组患者在使用阿司匹林(用法与对照组患者相同)的基础上,加用氯吡格雷进行治疗。治疗结束后,比较两组患者治疗的效果。结果 :观察组患者治疗的总有效率为93.33%。对照组患者治疗的总有效率为66.67%。观察组患者治疗的总有效率明显高于对照组患者,二者相比差异具有显著性(P<0.05)。结论:用氯吡格雷联合阿司匹林治疗急性心肌梗死效果确切。此联合用药方法可作为临床上治疗急性心肌梗死的优选方法。

宫、腹腔镜手术治疗阴道斜隔综合征4例

目的为临床医生对阴道斜隔综合征的诊治提供更准确的方法。方法回顾分析本院2011年11月～2012年7月应用宫、腹腔镜手术治疗的4例阴道斜隔综合征患者临床资料,并复习文献。结果全部患者明确诊断及准确治疗,1例患者术后短时间内妊娠,全部患者解除症状。结论宫腹腔镜联合手术既可明确阴道斜隔综合征的诊断及分型,亦可同时准确地治疗,为解除患者的症状及不孕提供了微创、安全、可靠的方法。

血浆鳞状细胞癌抗原在宫颈肿瘤中的表达

目的通过检测宫颈上皮内瘤变及不同分期宫颈癌患者血清鳞状上皮细胞癌抗原(SCC-Ag)的水平,结合临床病理特征探讨其在评估宫颈肿瘤中所起的作用。方法检测40例不同分期宫颈癌患者,20例宫颈上皮内瘤变患者治疗前后血清中的SCC-Ag水平。结果血清SCC-Ag水平与宫颈癌的病理分期有关,分期越晚,阳性率越高,同时血清SCC-Ag水平也越高。血清SCC-Ag≥4.0 ng/mL时,其表达的阳性率与盆腔淋巴结转移有关。各病理学分期患者治疗后血清SCC-Ag水平均明显低于治疗前,分期越晚,治疗后SCC-Ag表达较治疗前降低越明显,宫颈癌复发后SCC-Ag表达明显增高。结论血清SCC-Ag的表达对宫颈癌的诊断、预后评估和疗效观察有较高的临床价值。

子宫肌瘤宫腔镜电切术后肺栓塞1例

患者,女,57岁。因下腹坠胀3个月于2010年12月6日入院。病程中无阴道流血及排液,无发热、咳嗽、咳痰、胸闷、气促等。足月产2次,绝经3年。妇科检查：子宫如孕7周大小,双附件无异常。B超：宫腔实性占位约46 mm×44 mm×42 mm,符合黏膜下子宫肌瘤。患者拒绝切除子宫,2010年12月8日行宫腔镜电切术。应用OLYMPUS双极等离子宫腔电切镜及配套膨宫机，膨宫压力85-90mmHg，0．9％氯化钠为膨宫介质，流速300mL／min，液体入量：9000mL，出量8500mL。

高强度超声聚焦技术在治疗子宫腺肌病中的应用

目的应用高强度超声聚焦技术对子宫腺肌病进行超声消融治疗,探讨其治疗方法的安全性和有效性。方法应用高强度超声聚焦仪对诊断为子宫腺肌病的78例患者进行超声消融治疗。结果78例患者经过高强度超声聚焦治疗3个月后,其中52例经量增多的患者中,症状缓解45例(86.54%);72例痛经患者中69例(95.83%)痛经完全或部分缓解;78例患者中72例(92.31%)子宫体积不同程度缩小;患者平均血红蛋白浓度术前(104.16±20.49)g/L,术后3个月升至(110.65±19.15)g/L;58例CA125升高患者中,51例(87.93%)有不同程度降低。治疗过程中,多数患者无明显不适,均顺利完成手术,治疗后均无严重并发症发生。结论高强度超声聚焦技术在子宫腺肌病治疗中的应用具有较高的安全性和有效性,值得临床推广及应用。

血清HE4联合CA125检测在卵巢癌风险评估中的价值

目的通过盆腔包块患者血清HE4和CA125联合检测来评估盆腔包块患者患卵巢癌风险。以探讨HE4和CA125联合检测在卵巢癌中的诊断价值。方法用CMIA法检测130例盆腔包块患者的血清HE4水平及CA125水平,进行统计比较。同时根据患者绝经情况通过公式计算出患卵巢癌的风险度(ROMA)。结果 HE4在13例卵巢上皮癌中10例高度表达,而其他117例盆腔包块患者中只有一例高度表达。CA125除在13例卵巢上皮癌中11例高度表达外,在卵巢子宫内膜异位囊肿,盆腔炎性包块(尤其急性炎性包块)中均有约60%以上高度表达。在13例卵巢上皮癌中通过ROMA值将11例分到了高危组,检出率为84.62%。良性肿瘤117例,分到高危组8例,假阳性率为6.84%。结论 HE4和CA125联合检测对卵巢上皮癌的诊断具有重要价值。

橘荔散结丸醇提物化学成分的UHPLC-QE-MS分析及其抗子宫肌瘤细胞的药效机制研究

【目的】运用超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱串联质谱(UHPLC-QE-MS)技术分析橘荔散结丸醇提物的化学成分,并探讨其对子宫肌瘤细胞增殖的抑制作用及机制。【方法】(1)以UHPLC-QE-MS技术分析橘荔散结丸醇提物化学成分。(2)培养原代人子宫肌瘤细胞。采用细胞计数试剂盒8(CCK-8)测定不同浓度橘荔散结丸醇提物处理不同时间后的细胞增殖抑制率,并筛选后续实验中其2个高、低浓度。实验分为空白对照组,二甲基亚砜(DMSO)组,米非司酮组及橘荔散结丸醇提物高、低浓度组,分别给予相应处理后,采用流式细胞术检测细胞周期,Western Blot或定量聚合酶链反应(qPCR)法分别检测细胞Wnt/糖原合成酶激酶3β(GSK-3β)/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路关键蛋白Wnt 5b、GSK-3β、p-GSK-3β、β-catenin、表皮生长因子受体(EGFR)和基质金属蛋白酶2(MMP2)的蛋白、mRNA表达水平。【结果】鉴别橘荔散结丸醇提物主要化学成分91个,橘荔散结丸醇提物冻干粉与中成药橘荔散结片主要化学成分共有22个。橘荔散结丸醇提物各浓度组细胞增殖抑制率均大于空白对照组(P<0.05);橘荔散结丸醇提物高、低浓度组及米非司酮组G0/G1期细胞数均大于空白对照组,而G2/M期细胞数小于空白对照组(P<0.05);橘荔散结丸醇提物高、低浓度组及米非司酮组Wnt 5b、β-catenin、EGFR、MMP2蛋白、mRNA表达水平均低于与空白对照组(均P<0.05),而GSK-3β蛋白及mRNA表达水平与空白对照组无显著性差异(P>0.05)。【结论】UHPLC-QE-MS技术分离橘荔散结丸醇提物化学成分众多,主要成分具有氧化应激调节作用;橘荔散结丸醇提物可有效抑制子宫肌瘤细胞增殖,其分子机制与抑制Wnt/GSK-3β/β-catenin信号通路关键蛋白表达,进而干预子宫肌瘤细胞微环境氧化应激反应有关。

Cdh1对胎盘滋养干细胞分化过程中细胞周期的影响

本研究旨在探究Cdh1对胎盘滋养干细胞分化过程细胞周期的影响及其机制。构建Cdh1-/-的模型小鼠并分离培养Ts细胞,通过MTT和流式细胞术的方法研究Cdh1-/-对未分化Ts细胞增殖和细胞周期的影响,通过相差显微镜观察Cdh1-/-对Ts细胞形态的影响,并且通过对磷酸化组蛋白H3的抗体进行免疫染色以及MTT的方法研究Cdh1-/-对Ts细胞有丝分裂和分化后Ts细胞增殖的影响,最后用Western blotting和RT-PCR的方法探索Cdh1对有丝分裂细胞周期蛋白以及胎盘滋养干细胞分化相关基因表达的调控。结果显示,成功分离培养Ts细胞,Cdh1-/-能够促进未分化Ts细胞的增殖并且使G2/M期细胞比例增加,Cdh1-/-能够使Ts细胞持续进行有丝分裂并促进分化后Ts细胞继续增殖,Cdh1能够使细胞周期蛋白cyclinB表达增加,P27蛋白有所减少并且能够影响多个胎盘滋养干细胞分化相关基因表达。Cdh1能够通过调控有丝分裂细胞周期蛋白的表达影响分化过程中的胎盘滋养干细胞的细胞周期,使其维持在有丝分裂持续增殖,并且Cdh1能够调控多个胎盘滋养干细胞分化相关基因表达影响干细胞分化,因此Cdh1在有丝分裂/核内周期转换以及胎盘滋养干细胞分化中起重要调节作用。