血液病患者巨细胞病毒和EB病毒定量检测的临床价值

目的 评价实时荧光定量聚合酶链反应（PCR）对血液系统疾病患者巨细胞病毒（CMV）和EB病毒（EBV）感染的早期诊断价值.方法 应用实时荧光定量PCR检测271例血液系统疾病患者和28名健康对照者血液中CMV DNA和EBV DNA的含量.结果 28名健康对照者CMV DNA和EBVDNA均阴性.271例患者中147例检测EBV,阳性率为24.5％（36/147）;124例检测CMV,阳性率为4.8％（6/124）,DNA介于102～ 106基因拷贝/ml,治疗有效者EBV DNA和CMVDNA均迅速下降,1～3周后转阴.结论 实时荧光定量PCR动态监测血液系统疾病患者CMV DNA和EBV DNA水平对CMV和EBV感染的早期诊断和疗效判断具有重要意义.

急性髓系白血病患者EVI1基因表达的研究

目的建立EVI1基因不同转录本的定量表达检测方法，并研究其在各型急性髓系白血病（AML）中的表达模式，探讨EVI1基因表达与AML发生、预后的关系。方法检测AML患者69例，其中男37例，女32例，年龄10～70岁，中位年龄42岁；按照FAB分类标准，M2 16例，M3 36例，M4 8例。对照为9名健康人。采用荧光定量PCR（Taq Man探针）法检测EVIl基因各转录本的表达，以ABL基因作为内参，计算样本EVI1基因表达差异的倍数（EVI1／ABL），统计分析不同AML患者间EVI1基因的表达差异。结果EVI1基因的不同转录本在所有健康对照样品中均表达，而且不同转录本之间的表达水平差异有统计学意义（P〈0.05）。转录本2和5（同一对引物检测）的表达水平最低，其次为转录本1，再次为转录本6，转录本3的表达水平最高。在健康对照样品中转录本2（5）、1、6及3的中位表达水平分别是阴性、0.005、0.050及0.512。AML患者EVI1基因的表达与融合基因AML-ETO及CBFB-MYH11的表达呈负相关。结论建立了一种稳定、快速、准确的EVI1基因表达的检测方法，而且EVI1基因的表达与AML的预后具有相关性。

低剂量亚砷酸及维甲酸方案对儿童骨髓增生异常综合征p15INK4B基因的影响

目的 探讨低剂量亚砷酸及维甲酸双诱导方案对骨髓增生异常综合征（MDS）患儿p15INK44B基因表达的影响及患儿p15INK4B基因甲基化水平的变化.方法 11例MDS患儿接受低剂量亚砷酸及维甲酸双诱导方案治疗,应用实时荧光定量聚合酶链反应（PCR）方法检测治疗前后p15INK4B基因的表达,应用亚硫酸氢钠修饰及实时荧光定量PCR方法检测p15INK4B基因的甲基化水平.结果 11例MDS患儿经过双诱导方案治疗后,9例获益.治疗后10例患儿p15INK4B基因表达水平显著升高,治疗前后p15INK4B基因甲基化水平分别为（1.68±0.58）％、（1.44±0.65）％,二者差异无统计学意义（t=-0.885,P＞0.05）.结论 低剂量亚砷酸及维甲酸双诱导方案治疗儿童MDS疗效较好,该方案的作用机制可能与p15INK4B基因表达升高有关,但p15INK4B基因表达升高与去甲基化无相关性.