早期胚胎的发育选择:性别决定

性别决定是一个复杂的发育调控过程,早期胚胎发育过程中,雌雄二者必居其一的发育选择是胚胎性腺形成必须的发育决定。文章综述了动物性别决定的遗传系统、性腺发生、性别决定关键基因及其作用机制,从分子进化的角度分析了性染色体与性别决定形成机制,提示性别决定基因在进化中总是趋向异配性染色体。

人脑髓鞘碱性蛋白cDNA重组质粒pRK41转化及全长编码区体外扩增

作者将含人脑髓鞘碱性蛋白(MBP)编码区和3’端非翻译区(1.2kb)的重组质粒pRK41—1.2转化宿主菌E.coli JM109,用非同位素标记鼠MBP cDNA克隆片段作探针,经菌落原位杂交筛选出阳性克隆并以此为模板,采用聚合酶链反应(PCR)技术扩增出含21.5kd MBP全长编码序列(600bp),又经限制性内切酶BamHⅠ和KpnⅠ消化,电泳结果进一步证实该PCR产物的特异性,为人MBP全长编码序列。

通识教育中融入人类遗传学的教学实践

通识教育已经成为大学高等教育的重要组成部分,强调通专结合的办学理念,要求践行“以人为本”的教育实践。在教学实践中存在不少困难和困惑,需要不断总结和发展中国特色的通识教育体系。本文凝练了在人类生物学教学实践中如何融入人类遗传学知识的通识教学理念、案例和分析,以“人是什么”为切入点引入贴近生活的教学内容。通过现代进化基因组学知识,解析人类自身发展的过去、现在和未来所涉及的生物学核心问题。剖析人的经典属性及其与通识教育的特殊关联,进而引出基于问题的深层次思考。

邮递和保存质粒DNA的简易有效方法

邮递和保存质粒ＤＮＡ的简易有效方法程汉华，周荣家（武汉大学生命科学学院，武汉，４３００７２）中国法分类号Ｑ７８１随着现代分子生物学研究工作的不断深入和发展，国家或地区间的科技交流活动日趋平凡．常常需要在不同国家或地区的实验室之间邮递或携带质粒ＤＮＡ．...

人脑髓鞘碱性蛋白对H_2O_2诱导人肺癌细胞YTLMC-90凋亡的抑制作用

背景与目的:人脑髓鞘碱性蛋白(myelinbasicprotein,MBP)广泛分布于神经系统及多种非神经组织之中,而且在肺癌、乳腺癌、神经胶质瘤等多种肿瘤细胞中均检查到MBP的表达。但MBP与癌细胞侵犯神经组织的活性是否相关、与肺癌细胞的生物学行为是否相关尚未见报道。本研究主要探讨MBP对过氧化氢(H2O2)诱导人肺癌细胞YTLMC-90凋亡的影响。方法:实验分为MBPcDNA微基因pSVCEPMBPCAT转染组(试验组)、空质粒pSVCEPCAT转染组和未转染组(对照组)。将含人Ⅰ型胶原a1链(COLⅠA1)基因启动子和增强子元件、并在其3′端接MBPcDNA的微基因,转染YTLMC-90细胞,并驱动MBP异位表达;采用MTT法检测细胞增殖,吖啶橙荧光染色显微镜和电镜观察细胞形态及其超微结构的改变;琼脂糖凝胶电泳检测染色质DNA断裂。结果:200μmol/LH2O2作用24h后,转染组、未转染组和空载体pSVCEPCAT转染组YTLMC-90细胞的生长抑制率分别为36.67%、84.00%和78.67%(P<0.001);对照组YTLMC-90细胞普遍可见凋亡细胞特有的形态学及生物化学改变,如胞核固缩、染色质断裂,DNA电泳呈梯状条带;而MBPcDNA微基因转染的YTLMC-90细胞未发现上述凋亡特征。结论:MBP促进YTLMC-90细胞增殖和拮抗H2O2诱导的凋亡,明显减少H2O2对YTLMC-90的细胞毒作用。

自噬与泛素化蛋白降解途径的分子机制及其功能

细胞内所有的蛋白质和大多数的细胞外蛋白都在不断的进行更新,即它们在不断地被降解,并被新合成的蛋白质取代。细胞内蛋白的降解主要通过两个途径,即自噬和泛素蛋白酶体系统。自噬是一种由溶酶体介导的细胞内过多或异常蛋白质的降解机制。在细胞内主要有3种类型的自噬,即分子伴侣介导的自噬、微自噬和巨自噬。泛素蛋白酶体系统是由泛素介导的一种高度复杂的蛋白降解机制,它参与降解细胞内许多蛋白质并且这个过程具有高度特异性。细胞内蛋白质的降解参与调节许多细胞过程,包括细胞周期、DNA修复、细胞生长和分化、细胞质量的控制、病原生物的感染反应和细胞凋亡等。许多严重的人类疾病被认为是由于蛋白质降解系统的紊乱而引起的。文章综述了自噬和泛素化途径及其分子机制,以及蛋白质降解系统紊乱的病理学意义。

黄鳝β-actin基因的克隆及其在鱼类中的系统发生分析(英文)

βactin是actin家族的一员,在维持细胞结构,细胞内运动,细胞分裂等细胞生理活动方面发挥着重要的作用。克隆的黄鳝βactin基因的cDNA全长1860bp,编码375个氨基酸,在脊椎动物中不同物种的βactin基因之间的序列同源性超过了98%。RTPCR表明克隆的黄鳝βactin基因在睾丸、卵巢、心、肝、脾、脑等组织中广谱表达。基于目前已知的全部鱼类βactincds,构建了进化树。星形辐射的树型结构一致支持将鱼类βactin基因划分为4类。到目前为止,所有的鱼都没有发现拥有全部4个βactin基因。这暗示伴随着鱼类的辐射式进化历程,可能发生了种系特异性的βactin的丢失。

脊椎动物Sox基因家族的系统发生分析

脊椎动物Sox基因是一类高度保守的基因家族 ,它们编码一类转录因子 ,参与多种发育过程的调控。这个家族的共有特征是Sox蛋白具有一个约 79个氨基酸 ,可与DNA特异结合的HMG盒区。该基因家族成员众多复杂 ,对它们的基因结构、功能及进化关系的研究有助于对该基因家族的全面认识。利用已克隆的全部脊椎动物全长核苷酸 /蛋白质数据 ,对这些数据进行序列比对及进化树的构建 ,分析Sox基因家族成员的分类及分子进化模式。

脊椎动物DMRT基因家族的系统发生及同线性分析

利用本室克隆的DMRT/Dmrt基因以及多个基因数据库中收集的DMRT/Dmrt基因全 (或部分 )序列 ,构建了DMRT/Dmrt基因的系统发生树 ,DMRT/Dmrt基因明显地聚为 7类 (DMRT/Dmrt 1～DMRT/Dmrt7)。以已克隆的斑马鱼Dmrt 1基因序列及数据库中人和小鼠的DMRT/Dmrt基因序列 ,结合基因组数据的比对分析 ,发现脊椎动物DMRT/Dmrt基因家族成员在基因组中的定位呈现高度保守的同线性 ,主要集中于两大同线群 ,即DMRT/Dmrt 1～ 3和DMRT/Dmrt 5～ 6。

SRY盒基因在斑马鱼和胡子鲇中的保守性分析

本文采用人类ＳＲＹ基因探针，与ＥｃｏＲＩ消化的中国的胡子鲇（Ｃｌａｒｉａｓｆｕｓｃｕｓ）和美国的斑马鱼（Ｂｒａｃｈｙｄａｎｉｏｒｅｒｉｏ）基因组ＤＮＡ进行了Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹杂交分析。首次在这两种鱼中发现了ＳＲＹ盒基因及其存在的特征；在斑马鱼中发现了明显的限制性片段长度多态性；并深入分析了ＳＲＹ盒基因的进化保守性。

黄鳝性腺高表达的核糖体蛋白基因

采用高密点阵技术从黄鳝雄性性腺cDNA文库中获得 8 个克隆,序列分析和 BLAST结果显示它们编码的蛋白质分别与40S核糖体蛋白S4,S9,S16,S17,S20 和 60S核糖体蛋白 L7, L18a,L29 高度同源。根据黄鳝 RP蛋白序列和其他物种的相应同源序列构建ML系统发生树,显示核糖体蛋白基因在进化中高度保守。核糖体蛋白基因不仅可作为分子进化分析的有利工具,而且从它们的表达模式显示 RP 基因除具有看家基因的功能外,很有可能参与包括性腺分化等过程的发育调控。

5676例受血者输血前HBV、抗-HCV、抗-HIV、RPR检测结果分析

当前,因为输血引起的肝炎传染病,梅毒甚至艾滋病的医疗纠纷时有报道,输血作为临床不可替代的辅助医疗措施,在挽救病人生命的同时,也可能带来无法避免的不良反应与并发症,特别是输血后肝炎,往往因为缺乏患者在输血前体内病毒性疾病的血清学检查,因而引发的纠纷给医疗单位以及采供血机构都造成不良的社会影响.

Sox8基因HMG盒区内含子剪接位点分析

Sox基因参与广泛的发育调控过程。为了确定Sox8基因HMG盒区内含子的大小及剪接位点 ,通过计算机分析本室克隆得到的泥鳅Sox8基因包括HMG盒区在内的一段基因组序列 ,推测在HMG盒区可能存在一个内含子 ,进一步通过RT -PCR方法 ,克隆泥鳅Sox8基因HMG盒区cDNA片段 ,与基因组序列比较分析 ,确认在泥鳅Sox8基因的HMG盒区存在一个内含子 ,并确定了该内含子的序列及剪切位点。同时 ,比较分析了人和泥鳅Sox8在HMG盒区的内含子的剪切位点。结果显示 ,Sox8基因HMG盒区内含子剪切位点在进化上是保守的。

最大灰信息熵路网军事交通流最大隐蔽性分配模型研究

路网军事交通流的最大隐蔽性分配问题是军事演习和战时道路交通指挥决策所必须解决的问题。本文运用系统论的思想和灰色信息熵理论,构建了基于最大灰信息熵的路网军事交通流最大隐蔽性分配模型,从而较好地解决了这一问题。此外,该模型的构建也为这一问题的进一步研究打下了良好的基础。

人脑髓鞘碱性蛋白cDNA体外扩增、克隆和鉴定

采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）从人脑ｃＤＮＡ文库中扩增出６００ｂｐ的髓鞘碱性蛋白（ＭＢＰ）ｃＤＮＡ片段，与载体ｐＧＥＭ－３Ｚｆ（＋）平端连接．重组质粒ＤＮＡ转化宿主菌ＪＭ１０９，在含Ｘ－ｇａｌ和ＩＰＴＧ的平板上直接筛选阳性克隆．限制性内切酶分析和成套引物扩增鉴定证明，该克隆含有７个外显子的２１．５ｋＤ人脑ＭＢＰ全长编码序列．

SRY和SRY盒基因比较树(英文)

性别决定区Ｙ（ＳＲＹ）基因是人类和哺乳动物睾丸决定因子（ＴＤＦ）的最佳候选基因。本文基于ＳＲＹ／Ｓｒｙ和ＳＲＹ盒基因保守区氨基酸序列相似性，采用聚类分析方法，将该基因家族聚类为四个亚族，即ＳＯＸＳ１，ＳＯＸＳ２，ＳＯＸＳ３和ＳＯＸＳ４，各亚族间同源性小于６０％。所有哺乳动物和人类ＳＲＹ／Ｓｒｙ都聚在ＳＯＸＳ１亚族内。该亚族由ＳＯＸＳ１１和ＳＯＸＳ１２两组组成，真兽亚纲哺乳动物和人类ＳＲＹ／Ｓｒｙ基因都集中在ＳＯＸＳ１２组内。

“导问式”教学方法研究

本文从"导问式"教学的概念及内涵入手,着重研究"导问式"教学的组织与实施以及在教学过程中需把握的问题。"导问式"教学致力于学员提出问题、分析问题、解决问题的能力培养,旨在进一步提高学员的岗位任职能力和创新意识。

黄鳝Hprt基因的克隆及表达分析

次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶(Hprt)参与嘌呤核苷酸的补救合成。采用RACE技术克隆了黄鳝的次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶基因,它的全长cDNA为1 452 bp,预测编码218个氨基酸,与人类、小鼠、鸡和斑马鱼等脊椎动物Hprt氨基酸序列之间的同源性超过76.7%。基于该基因氨基酸序列构建了进化树,显示与斑马鱼Hprt基因更同源。RT-PCR表明黄鳝Hprt基因在多种组织中广谱表达,表明黄鳝该基因在功能和进化上的保守性。

黄鳝Nup93基因的分子克隆及其在性腺和肾的显著表达(英文)

核孔蛋白(Nucleoporins,Nups)是核孔复合体(Nuclear pore complexes,NPC)的重要组成成分,核孔复合体可以 控制细胞内信号分子在核质间的双向转运,从而控制基因表达、细胞增殖和分化。在构建的黄鳝精巢SMART cDNA文库 中,采用差异筛选的方法得到黄鳝核孔蛋白家族中Nup93基因的3′端片段,根据此段序列设计引物,使用兼并PCR和5′RACE 方法克隆得到此基因的全长cDNA。序列比对显示该基因与酵母Nic96、斑马鱼Nup93和人类Nup93的同源性分别为36．5％、 94．6％和90．5％。进化树分析显示,黄鳝Nup93与其他鱼类的Nup93归为一支。采用荧光定量PCR方法对不同性别黄鳝的 性腺和其他组织内该基因的表达作定量分析发现,Nup93在性腺和肾中的表达量远高于其他组织,而且表达量存在一定的 性别差异。这一结果提示Nup93可能与性腺发育相关。