多基因同步调控结合高通量筛选构建高产L-苯丙氨酸的谷氨酸棒杆菌工程菌株

L-苯丙氨酸(L-Phe)是重要的食品及医药中间体,但由于其生物合成途径较长且调控机制复杂,仅依靠质粒或者周期漫长的基因组逐轮改造,难以实现各个模块之间的通量平衡,在一定程度上限制了其产量的进一步提升。本研究将L-Phe生物合成途径中的7个携带组成型启动子PF11及核糖体结合位点(ribosome binding site,RBS)为GGGGGGGG的关键基因ppsA、tktA、aroF^(fbr)、aroE、aroL、pheA^(fbr)和tyrB,整合到谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum)的基因组中;利用课题组前期研发的基于CRISPR/Cas系统和胞苷脱氨酶的无模板基因表达调控技术(base editor-targeted and template-free expression regulation,BETTER),对每个关键基因的RBS进行同步编辑,生成富含G/A的RBS突变文库;利用前期开发的荧光蛋白型L-Phe生物传感器结合液滴微流控系统(droplet microfluidics)对RBS突变文库进行高通量筛选。最终,从大约7万个RBS突变文库中筛选到4株L-Phe产量提升不同程度的突变菌株,其72 h摇瓶发酵产量分别为2.06、1.30、4.42和7.44 mmol/L,相比对照菌株C.g-2(0.6 mmol/L)分别提高了2.43、1.17、6.37、11.40倍。利用碱基编辑器同时调节多基因的表达水平并筛选组合文库,可以为L-Phe工程育种提供一种可行策略。

纳米银的毒理学研究进展

纳米银具有广谱、高效的抗菌性,能够均匀分散在不同类型的聚合物中,在食品保鲜领域具有很大的应用价值,但其安全问题也备受关注。纳米银能够透过生物膜上的孔隙进入细胞或者线粒体、细胞核等细胞器内,与蛋白质等生物大分子发生结合,影响细胞的功能。本文从细胞毒性、亚细胞毒性、遗传毒性等方面综述了纳米银的生物安全性,并对细胞内纳米银与生物大分子相互作用进行探讨,为在分子水平上系统研究纳米银的作用机制以及纳米银的毒理研究提供帮助。

食管异物取出术围术期患者个体化护理措施的临床效果分析

目的对食管异物取出术围手术期患者行不同护理措施产生的效果进行探究。方法选取食管异物就诊病人72例,随机分为实验组34例和对照组38例。救治后观察两组患者护理后生命质量评分、护理满意度、舒适度、护理前后症状改善程度。结果实验组与对照组护理总满意度分别为91.18%、42.10%,两组对比存在统计学差异(P<0.05);实验组护理后生命质量评分与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05);两组护理前症状轻重程度比较无统计学差异(P>0.05),护理后实验组的改善程度显著优于对照组(P<0.05)。实验组舒适度与对照组相比具有统计学差异(P<0.05)。结论对食管异物取出术围手术期患者行适当的护理措施,不仅可提高其生命质量、护理满意度、患者舒适度,还可缓解症状,具有较高临床运用价值。

标准化护理模块在一例食管癌患者快速康复护理中的应用

探讨标准化护理模块在食管癌患者快速康复护理中的应用。方法:选取我科一例实施快速康复护理的食管癌患者,对其进行标准化护理模块的应用。将其住院天数、治疗费用与传统治疗相比。结果:该患者共计住院天数9天;术后康复时间 7天;对照传统的食道手术患者平均住院日14天,缩短了5天。住院费用6万元,对照平均费用减少了2万元,治疗效果好、住院时间短、花费又少、无并发症发生,患者表示非常满意。结论:标准化护理模块在食管癌患者快速康复护理中的应用能够促使患者早日康复、减少治疗费用、能够取得患者及家属的满意,提高医患、护患之间的关系。

21世纪以来先秦瓷乐器窑址考古新进展

20世纪浙江海盐黄家山、杭州余杭、半山石塘等多处墓葬出土原始瓷乐器,器形主要有甬钟、錞于、句鑃、镈钟等,礼制瓷乐器作为随葬物,为研究先秦埋葬习俗提供了实物证据。21世纪以来,先秦时期瓷乐器考古现有许多新进展。除浙江贵族墓继续发现外,在江苏无锡鸿山大墓亦有数量可观、质量极佳的瓷乐器,同时遗址中也陆续有出土。瓷乐器考古及分析为其产品产地溯源以及先秦时期礼乐等级制度、葬俗特征、越国音乐文化等维度的研究都提供了新材料。

21世纪以来唐宋元明瓷乐器窑址考古新进展

瓷乐器在先秦出现并初步发展,唐宋时期进入繁盛。这一时期的瓷乐器以腰鼓为主,包括埙、钟等在民间广泛使用,胎质致密,釉色多样。元明时期除腰鼓等以外,还有瓷质箫和笛子,音色上佳。从各地博物馆收藏的瓷乐器产品,结合相关烧造瓷乐器的窑口材料,可以发现瓷乐器在国内分布地区广泛,而且烧制窑口也多样化。另外,代表性窑口如鲁山段店和窑田岭等窑址考古亦获得了突破性的进展。

细菌Na^+/H^+逆向转运蛋白的研究进展

Na+/H+逆向转运蛋白在维持细胞内p H稳态、Na+离子动态平衡和调控细胞体积方面发挥着重要作用。目前,细菌中许多参与高盐或高碱性环境压力应答的Na+/H+逆向转运蛋白得到了鉴定和功能阐释。继续挖掘高效的Na+/H+逆向转运蛋白,深入探究Na+/H+逆向转运蛋白的分子机理,将为工业菌株或农作物的改良提供新的研究思路。本文以4种模式菌株为例,简要概述细菌Na+/H+逆向转运蛋白的种类和特征,同时对其结构和功能等方面也进行探讨。

工程菌种自动化高通量编辑与筛选研究进展

合成生物学(synthetic biology)与经典生物学研究的革命性区别之一是合成生物学能将生物实验的对象、方法、技术和流程高度标准化和模块化,创建出自动化与高通量的合成生物铸造模式。该模式通过复杂生物过程与自动化设施的结合,颠覆过往劳动密集型的研究范式,获得更高的技术迭代能力,极大促进了合成生物学的发展和产业化应用。值此天津工业生物技术研究所创立10周年之际,本文回顾了研究所在工业菌种自动化高通量编辑与筛选领域的系列重要工作进展,对基因克隆(gene cloning)、基因组编辑(genome editing)、编辑序列设计(editing sequence design)等生物技术的自动化实现,以及流式细胞、液滴微流控、全基因组规模扰动测序等高通量筛选技术进行了分析讨论,并展望了本领域未来的发展方向。望借此为创建具有自主知识产权的优秀菌种及其产业应用提供智能化、自动化和全链条覆盖的整体支撑能力。

协同护理干预对老年食管癌围术期患者生活质量的影响

目的 探讨协同护理干预法对围术期老年食管癌患者肺功能锻炼及生活质量的影响.方法选取我院收治的2014年10月31日至2015年10月31日122例无其他合并证的老年食管癌手术患者,采用随机数字表法将患者分为干预组60例和对照组62例,对照组给予常规护理方法,干预组给予协同护理,根据患者术后相关临床指标及生活质量评分表（QLQ30）评价两组效果.结果干预组在术后排气时间、术后进食时间、下床活动时间、住院时间均短于对照组（均P〈0.05）.干预组患者的躯体功能、社会功能、心理功能、认知功能及总质量评分均明显高于对照组（均P〈0.05）.结论协同护理干预对老年食管癌围术期患者有较好的护理效果,可提高患者肺功能锻炼能力及生活质量,值得临床推广运用.

聚焦模式下导游式疼痛宣教平台降低微创胸部手术患者的疼痛指数

利用聚焦模式下导游式疼痛宣教平台降低微创胸部手术患者疼痛指数。方法:在传统疼痛管理体系(多模式镇痛、疼痛宣教、NRS疼痛评分)基础上,成立疼痛护理管理小组,将聚焦模式、导游式疼痛评估相融合,对微创胸部手术患者形成综合集束化疼痛管理。结果:患者术后疼痛评分低于传统疼痛管理组;镇痛效果满意度增加(P<0.05);24h下床率提高(P<0.05);肠功能恢复时间缩短(P<0.05);肺部并发症发生率降低(P<0.05);下肢静脉血栓的发生率降低(P<0.05);住院时间缩短(P<0.05)。结论:聚焦模式下导游式疼痛宣教平台降低微创胸部手术患者的疼痛指数,促进微创胸部手术患者快速康复。