IL-15对儿童MDS造血前体细胞bcl-2、bcl-xl mRNA表达的影响

目的探讨IL-15对骨髓增生异常综合征(MDS)造血细胞bcl-2、bcl-xlmRNA表达的影响,以探索IL-15抑制MDSCD34造血干／祖细胞凋亡的可能机制。方法采用吸附单克隆抗体的免疫磁珠分离系统,分离纯化17例MDS患儿骨髓CD34细胞,采用RT-PCR检测bcl-2、bcl-xlmRNA表达水平,观察IL-15对它们的影响。结果IL-15可呈时间与剂量依赖性的增强体外培养的MDS造血前体细胞bcl-2、bcl-xl基因mRNA的表达。结论IL-15可能为抑制MDSCD34造血干／祖细胞凋亡的作用机制之一。

大小鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞分离培养方法

肺泡Ⅱ型上皮细胞(AECⅡ)是肺泡上皮细胞的"祖细胞",可分化为AECⅠ,其作用与肺组织的生理功能密切相关,获取AECⅡ将为肺部疾病的研究提供良好的实验模型和基础。大鼠和小鼠是常用的制备AECⅡ的动物,胎肺的消化方法和消化酶的种类、分离纯化的方法、鉴别的方法以及培养方法等是AECⅡ研究的重点和难点,虽然已经进行了广泛研究,但目前尚未形成一套完善的胎鼠AECⅡ分离、纯化与鉴定的方法。此外,AECⅡ的产量、纯度和传代等都是需要将来继续探索的问题。

骨髓增生异常综合征造血前体细胞对白细胞介素15反应的研究

目的 探讨儿童骨髓增生异常综合征 (MDS)造血前体细胞对白细胞介素 15 (IL 15 )的反应 ,为临床应用提供理论依据。方法 采用吸附单克隆抗体的免疫磁珠分离系统分离纯化 18例MDS患儿骨髓CD3 4 + 细胞 ,采用碘化丙锭染色、流式细胞仪分析和细胞核形态检测两种方法同时检测体外培养MDS造血前体细胞增殖、分化过程中的凋亡状况 ;观察IL 15对其影响 ,并进行定量分析。结果 在培养d8,IL 15浓度在 0～ 10 0ng/ml可呈剂量依赖性地抑制体外培养MDS骨髓造血前体细胞的凋亡。结论 IL

IL-24对儿童急性白血病骨髓单个核细胞增殖的影响

目的探讨IL-24对儿童急性白血病(acute leukemia,AL)骨髓单个核细胞(bone marrow mononu-clear cells,BMMCs)增殖的影响,为临床应用提供理论依据。方法取确诊未治的儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)20例、儿童急性非淋巴细胞白血病(ANLL)18例,取骨髓血,分离单个核细胞;用细胞计数、噻唑蓝(MTT)抑制试验,以IL-24为0ng/mL为对照组,检测不同浓度的IL-24对白血病BMMCs增殖的影响,找出IL-24作用的峰浓度。以IL-24达到峰值的浓度为实验组,不加IL-24为对照组,培养72h以了解细胞增殖状况。结果细胞计数得出:体外培养的白血病BMMCs在培养的48h增殖状况最差,并且随着IL-24浓度的增加,其活细胞数也随着减少,当IL-24为50ng/mL时,其增殖状况最差;当IL-24为100ng/mL时,其增殖状况反而好转。MTT比色法检测IL-24对白血病BMMCs的抑制率得出:在培养的48h,其抑制率最高。IL-24浓度在0～50ng/mL范围内,随IL-24浓度增加,其抑制作用递增,而当IL-24大于50ng/mL其抑制作用有所减弱。结论 IL-24可呈时间和剂量依赖性地抑制白血病BMMCs增殖。

白细胞介素15对儿童骨髓增生异常综合征造血前体细胞caspase-3 mRNA表达的影响

目的:探讨白细胞介素15(IL-15)对骨髓增生异常综合征(MDS)造血细胞caspase-3mRNA表达的影响,以探讨IL-15抑制MDSCD34+造血干/祖细胞凋亡的可能机制。方法:采用吸附单克隆抗体的免疫磁珠分离系统分离纯化18例MDS患者骨髓CD34+细胞,采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)检测caspase-3mRNA表达水平,观察IL-15对它们的影响。结果:发现IL-15下调体外培养的MDS造血前体细胞cpp32基因mRNA的表达在0～100ng/mL范围内呈剂量依赖性,其差异具有统计学意义;从d1～d8,随着IL-15作用时间延长,下调caspase-3基因mRNA表达的能力越强,其差异具有统计学意义。结论:IL-15可呈时间与剂量依赖性的下调体外培养的MDS造血前体细胞caspase-3基因mRNA的表达。IL-15下调MDSCD34+造血干/祖细胞caspase-3mRNA的表达,可能为其抑制该细胞凋亡的作用机制之一。

失眠认知行为疗法病例总结并文献综述

目的:美国医师学会(ACP)将认知行为疗法(CBT-I)确定为治疗失眠的一线疗法。探讨失眠认知行为疗法应用现状。方法:对深圳市人民医院呼研所睡眠医学中心2019年10月至2020年2月60例失眠患者行CBTI,进行总结并结合文献综述失眠认知行为疗法的获取途径和利用率。结果:60例患者中55名失眠患者睡眠效率提高,总睡眠时间延长,ISI评分显著下降,其中5例患者中途退出CBTI治疗。结论:尽管CBT-I改善了睡眠质量并降低了安眠药依赖的风险,但目前患者很少接受这种治疗。在常规医疗环境中提供CBTI的三种不同类别的障碍。首先,系统障碍导致接触CBT-I和行为睡眠医学(BSM)提供者的机会有限。其次,由于缺乏知识、治疗信念以及缺乏评估和治疗失眠的动机,普通医护人员没有充分筛查睡眠问题并适当转诊。最后,患者的问题:由于缺乏知识、治疗信念以及获取CBTI的途径有限,患者参与CBT-I受限。结论:在实际工作中增加失眠患者应用CBT-I需要一个成熟的、系统的研究计划,在多个层次上开发和尝试实施干预措施。

IL-15对儿童MDS造血前体细胞凋亡的影响

为探讨IL 1 5对儿童骨髓增生异常综合征 (MDS)造血细胞凋亡的影响 ,为临床应用提供理论依据。采用吸附单克隆抗体的免疫磁珠分离系统分离纯化 1 8例MDS患者骨髓CD34+细胞 ,采用碘化丙锭染色、流式细胞仪分析和细胞核形态检测两种方法同时检测体外培养的MDS造血前体细胞增殖、分化过程中的凋亡状况 ;观察IL 1 5对它们的影响 ,并进行了定量分析。结果表明 :发现IL 1 5可抑制体外培养的MDS造血前体细胞凋亡。在培养的第 8天 ,IL 1 51 0 0ng.ml- 1实验组细胞凋亡程度较没加IL 1

儿童骨髓增生异常综合征造血前体细胞增殖与白细胞介素15的影响

背景:白细胞介素15是一种重要的骨髓生长调节因子,可能具有刺激骨髓增生异常综征CD34+细胞增殖的作用。目的:观察白细胞介素15对儿童骨髓增生异常综合征造血细胞增殖的影响。方法:采用细胞计数、MTT抑制实验检测0,10,20,50,100,200μg/L白细胞介素15对18例1～14岁儿童骨髓增生异常综合征患者CD34+细胞增殖的影响,找出白细胞介素15作用的峰浓度。以白细胞介素15达到峰值的浓度为实验组,不加白细胞介素15的为对照组,培养12d以了解细胞最佳增殖时间。结果与结论:体外培养的骨髓CD34+细胞在培养第8天生长状况最好,并且随着白细胞介素15质量浓度的增加,其活细胞数也随着增加,当白细胞介素15为100μg/L时,其增殖状况最好;当白细胞介素15为200μg/L时,其增殖状况反而欠佳。在培养的第8天,白细胞介素15对骨髓增生异常综合征患者骨髓CD34+细胞抑制率最低,当其浓度在0～100μg/L范围内,随质量浓度增加,其抑制作用递减,而当其质量浓度>100μg/L其抑制作用有所增强。说明白细胞介素15呈时间和剂量依赖性地促进骨髓增生异常综合征患者骨髓CD34+造血干/祖细胞增殖。

上气道阻力综合征病例分析并文献综述

目的:探讨上气道阻力综合征临床表现及诊治。方法:对深圳市人民医院呼研所睡眠医学中心2019年8月至2020年3月29例诊断为上气道阻力综合征患者进行分析并对上气道阻力综合征——非缺氧性睡眠呼吸紊乱进行文献综述。结果:临床上对睡眠呼吸障碍的认识不足,UARS的诊断经常被忽视。结论:上气道阻力综合征(UARS)和阻塞性睡眠呼吸暂停综合征(OSAS)一样,都是睡眠中的异常呼吸。UARS综合征的定义是为了识别“OSAS”未涵盖的病理,使医护人员更早地认识到疾病的病理,并对睡眠呼吸紊乱(SDB)的发展特征进行研究。SDB随着年龄的增长而演变,最后导致OSA。如何更早地认识到UARS导致阻塞性睡眠呼吸暂停(OSA)的问题,并了解预防其向OSA的发展的措施,这才是最重要的。临床上应加强对非缺氧性睡眠呼吸障碍(NHSDB)的认识。

肥胖儿童阻塞性睡眠呼吸暂停综合征的诊治进展

近年来,肥胖已经成为儿童中的常见病。肥胖儿童阻塞性睡眠呼吸暂停综合征(OSAS)的发病率较高。本综述的目的是评估OSAS肥胖儿童的危险因素,并讨论诊断和治疗的最新进展。对文献的回顾表明儿科OSAS的诊断存在不足。最佳治疗策略应同时针对OSAS和肥胖。治疗方案包括行为改变、气道正压(PAP)装置和手术。手术的成功率存在个体差异,并且有手术后体重增加的风险。对于有手术失败的儿童,可以使用睡眠内窥镜检查进一步评估阻塞的区域,从而确定手术方案。减肥可作为一线治疗选择的替代方案,这需要基于家庭的行为干预。儿科医生应该意识到其在肥胖儿童中的流行率增加,并对肥胖患儿进行OSAS的筛查。

白细胞介素-15与肿瘤的免疫治疗

近年来 ,许多研究表明白细胞介素 1 5 (IL 1 5 )与肿瘤的发生、发展关系密切。一方面 ,它能扩增和激活自然杀伤细胞、CD8+ T细胞 ,增强机体的免疫力。另一方面 ,IL 1 5的不正确表达则对机体造成损害。故通过增加外源性IL 1 5来提高机体的免疫力和清除不正确表达的IL 1

IL-15对骨髓增生异常综合征患者CD34^+细胞增殖、分化的影响

目的:探讨IL-15对体外培养的骨髓增生异常综合征(MPS)患者CD34+细胞增殖和分化的影响。方法:应用单克隆抗体 (mAb)免疫磁珠系统分离CD34+细胞,将实验分为加IL-15的实验组和不加IL-15的对照组,分别用液体培养基和甲基纤维素半固体培养基培养。计数培养后的细胞数和CFU-E、BFU-E、CFU-GM和CFU-GEMM的集落形成数,并用MTT比色法检测IL-15对MDS患者CD34+细胞增殖的抑制作用。用流式细胞术检测上述培养的细胞上各种表型分子CD33、CD13、CD71、CD19和CD3表达的变化和细胞周期的改变。结果: 11例MDS患者CD34+细胞的平均回收率为(75. 4±5. 2)%,CD34+细胞的纯度为 ( 90. 3±6. 3 )%。富集倍数为(83. 1±12. 5)倍。用MTT比色法检测表明,IL-15抑制CD34+细胞增殖的最佳剂量为 20μg/L,最佳时间为 8d。将对照组及 20μg/L的IL- 15 (实验组 )分别与MDS患者的CD34+细胞共培养 8d,进行细胞计数显示,增殖倍数对照组为4. 6倍,实验组为 6. 3倍 (P<0. 05,n=5);各祖细胞的集落形成率,实验组均明显多于对照组。CD34+细胞上各种表型分子的表达率(除CD3外),实验组均明显高于对照组。IL-15作用后,CD34+细胞的细胞周期中G1、S、G2 期的比率均有明显变化,与对照组比较,差异显著 (P<0. 05,n=7 )。结论:IL15对MDS患者的CD34+细胞具?

人脐带间充质干细胞对新生大鼠肺纤维化细胞因子水平的影响

目的探讨人脐带间充质干细胞(hUCMSCs)对新生大鼠肺纤维化细胞因子水平的影响,为慢性肺部疾病临床防治提供新思路。方法 32只新生SD大鼠随机分4组(n=8):磷酸盐缓冲液(PBS)对照组(Ⅰ组)、hUCMSCs组(Ⅱ组)、博莱霉素对照组(Ⅲ组)、博莱霉素+hUCMSCs组(Ⅳ组)。Ⅲ、Ⅳ组用博莱霉素腹腔注射5mg/kg×5 d,进行肺纤维化造模。同时Ⅰ、Ⅱ组予等体积PBS腹腔注射。Ⅱ、Ⅳ组在新生鼠7 d腹腔注射(1×106)hUCMSCs,Ⅰ、Ⅲ组注射等体积PBS。30 d取时大鼠肺组织行HE染色,辐射状肺泡计数(RAC),羟脯氨酸(HYP)含量测定,荧光定量PCR测定细胞因子TNF-α、IL-6、IL-13、角化生长因子(KGF)的mRNA表达水平。结果Ⅲ组肺泡呈发育不良,肺纤维化改变,HYP升高,各细胞因子mRNA水平升高,RAC减少。Ⅳ组病理损伤程度减轻,HYP降低,RAC增加,KGF mRNA表达降低,差异有统计学意义(P<0.05)。Ⅰ、Ⅱ组未见明显病理改变,HYP、RAC和各细胞因子mRNA水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论 hUCMSCs具有拮抗肺纤维化作用,其机制可能部分通过旁分泌KGF,保护正常肺发育而实现的。hUCMSCs调节肺内促炎因子(TNF-α、IL-6)/抗炎因子(IL-13)间的平衡在炎症晚期不是主要保护机制。

鼻咽癌组织中XIAP和Smac/DIABLO的表达及意义

目的研究鼻咽癌组织中X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)与其拮抗蛋白Smac/DIABLO的表达及其意义。方法以50例鼻咽癌患者鼻咽部活体组织石蜡标本和20例鼻咽部慢性炎症组织石蜡标本为研究对象,利用组织芯片技术同时采用S-P免疫组织化学方法检测鼻咽癌组织芯片中XIAP和Smac/DIABLO的表达。结果 (1)鼻咽癌中XIAP的阳性表达明显高于鼻咽部慢性炎症组织,差异有统计学意义(P<0.05);鼻咽癌中Smac/DI-ABLO的阳性表达均明显低于鼻咽部慢性炎症组织,差异有统计学意义(P<0.05)。(2)Smac/DIABLO在XIAP阳性的鼻咽癌石蜡标本中的阳性表达率低于在XIAP阴性的鼻咽癌石蜡标本中,XIAP和Smac/DIABLO表达均呈明显负相关(P<0.05)。结论 XIAP在鼻咽癌中高表达,Smac/DIABLO在鼻咽癌中低表达,鼻咽癌中XIAP和Smac/DIABLO表达呈负相关。XIAP和Smac/DIABLO可能是鼻咽癌细胞凋亡信号传导网络中的重要一环,其与鼻咽癌的发生、发展密切相关。

博莱霉素制备新生SD大鼠慢性肺部疾病模型

目的探索合适剂量的博莱霉素(BLM)腹腔注射导致新生SD大鼠肺发育不良,肺间质纤维化,建立一种新的慢性肺部疾病(CLD)动物模型。方法 30只2日龄新生SD大鼠随机分为3组,每组10只,分别予BLM 5.0、7.5 mg/(kg.d)及等体积生理盐水连续5 d腹腔注射,分别于第14、30天各处死5只。观察新生大鼠的存活状况,肺组织病理改变、Masson染色和羟脯氨酸(HYP)含量的变化。结果给予5.0 mg/kg BLM后大鼠可存活4周以上,肺组织病理主要为小肺泡数量减少,肺间隔增厚,Masson染色可见肺间隔有较多蓝色胶原沉积,HYP增加等肺发育不良、肺纤维化的表现;7.5 mg/kg BLM注射后大鼠陆续死亡,肺组织病理为肺泡出血,肺结构紊乱;等体积生理盐水注射大鼠存活状况良好,肺组织未见有病理改变。结论新生SD大鼠用BLM 5.0 mg/kg连续5d腹腔注射,可成功制备CLD模型。

环状RNA研究的新进展

背景:环状RNA(circ RNA)是一种新型的RNA,与线性RNA不同,它形成共价闭合的连续环,并且在真核转录组中高度表达。它的生物学功能被忽视多年。最近的研究已经在哺乳动物细胞中发现了数千种内源性circRNA。目的:综述circ RNA的形成、性质、功能,以及在疾病中的潜在意义。方法:第一作者应用计算机检索2000年1月至2016年12月Pub Med数据库、中国期刊全文数据库关于circ RNA的文章,英文检索词"CircRNA,mi RNA,function,mechanision";中文检索词"Circ RNA,micro RNA,功能,机制"。对纳入的62篇文献进行分析讨论。结果与结论:(1)CircRNA主要从外显子或内含子序列产生,并且反向互补序列或RNA结合蛋白是circ RNA生物发生所必需的;(2)大多数circRNAs是跨物种保守,对核糖核酸R稳定的和耐,并经常表现出组织/发育阶段特异性表达;(3)最近的研究表明,circ RNAs可以作为微小RNA(mi RNA)海绵体,剪接和转录的调节器和亲代基因表达的修饰;(4)新的证据表明circ RNAs可能在动脉粥样硬化血管疾病,神经系统疾病,朊病毒疾病和癌症中发挥重要作用;在结肠直肠癌中异常表达;并用作一些疾病的诊断或预测性生物标志物;(5)类似于mi RNA和长非编码RNA,circ RNAs成为RNA领域的新研究热点,可以广泛参与生命过程。

IL-15对MDS患者CD34^+细胞诱导增殖分化和抗凋亡作用

为了研究IL-15对体外培养的MDSCD34+细胞诱导增殖分化及凋亡的抑制作用,应用MACS免疫磁珠分离系统分离高富集度MDSCD34+细胞,建立以造血生长因子为基础的体外培养体系,用不同浓度的IL-15作用于MDSCD34+细胞,采用流式细胞术检测和免疫细胞化学染色等方法观察培养后的细胞表面抗原表达、细胞周期、凋亡指数及细胞形态的变化情况,并进行了定量分析。结果表明,MDSCD34+细胞经IL-15作用后,MDSCD34+细胞出现明显增殖和分化,细胞周期变异,增殖指数和细胞计数增加,形态学向成熟转化,实验组各表面抗原水平CD71、CD33和CD19均较对照组为高,细胞凋亡率则较对照组下降。结论IL-15对MDSCD34+细胞有一定的诱导增殖分化和抗凋亡作用,在MDS治疗方面可能有一定的应用前景。

电脑限制医师处方权对抗菌、麻醉和一类精神药品临床应用的影响

根据抗菌药物临床应用指导原则和处方管理办法等相关法规,在充分培训的基础上,利用医生工作站对各级医师处方权进行限制,规范了抗菌药物的临床应用及麻醉和精神药品的管理,实现了人均门诊费用和住院费用的双下降。

快速反应小组在医院应用中面临的挑战和思考

卫生保健组织面临着提高医疗安全和医疗服务质量的挑战。研究发现:通过早期的干预措施,可提高医疗服务质量,改善患者预后。快速反应小组(Rapid Response Team,RRT)就是一个这样的干预。快速反应小组是一项倡议医疗机构可以通过努力提高医疗服务质量、提高患者生存质量的工具。本文探讨快速反应小组在医院应用中面临的挑战和思考。