《养猪与猪病防治》课程开放式教学模式探索与实践

《养猪与猪病防治》是畜牧兽医专业的一门专业核心课程,短时间全班进场进行现场教学已不符合猪场生物安全的要求。本研究利用学校已建成的省级产教融合实训平台—智慧猪场,在生产养殖区域安装环境感知传感器和摄像头,实现每个特定猪舍区养殖智能化,依托学院现有的智慧教室实现了远程开放式教学方式。为生物安全性高、生产操作性强的课程探索新的教学模式奠定了基础。

运用多媒体技术优化动物检疫技术课程教学的探讨

在动物检疫技术教学上,多媒体的形式能够调动学生的学习兴趣,增加专业信息量,并且因其交互性而转变教学角色,具有很大的优势。但如果多媒体材料制做粗糙,运用不得当的话,也会使其优势受到局限。这些局限可通过制订合理的教学目标,强调教师在主导地址,和提高教师课件制作能力的方法来解决。

高职教学模式下的动物生理课程改革

动物生理课程是畜牧兽医相关专业的核心专业基础课,在人才培养中起着承前启后的重要作用。本文主要介绍近几年的课程改革与建设方面的探索和实践。通过教学实习、开展设计性实验、期末考核以及更新换代实验设备、网络教学等手段,提高了学生学习本课程的积极性和主动性。

《动物检疫技术》项目课程开发探讨与分析

畜牧业的健康发展和公共卫生安全加强的需要,为动物检疫技术提出了项目课程开发的要求。要求其教学紧扣生产,理论融于实践,以就业为目标,突出工学结合,基于行业标准进行课程考核,并完善教学质量的保障体系。

巴西橡胶树GRAS基因家族鉴定及表达分析

GRAS是植物特有的转录因子,在植物生长发育过程以及非生物胁迫应答中具有重要的调控作用,然而在巴西橡胶树(Hevea brasiliensis)中还未见关于该基因家族的报道。本研究利用生物信息学工具分析巴西橡胶树GRAS基因家族成员的蛋白质理化性质、系统进化关系、基因结构、染色体位置及启动子顺式作用元件,利用转录组数据及实时荧光定量PCR(qPCR)分析橡胶树GRAS基因的表达模式。结果表明:在巴西橡胶树基因组中共鉴定到91个GRAS家族成员,分别命名为HbGRAS1~HbGRAS91,其分子量在14.07~89.46 kDa之间。亚细胞定位预测结果显示,HbGRAS蛋白主要定位于细胞核和叶绿体。系统发育分析将其划分为14个亚家族,同一亚族成员的基因结构和基序组成较为保守。橡胶树GRAS基因分布在除11号染色体外的其他17条染色体和2条Scaffold上,其中17个HbGRAS基因组成10个串联重复事件。共线性分析显示,片段重复区域中有87个HbGRAS基因,说明片段重复可能是橡胶树GRAS基因扩张的主要驱动力。启动子顺式作用元件分析显示,橡胶树GRAS家族包含多个植物激素和胁迫应答顺式作用元件。HbGRAS基因表达具有组织特异性,并与橡胶树叶片发育有关。GRAS亚家族成员DELLA基因的表达与橡胶树木质部发育有关并受赤霉素(gibberellin,GA)抑制。本研究结果为橡胶树GRAS基因的功能研究提供参考。

橡胶树冷应答转录组cDNA-AFLP分析

以橡胶树11个抗寒无性系和12个不抗寒无性系为研究对象,利用cDNA-AFLP技术对23个橡胶树无性系低温处理前后的基因表达谱进行差异分析。结果表明:通过100对引物组合的扩增筛选,共获得12条在2组材料中表现一致的差异片段(GenBank登录号:GO269543-GO269554);BLASTn和BLASTx比对分析显示,TDF7-8,TDF5-15,TDF16-103条片段分别与植物抗逆相关的ABC转运蛋白、3-脱氧-D-阿拉伯庚酮糖-7-磷酸合成酶(DAHPS)、WRKY基因有较高相似性,其余9条片段在GenBank未比对到同源序列。

橡胶树EST-SSR标记的开发与应用

通过对橡胶树10778条EST序列进行拼接,共得到Unigene3090条,从中发掘出分布于353条Unigene的430个EST-SSR位点,SSR发生频率为11.42%,平均分布距离为3.93kb。在橡胶树EST-SSR中,二核苷酸和三核苷酸重复是主要的重复类型,分别占63.49%、32.09%。TC/AG、CT/GA和CTT/GAA、AAG/TTC、AGA/TCT是二、三核苷酸的优势重复类型。利用PRIMER5.0设计引物148对,随机挑选21对引物进行合成,并用其中15对扩增较好的引物,通过变性聚丙烯酰胺凝胶结合银染的方法对44个橡胶树无性系进行了遗传多样性检测,构建了聚类分析树状图。研究结果表明,从橡胶树EST中开发SSR标记是有效、可行的,文章所开发的EST-SSR引物可用于橡胶树遗传分析研究。

用RAPD和ISSR检测的橡胶树野生种质和栽培品种的遗传多样性(英文)

用19个RAPD引物和12个ISSR引物对14份野生橡胶树种质和我国的37份栽培品种进行了遗传多样性分析.RA PD 引物共产生132条带, 多态性带占88.6% ,相似系数变化范围在0.432-0.947,ISSR引物共产生101条带,多态性带占87.1% ,相似系数为0.505-0.941。平均基因杂合度分析表明野生种质比栽培品种具有较高的遗传多样性。根据UPGM A 法对51份材料进行聚类分析,结果表明,ISSR分析中所有材料可分为2类:第一类为野生种质,第二类为栽培品种;而RAPD分析中野生种质和栽培品种不能被分为明显的两大类。虽然ISSR和RAPD的聚类分析结果存在差异,但对两种方法进行的相关分析表明,他们之间仍存在极显著相关性,相关系数为0.574。品种PR107、热研217等一些栽培品种可以通过特异带在51份供试材料中被区分开。这些结果可以对橡胶树的育种工作起到一定的指导作用,同时RAPD和ISSR 技术也是进行橡胶树品种鉴定和遗传多样性研究的有效手段。

黑水虻处理规模化猪场粪便效果及工艺研究

本试验旨在研究黑水虻处理规模化猪场粪便的可行性及处理效果。首先选择2、4、6日龄幼虫对鲜粪进行处理,每组3个重复,选出最佳的添加日龄;随后进行粪便堆料厚度试验,堆料厚度为10、15、20 cm,每组3个重复,选出最佳的堆料厚度;最后用黑水虻幼虫对鲜粪、干粪和沉淀粪进行处理,每组5个重复。结果表明:2、4、6日龄黑水虻幼虫分别处理猪粪便10 d,4日龄的黑水虻处理猪粪便后获得的虫重最多,为1.70 kg,剩余的猪粪便最少,为3.83 kg,粪便减重率达61.67%;堆料厚度15 cm时黑水虻处理效果最好,获得的虫重最多,为17.43 kg,猪粪便减重率最高,为65.33%;4日龄黑水虻处理鲜粪后获得虫重最多,为16.64 kg,猪粪便减重率最高,为65.8%,鲜粪处理效果最好。综上,猪场鲜粪可以直接用黑水虻处理,为黑水虻处理规模化猪场粪便提供试验依据。

氧化苦参碱-黄芪多糖复方对新城疫Ⅳ系疫苗免疫雏鸡血清IL-2和IFN-γ水平的影响

为了探讨氧化苦参碱-黄芪多糖中草药复方对抗新城疫病毒（NDV）感染效果，旨在为筛选确实有效的防治鸡新城疫的中药组方，将14日龄非免疫健康罗曼公雏鸡150羽随机均分为5组，1组-3组分别为氧化苦参碱-黄芪多糖复方高、中、低剂量组，4组为免疫对照组，5组为空白对照组。除空白对照组外均用新城疫Ⅳ系疫苗滴鼻、点眼免疫，28日龄重复免疫。在首次免疫的同时，1组-3组分别口服高、中、低剂量氧化苦参碱-黄芪多糖复方药物，疫苗对照组和空白对照组口服等量生理盐水，每天1次，连续3 d。分别于14、28和42日龄采血，用双抗夹心 ELISA 法检测血清中 IL-2和 IFN-γ的浓度。结果显示，复方的高、中、低剂量在各时间点血清 IL-2浓度显著高于免疫对照组（P ＜0．05）；血清 IFN-γ浓度均显著高于免疫对照组（P＜0．05）。说明中药成分复方能显著增强雏鸡对新城疫疫苗的免疫应答，高、中剂量的效果较好，可用于促进细胞免疫，提高机体抗病能力。

橡胶树HbWRKY3的克隆及其响应逆境胁迫的表达分析

通过RACE技术扩增获得橡胶树HbWRKY3基因,并对该基因及其所编码氨基酸序列进行生物信息学分析和响应逆境胁迫的表达分析,结果表明:该基因含有2个WRKYGQK结构域和2个C2H2锌指结构,属于WRKY基因家族第Ⅰ类;由4个外显子和3个内含子组成,DNA序列全长3 780 bp;开放阅读框长度为2 211 bp,编码由737个氨基酸组成的多肽。该基因定位于细胞核中,在橡胶树叶片、树皮、花、胶乳等不同组织中都有表达,以花中的表达水平最高。盐、PEG、茉莉酸、水杨酸等非生物胁迫均可诱导HbWRKY3的表达,但干旱、ABA、乙烯和低温胁迫的诱导较为明显。

栀子四黄散抗猪繁殖与呼吸综合征的研究

为探索栀子四黄散对猪繁殖与呼吸综合征(porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS)的治疗效果,本研究将45头组随机分为对照组、病毒组及中药高、中、低剂量组5组,每味中药400目超微粉碎后分别添加饲喂接种猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)的试验猪,连续饲喂14 d,每日观察临床症状,7、14和21 d时随机采集5组血清样品进行细胞因子检测,并进行病理剖检和采集肺脏样品进行病理组织切片观察。结果显示,添加中药7 d后临床症状均减轻,中剂量和高剂量组第14天时体温恢复正常,呼吸困难症状消失,食欲恢复,中药治疗组肺脏未见肉样变,肺脏表面有出血点或出血斑。中剂量组肺泡间隔增厚,轻度淤血,肺实质轻度炎性细胞浸润。病毒组猪血清中IgG和γ-干扰素(IFN-γ)含量逐渐降低,白介素-10(IL-10)含量逐渐上升。添加中药的3组血清中IgG含量均高于病毒组,并且IgG含量均随时间延长逐渐上升,中剂量组血清中IgG含量均极显著高于对照组和病毒组(P<0.01);添加中药的3组IFN-γ含量逐渐上升,14和21 d时中剂量组血清中IFN-γ含量均极显著高于对照组和病毒组(P<0.01);中剂量组血清中IL-10含量逐渐降低,14和21 d时与病毒组差异极显著(P<0.01),与对照组差异不显著(P>0.05)。综上,栀子四黄散可有效改善试验猪临床症状、病理变化和细胞因子的分泌,中剂量组效果最好。本研究为中药防治PRRS提供了试验依据。

13份橡胶树新种质对已烯利刺激割制的生理反应

中国橡胶树新种质创新利用进展缓慢,为了深入全面的鉴定橡胶树新种质,加速其利用进程,笔者以RRIM600为对照,采用常规割和乙烯利刺激割制,对1986年定植于大田鉴定评价圃的13份橡胶树新种质的干胶含量、干胶产量、排胶初速度、堵塞指数、胶乳硫醇、无机磷、蔗糖及镁离子含量等生理参数进行了测定分析。结果表明:单从胶乳生理特性而言,并不能从参试种质材料中筛选出特别优良的种质供生产中直接利用,且乙烯利刺激割制下参试材料株次干胶产量均不及对照品种,但9、13号种质在乙烯利刺激割制下表现出了较好的胶乳生理状况,显示出了良好的产胶潜力。

巴西橡胶树CBF1基因的克隆和序列分析

通过RT-PCR技术从橡胶树中克隆了CBF基因家族的保守区,并通过5'端RACE和3'端RACE技术克隆了全长为1121bp的cDNA序列,通过BLAST工具搜索Genbank数据库。结果表明,该cDNA序列同其他植物中的CBF家族基因高度同源,认为该cDNA序列就是橡胶树中的CBF基因。利用genescan和ClastalX工具对该序列进行分析,推测其编码区为693bp,编码231Aa,并包含一个AP2DNA结合域。氨基酸同源性分析结果表明,来自橡胶树的CBF基因氨基酸序列与热带起源的作物同源性较高,而与北方种植作物相似性较低。

“工学结合，校行企互动”人才培养模式的研究

针对当前高职院校在校行企合作人才培养中存在的问题,本文提出了"工学结合,校行企互动"的人才培养模式,通过学校与企业、行业建立相对稳定的契约合作关系,学生的"工"和"学"轮换进行,形成互惠互利、优势互补、共同发展的动力机制。按该模式培养的学生专业技能强、综合素质好,就业质量高,基本实现了与行业、企业的"零距离对接"。

SSR分子标记在橡胶树栽培品种鉴定中的应用

橡胶树是我国重要的热带经济作物,主要通过形态特征进行品种鉴定,但橡胶树品种间形态差异较小,品种鉴定难度较大。为建立一种快速、稳定且准确的橡胶树品种鉴定方法,本研究从426对橡胶树SSR引物中筛选出5对产物清晰且扩增稳定的引物组成核心引物对,利用高通量基因分型技术构建了129份橡胶树品种的特异DNA指纹图谱,5对引物共扩增出71条带,全部为多态性条带,引物平均PIC值达到0.69。基于129份品种的特异DNA指纹图谱,建立了每份品种的DNA指纹二维码。研究成果的获得为橡胶树品种鉴定提供了一种准确、稳定、高效的鉴定方法,也为橡胶树品种知识产权保护提供了可靠的技术支撑。

橡胶树新种质产排胶特性的初步研究

我国橡胶树新种质创新利用进展缓慢,为了深入全面的鉴定橡胶树新种质,加速其利用进程,笔者采用胶乳诊断方法,测定分析了1986年定植于大田鉴定评价圃的14份橡胶树新种质与产排胶密切相关的干胶含量、干胶产量、排胶初速度、堵塞指数及胶乳硫醇、无机磷、蔗糖及镁离子含量等生理参数。结果表明,种质间存在较大差异,但不能从中直接筛选出可供直接利用的种质材料,参试材料中仅有7和12号2份种质株次干胶产量超过对照,产胶、排胶维持在较平衡的状态。因此,除采用常规的33月龄树皮解剖、试割等方法进行早期选择研究外,有必要探索新的早期预测方法。

基于SSR标记的橡胶树无性系鉴定方法的建立

从88对橡胶树SSR引物中筛选出5对产物清晰、扩增稳定的引物,采用6%变性聚丙烯酰胺凝胶电泳结合快速银染检测的方法,构建了87份橡胶树的DNA指纹图谱。5对引物共扩增出16条带,平均每对引物可扩增出3.2条带,多态性条带为15条,扩增条带分布在148～342bp,无性系之间只存在1～2个片段差异,说明遗传差异小;根据建立的无性系数字指纹图谱,能逐一区分65个无性系,表明应用SSR分子标记技术进行橡胶树无性系的鉴定是可行的。

泰州地区规模化猪场猪瘟抗体水平的血清学调查

用ELISA方法对泰州地区18个规模化猪场送检的334份血清进行抗体检测,从送检的样本来看,猪瘟抗体平均保护率为79.3%,但有的猪场猪瘟抗体保护水平仅在50%以下,这样的免疫效果远远不能达到完全防控猪瘟的目的,进一步分析了猪场猪群猪瘟免疫水平低下的主要原因。